配制溶液的一般实验步骤

1、配制溶液的一般实验步骤配制溶液步骤因配置的溶液不同而有所不同，现举两个例 子：举例1：配置0. 05mol/L , 400mL NaOH溶液的步骤：要准确配 置氢氧化钠的浓度，则要用容量瓶定容，实验室没有400毫升的 容量瓶，则选用500毫升的容量瓶。1.计算需要氢氧化钠的质 量：0. 5L*0. 05mol/L*40. 01=1. 000 克2 .称1.000克氢氧化钠于烧杯中，加少量水溶解，然后倒入500毫升容量瓶里，分3次洗烧杯，将溶液全部倒入容量瓶里， 最后用水稀释至刻度线，摇匀，即，得到0.05niol/L的氢氧化钠 溶液。如果不需要很准确的话，可以直接用量筒量400毫升，称的时候

2、只要称0.8克就可以了。举例2：配置1. 5mol/L的稀硫酸 200mL步骤：第1步：计算：根据C1VFC2V2 ,计算需要浓硫酸的体积；第2步：量取，利用刻度吸管吸取需要浓硫酸的体积；第3步：稀 释，将浓硫酸转移到小烧杯中，加少量水稀释；第4步：转移， 待溶液温度降低后，将烧杯中的硫酸转移到200mL容量瓶中； 第5步：洗涤，洗涤小烧杯，和转移的时候用到的玻璃棒， 至少三次，将洗涤的水一并转移到容量瓶中；第6步：定容，加水定容到刻度线，在距离刻度线一厘米左右改 用胶头滴管定容；第7步：摇匀，将溶液摇匀，如果液面下降也不可再加水定容； 第8步：将配得的溶液转移至试剂瓶中，贴好标签；举例3：配

3、 制500mL , 0. Imol/L碳酸钠溶液步骤及注意事项所需的仪器： 烧杯、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、分析天平、药 匙、量筒步 骤：第一步：计算：所需碳酸钠的质量二0. 5*0. 1*106=5. 3克； 第二步：称量：在天平上称量5.3克碳酸钠固体，并将它倒入小 烧杯中；第三步：溶解：在盛 有碳酸钠固体的小烧杯中加入适量 蒸储水，用玻璃棒搅拌，使其溶解；第四步：移液：将溶液沿玻 璃棒注入500mL容 量瓶中；第五步：洗涤：用蒸储水洗烧杯2 3次，并倒入容量瓶中；第六步：定容：倒水至刻度线12cm处改用胶 头滴 管滴到与凹液面平直；第七步：摇匀：盖好瓶塞，上下颠倒、摇 匀；第八步：装瓶、

4、贴签；误差分析：固体药品的称量与液体 药品的量取是否准确；把溶液向容量瓶中转移，溶液洒了；未 洗涤烧杯和玻璃棒；用待配液润洗了容量瓶；定容时水加多了 或加少了；定容时未平视刻度 线。仰视、俯视对溶液浓度有何影 响？ 俯视刻度线，实际加水量未到刻度线，使溶液的物质的量 浓度增大；仰视刻度线，实际加水量超过刻度线，使溶液的物质的量浓度 减小。市售盐酸密度L 19,质量分数36%38%以37%计算：步骤：L计算：假若需要2mol/L的硫酸100mL ,则需37% 浓硫酸16.6mL；计算过程如下：假设盐酸VmL ：（0. lL*2mol/L*36. 5g/mol ） /37%=V/1. 19V=16

5、. 59mL,考虑到 量 筒的精确度0.1mL,故取16. 6mL即可。2量取：16.6mL浓硫酸；3 .溶解：把16.6mL浓硫酸倒入已经加入蒸储水的小烧杯中，用 玻璃棒不断搅拌。4.转移：待溶液冷却后，将溶液沿玻璃棒倒入 100毫升的容量瓶中。5.洗涤：再用少量蒸饵水洗涤烧杯和玻璃棒2-3次，并将全部洗液移入容量瓶中。6 .定容：向容量瓶内加蒸储水，当液面接近刻度线2厘米处 时，改用滴管滴加蒸储水到一面恰好与刻度线相切。7 .摇匀：塞上瓶塞，反复颠倒容量瓶数次，使瓶内的溶液均匀， 此时可以把溶液倒入到试剂瓶中贴标签保存。完成配制过程容量 瓶的使用六忌：L忌用容量瓶进行溶解（体积不准确）2.

