围产期孕妇B组链球菌检测临床意义

1、围产期孕妇b组链球菌检测临床意义【中图分类号】r71【文献标识码】a【文章编号】 1004-7484 (2013) 09-0711-02b 族链球菌(group b streptococci, cbs)是一种革兰 阳性球菌，常定植于人下生殖道及胃肠道，也可定植于婴幼 儿上呼吸道1-2 o 20世纪60年代首次发现其可导致严重的 新生儿感染，随后进行了大量的研究，发现b族链球菌在围 产期感染中是第一位的致病菌，可导致围产儿死亡。同时也 是孕产妇生殖道感染的重要致病菌，可以导致泌尿系统感 染、羊膜绒毛膜炎、产褥感染、孕产妇败血症和早产3-6 o 1996年美国疾病控制和预防中心(centers f

2、or disease control and prevention, cdc)联合其他专业机构，制定 了 “围产期b族链球菌疾病预防指南”，于2002年进行了 一次较大的修改，并在2010年11月更新了指南。经过10 年多的实践，新生儿gbs感染率下降了约80% 7 o长期以来 我国对b族链球菌感染现状不够重视，直至近期，国内报道 了一些b族链球菌感染导致新生儿死亡的病例，且研究提示, 新生儿肺炎死亡病例中，b族链球菌是第一位的致病菌 8-9 o因此，本研究旨在比较不同方法检测b族链球菌阳 性的准确性，了解妊娠晚期b族链球菌带菌状况及其对妊娠 结局的影响。1材料与方法1. 1研究对象 收集20

3、11年5月2012年12月在我院 妇产科住院和门诊进行b组链球菌检测的孕妇1100例，孕 期为3537周，平均年龄26. 5±14.2岁，其中高龄孕妇 （235岁）109例。经产妇81例，初产妇910例。所有孕 妇的孕周均经末次月经、早中孕期b超检查进行确认和核对。 近期药物应用史，经孕妇知情同意，取材由临床医师规范采 集阴道和直肠拭子2份，立即送检。1. 2实验材料todd hewrtt培养肉汤、哥伦比亚血琼脂、 胎牛血清购于美国gibco公司，rapid id 32 staep鉴定板 条购于法国梅里埃公司，b组链球菌核酸检测试剂盒由中国 泰普生物科技有限公司提供，实时荧光pcr仪

4、购自是美国 stratagene 公司。1. 3方法1. 3. 1标本采集：具体方法参照2002年cdc推荐的取 材方法10,取材时不需要使用阴道窥器，每例孕妇用两根 拭子（阴道下1/3内分泌物，肛门括约肌上23 cm处直肠 分泌物）同时取材，一份用于细菌培养，一份用于实时pcr 技术检测。1.3.2 gbs的分离细菌与培养鉴定：将采集的拭子及时 送检实验室，首先在安全柜内将沾有分泌物拭子头剪下置于 增菌todd hewrtt肉汤中，37°c1824h后，分别接种于10% 胎牛血清和哥伦比亚血琼脂平皿，5%c02环境、37°c1836h, 挑取有b溶血环的细小菌落，经革兰染

5、色镜检为阳性球菌, 触酶试验阴性，进行rapid id 32 staep板条鉴定，若为b 组链球菌，再进行细菌药敏mic实验。1. 3. 3 gbs核酸的提取和实时荧光pcr检测：将取样后 的拭子内加入lml清洗液(试剂盒内提供)，室温震荡5min, 收集清洗拭子后的液体至1.5ml离心管，12000rpm/min离 心3min,弃上清，加入清洗液lml,离心后弃上清，再取80 u 1 清洗液重悬沉淀，加入固型dna提取物0. lg,震荡5miri后, 95°c 2min,冰上 5min, 12000rpm/min 离心 5min,然后取 上清进行pcr扩增。实时荧光pcr扩增程序参

6、照说明书进行 操作。1.3.4测序鉴定：扩增后pcr产物送上海生物工程股份 有限公司进行测序分析。1.4统计学分析 应用统计学软件spss13. 0对所有检测 数据进行分析，计量资料以x±sd表示，计数资料进行x2 检验，以p6h、初产妇产程延长、阴道检查次数6次、伴发 子宫内膜炎及施行剖宫产时更易发生感染。在产科发热患者 血培养所分离到的细菌中，gbs高达11%21%。gbs感染后 的临床特点是发热出现早，平均产后llh即发热，伴有畏寒、 心率快、腹胀、子宫复旧不良，宫旁或附件触痛。有报道在 gbs ( + )而行剖宫产的妇女中，产后子宫内膜炎发生率为61.1%,显著高于gbs (

7、-)组，gbs ( + )也与产后盆腔炎、 蜂窝组织炎等相关，35%由gbs单独引起，65%与其他细菌混 合感染13 o在本研究中，gbs感染与否对孕妇早产的影响 没有统计学差异，但在导致新生儿获得性感染方面，gbs感 染阳性组新生儿感染机率明显高于gbs检测阴性的。原因可 能为：根据新生儿gbs感染发生的时间分为早发型、晚发型 及复发型。早发型指出生后7d内发病，通常发生在出生后 24h或72h内，以新生儿败血症为主，由宫内垂直感染所致; 晚发型感染通常指出生790d内的感染，可由产时垂直传 播、院内感染或其他因素所致，90%为iii型gbs,以肺炎、脑 膜炎为主。有产科并发症的早产儿易受感

8、染，发病率是足月 儿的7倍，因脓毒血症死亡者高达90%；复发性是指新生儿 gbs菌血症、脑膜炎等治愈后，经过一段时间间隔发生了与 gbs菌血症、脑膜炎有关的新的临床疾病，并从体液中找到 gbso发病高峰在出生后90d内，发病率为08. 8%14o由 于新生儿疾病的基础背景不同，预防感染的措施对于早发型 感染有效，但是不能预防晚发型感染。本研究显示,实时荧光定量pcr方法检测围产期孕妇是否伴有gbs感染， 具有较高的敏感性和特异性，如有gbs感染阳性的孕妇，该 方法有利于临床接诊医生及时采取诊疗措施，降低母体宫腔 感染和新生儿早期侵入性感染的发生率，提高母婴的生活质 量，该方法有望成为围产期孕妇

9、监测体内是否有感染的常规 检测项目。小结：围产期孕妇b族链球菌感染阳性明显增加宫内感 染及新生儿入侵性感染的发生率，对妊娠结局造成不良影 响。实时pcr检测b族链球菌感染有较高的敏感度和特异度, 有望成为妊娠晚期孕妇常规检测b族链球菌的方法。参考文献：1 时春燕，曲首辉，杨磊，等妊娠晚期孕妇b族链 球菌带菌状况的检测及带菌对妊娠结局的影响.中华妇产科 杂志，2010, 45： 12-16.2 edwards ms, nizet v, baker cj. group b streptococcal infections/remington js, klein jo, wilson cb, et

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13、族链球菌败血症合并化脓 性脑膜炎两例中国新生儿科杂志，2006, 21： 304-305.9 孙芾，林宏，于俊峰，等孕妇b型链球菌感染率 及药物敏感性分析江西医学检验，2005, 23： 193-194.10 centers for disease control and prevention. prevention of perinatal group b streptococcal disease .revised guidelines from cdc11 马延敏，吴连方，黄醒华孕妇b族溶血性链球菌 带菌与母婴预后的关系.中华妇产科杂志，2000, 35： 32-35.12 verani

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