CMU1-SOP-HM-MY-202 癌胚抗原

1、作业指导书文件编号：CMU1-SOP-HM-MY-202版本号：A.0名称： 癌胚抗原测定作业指导书生效日期：批准： 第 6页共 6页项目名称： 癌胚抗原 (CEA)目 的：用免疫学方法体外定量测定人血清或血浆中癌胚抗原(CEA)的含量。适合仪器：MODULAR ANALYTICS E170（Elecsys模块）免疫分析仪方法原理：采用双抗体夹心法原理，整个过程18分钟完成。·第1步孵育：30ml标本、生物素化抗CEA单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗CEA单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗CEA单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。·第2步孵育：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复

2、合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。·第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。·检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。样本要求：1.样品种类：人血清、血浆。2.使用容器：血清标本用13mm直径的含有分离胶的黄盖负压真空采血管,血浆标本用紫色盖或蓝色盖的负压真空采血管。3.要求：血清或血浆标本均应不溶血，血浆可用肝素钠、K3EDTA或枸橼酸钠抗凝。接受高剂量生物素（>5mg/天）治疗的病人，至少

3、要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。4.保存：标本在28可稳定7天，-20可稳定6个月，且只能冻融一次。试剂及配套品：1.罗氏诊断公司，CEA试剂，未开封28，可稳定至标明的保质期。开封后28，12周；在E170仪器试剂仓中，6周。2.试剂组成： Elecsys CEA试剂盒，100人份M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml，生物素结合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。R1：生物素化的抗CEA单克隆抗体（灰盖），1瓶，8ml。浓度7.5mg/l，磷酸缓冲液100mmol/l，pH6.0。含防腐剂。R2：Ru(bpy) 32+标记的抗C

4、EA单克隆抗体（黑盖），1瓶，8ml。浓度4.0mg/l，磷酸缓冲液100mmol/l，pH6.5。含防腐剂。试剂使用：1.此试剂为体外诊断使用，按照储存方法保存，避免冷冻。2.试剂盒中的试剂是一个整体,打开后可立即使用,不能被分开。3.装/卸载试剂操作和特殊情况处理，参见仪器操作规程。校准：描述：此方法以1st IRP WHO 参考标准72/225为标准，每批CEA试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用CEA定标液定标校正母定标曲线。1.校准品：德国罗氏诊断公司，AFP定标液。2.定标频率：每批试剂盒必须用新鲜试剂定标一次（如：试剂包在仪器上登记后不超过24小时）。另外，以

5、下情况需要再次定标：· 同一批号试剂一个月后（28天）· 7天（放置仪器上的同一试剂盒）· 根据要求进行定标：如质控结果超出范围时。3.质量监控：见内部质量控制程序和室间质量评价管理程序主要参数：Assay 电化学发光Time（min）18 Sample Volume（ul）11 Reagent Volume（ul）M 65 R1 80 R2 80Calibration TypeFull操作：试剂定标和质控操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。参考区间： 03.4 ng/ml检测范围：0.2001000ng/ml(由master定标曲线的最低检测限与最高检测限

6、决定)。如果测定值低于最低检测限,报告为0.200ng/ml。 如果测定值高于检测范围,报告为>1000ng/ml(结果达到50,000ng/ml样本应作50倍稀释)。稀释：高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。建议1:50稀释。稀释后的标本CEA含量必须高于20ng/ml。软件自动计算结果。干扰物质：该方法不受黄疸（胆红素<65mg/dl）、溶血（血红蛋白<2.2g/dl）、脂血（脂质<1500mg/dl）和生物素<60ng/ml等干扰(标准:最初值的批内回收:±10%)。不受类风湿因子干扰（1500U/ml）。26种常用药物经试验对本测定无干扰。CE

7、A浓度高达200,000ng/ml也不出现钩状效应。性 能：1.灵敏度(最低检测限)：0.20ng/ml ，最低检测限代表能够区别于零的最低检测分析水平。2.特异性：对于单克隆抗体的应用，发现下列交叉反应：NCA1<0.7%，NCA2为72%。与AFP和1-酸性糖蛋白没有交叉反应。与肝脏和肺的糖蛋白的可能交叉反应已经开始进行研究。3.重复性：用Elecsys试剂、人血清、质控物根据国际临床试验室标准协会(National Committee for Clinical laboratory Sdandards)的修改草案(EP5-A)来检验它的重复性,批内变异在5%以内。 可报告范围 ：0

8、.2001000ng/ml临床意义：结肠癌1）结肠癌患者70%90%显示CEA高度阳性；2）血清CEA水平变化与结肠癌Duke分期密切相关，升高时主要见于中晚期肿瘤，进展期结肠癌（Duke分期 C、D期）时阳性率可达70%以上，而Duke A、B期时敏感性只有30%左右；3）对于CEA升高的结肠癌患者，血清CEA水平与癌肿大小、有无转移存在一定关系，当发生肝转移时，CEA升高更为明显。其他肿瘤1）其他消化道肿瘤也可检测到CEA阳性，如大肠癌患者可达65%-75%的阳性， CEA与大肠癌的Duke分期有明确关系，可用于治疗效果的监测；2）内胚层衍生的癌，如胰腺癌、肺癌以及胃癌可导致CEA水平增高；3）非内胚层衍生的癌，如乳腺癌和子宫癌也能使CEA水平增高；4）良性肿瘤10%-20%，以及某些内胚层发生的重症可以导致CEA增高；CEA检测对肿瘤术后复发敏感性很高，可达80%以上，往往早于临床、病理检查、X光检查等。非肿瘤疾病肠道炎症、肾功能不全、结肠息肉、肝硬化、慢性肝炎、闭锁性黄疸等