6、忌直接往容量瓶倒液（洒到外面）3.忌加水超过刻度线（浓度偏低）4,忌读数仰视或俯视（仰视浓度偏低,俯视浓度偏高）5.忌不洗涤玻璃棒和烧杯（浓度偏低）6.忌标准液存放于容量瓶（容量瓶是量器，不是容器）1 mol/L 的氢氧化钠溶液250mL ,完成下列步骤：用天平称取氢氧化 钠固体/克。将称好的氢氧化钠固体放入烧杯中加少量蒸储水 将其溶解，待完全溶解后将溶液沿玻璃棒移入250mL的容量瓶 中。用少量蒸储水冲洗23次，将冲洗 液移入容量瓶中，在操作过程中不能损失点滴液体，否则会 使溶液的浓度偏低。向容量瓶内加水至刻度线12cm时，改用胶头滴管小心地加水至溶液凹液面与刻度线相切，若加 水超过刻度线，

7、会造成溶液浓度偏低应该重新配制。 最后盖 好瓶盖，摇匀，将配好的溶液移入试剂瓶中贴好标签。常用贮液 与溶液lmol/L亚精胺(Spermidine )：溶解2. 55g亚精胺于足量的水 中，使终体积为10mL。分装成小份贮存于-20 Co lmol/L精胺 (Spermine):溶解3. 48g精胺于足量的水中，使终体积 为10mL。 分装成小份贮存于-20C。10mol/L乙酸胺(ammoniumacetate):将77. 1g乙酸胺溶解于水中，加水定 容至 1L后，用0. 22um孔径的滤膜过滤除菌。10mg/mL牛 血清蛋白 (BSA):力口 100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生 物学

8、试剂级，无 DNA酶)于9. 5mL水中(为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是 将水加入蛋白)，盖好盖后，轻轻 摇动，直至牛血清蛋白完全溶 解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml ,然后分装成小份贮 存于-20C。lmol/L二硫苏糖醇(DTT )：在二硫苏糖醇5g的 原装瓶中加32. 4mL水，分成小份贮存于-20C,或转移lOOmg的二 硫苏糖醇至微量离心管，加0.65mL的水配制成lmol/L二硫苏 糖醇溶液。8mol/L乙酸钾(potassiumacetate):溶解78. 5g乙酸 钾于足量的水中，加水定容到100mL。lmol/L氯化钾(KC1):溶解 7.46g氯化钾于足量的水

9、中，加水定容到100mL。3moi/L乙酸钠(sodiumacetate):溶解40. 8g的三水乙酸钠于 约90mL水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100过。0. 5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0. 5mol/L ）,混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186. 1g的 Na2EDTA 2H20和20g的NaOH,并溶于水中，定容至1L。lmol/L HEPES :将 23. 8gHEPES 溶于约 90mL 的水中，用 NaOH 调 pH （6. 8-8. 2），然后用水定容至 100mlo lmol/L HC1 :力口 8. 6ml的浓盐

10、酸至91.4ml的水中。25mg/ml IPGT :溶解250mg的IPGT （异丙基硫代-3 -D-半乳糖甘）于10ml水 中，分成小份贮存于-20 Co 1皿1/川8加2:溶解20.38 MgCI2 6H20于足量的水中，定容到lOOmLo 100mmol/LPMSF :溶解174mg的PMSF （苯甲基磺酰氟）于足量的异 丙醇中， 定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹或贮存于-20。Co 20mg/mL 蛋白酶 K （ proteinase K）:将 200mg 的蛋白酶 L 加 入到9. 5mL水中，轻轻摇动，直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋 混合。加水定容到10ml,然后分装成

11、小份贮存于-20 Co 1 Omg/mL R-nase （无 D-Nase） （ D-Nase freeR-Nase）:溶解 lOmg 的胰蛋白RNA酶于1mL的lOmmol/L的乙酸钠水溶液中（PH5.0）。溶解后于水浴中煮沸15min ,使DNA酶失活。用lmol/L的Tris HC1调pH至7.5,于- 20C贮存。（配制过程中要戴手套）51noi/L氯化钠（NaCl）:溶 解29.2g氯化钠于足量的水中，定容至100mL。10N氢氧化 钠（NaOH ）:溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中（磁力搅拌器搅拌），氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。10% SDS （十二烷基硫酸钠）：称取lOOgSDS慢慢转移到约 含0. 9L的水的烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定 容至IL。2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol）:溶解36. 4g山梨（糖）醇于足量水中使终体积为100mLo100%三氯乙酸CTCA）:在装有500gTCA的试剂瓶中加入100矶水，用 磁力搅 拌器搅拌直至完全溶解。（稀释液应在临用前配制）2. 5%X - gal （5-溟4氯-3-口弓|蛛一8