枸杞多糖及丹参酮延缓小鼠皮肤衰老实验探究

1、枸杞多糖及丹参酮延缓小鼠皮肤衰老实验探究【摘要】目的比较枸杞多糖与丹参酮对衰老小鼠皮肤的 抗衰老作用。方法60只雌性昆明种小鼠，随机分为4组 (n=15):正常对照组皮下注射生理盐水；其余3组每日颈背 部皮下注射d-半乳糖1000 mg/(kg&#8226；d)造成小鼠 衰老模型，同时各组分别灌胃生理盐水(衰老模型组)、枸杞 多糖200 mg/(kg&#8226；d)、丹参酮1 500 mg/(kg&#8226；d)o 42 d后，测定小鼠背部皮肤组织匀浆中 超氧化物歧化酶(s0d)活力、过氧化脂质代谢产物丙二醛 (mda)含量和皮肤释脯氨酸(hyp)含量。结果枸杞多糖

2、可使 衰老模型小鼠皮肤中mda含量显著降低，较丹参酮组明显； 但sod活力显著升高，不及丹参酮组改变显著；枸杞多糖和 丹参酮均可使释脯氨酸含量升高，且效果相当。结论 枸杞 多糖与丹参酮都有显著的抗小鼠皮肤衰老作用，枸杞多糖清 除皮肤中脂质过氧化代谢产物方面较丹参酮明显，而提高皮 肤抗氧化酶活力则不及丹参酮显著，在增强成纤维细胞活性 方面两者效果相当。【关键词】皮肤衰老；枸杞多糖；丹参酮experimental research on the skin aging functionof tanshinoneand lycium barbarum polysaccharidesliang jie,

3、 li xia ng. departme nt of plastic surgery, affiliated hospital of guangdong medical college,zhanjiang,guangdong 524001, chinaabstract】 objective to compare the anti-aging effects of lycium barbarum polysaccharides and tanshinone on the skin of d-galactose-induced mice aging model methods 60 female

4、mice were randomly divided into 4 groups (n=15):mice in normal control group received subcutaneous injection of normal saline and mice in the other 3 groups received cervicodorsal injection of d-galactose 1000 mg/ (kgl&#8226； d) for 42 d to establish subacute aging model the experimental groups

5、included agingmodel group (without further treatment), lycium barbarum polysaccharides 200 mg / (kg&#8226；d)group , tanshinone 1500 mg /(kg&#8226； d) group forty two days later, the dorsal skin samples were collected to determine sod activities mda and hydroxyproline contents. resuits the ef

6、fect of lycium barbarum polysaccharides isbetter than tanshinone significantly in decrease the content of mda, but in in crease the sod activity tanshin one have better effectiori. both of them can increaseing the hydroxyproline contents , but these is no different. conclusion both lycium barbarum p

7、olysaccharides and tanshinone have noticeable anti-skin aging effects , lycium barbarum polysaccharides is better than tanshinone in clearing skin lipid peroxidation metabolites aspects , but tanshinone have better effection in enhancing oxidase activity , they have no different effection in enhance

8、ing fibroblasts.【key words 】 skin aging ； lycium barbarum polysaccharides； tanshinone当今社会由于老龄化的加速到来以及人们对美的强烈 追求，希望借助医学手段延缓衰老，永保青春。枸杞为茄科 植物枸杞成熟果实，明朝李时珍在本草纲目中记载：枸 杞有“久服，坚筋骨，轻身不老，令人长寿”等功 效。枸杞多糖(lycium barbarumpoysaccharides, lbp)是 枸杞子的主要活性成分之一，有抗氧化延缓皮肤衰老的作 用。丹参酮是唇形科植物(salvia miltorrhiza bge)的有效 成分，有明显抗

9、衰老作用1。笔者在d-半乳糖所致小鼠衰 老模型基础上分别灌服枸杞多糖或丹参酮，比较二者对衰老 小鼠皮肤中某些抗衰老指标的影响。1材料与方法1.1动物3月龄清洁级雌性昆明种小鼠60只，平均体 质量(25±2) g购自广东医学院实验动物中心，随机分为4组，正常对照组、d-半乳糖衰老模 型组、枸杞多糖组、丹参酮组，每组15只。1. 2方法1.2. 1实验步骤 灌胃、皮下注射均按无菌操作进行。42 d后，小鼠断颈处死，背部皮肤取下后迅速冰冻保存， 拟作皮肤组织匀浆及测定皮肤抗衰老指标用。正常对照组： 每日颈背部皮下注射生理盐水0. 2 ml,同时灌服生理盐水 (0. 1 ml /10 g)；

10、 d-半乳糖(衰老模型)组：每日颈背部皮 下注射d-半乳糖1000 mg/ (kg&#8226；d),同时灌服生理 盐水(0.1 ml / 10 g)；枸杞多糖组：每日颈背部皮下注射d-半乳糖l (1000 mg/ (kg&#8226；d),同时灌服枸杞多糖200 mg/ (kg&#8226； d)；丹参酮组：每日颈背部皮下 注射d-半乳糖1000 mg/ (kg&#8226；d),同时灌服丹参酮1 500 mg/ (kg&#8226；d)。1.2.2 10%皮肤匀浆的制备 取脱毛后背部皮肤组织0.5 g左右，经预冷生理盐水漂洗，除去皮下脂肪和其他结缔组

11、 织，滤纸拭干，称重，量筒量取该组织块9倍重量预冷生理 盐水，先取2/3量倒入装有组织块烧杯中，剪碎组织块后倒 入匀浆管中，将剩余1/3生理盐水冲洗烧杯壁，一起倒入匀 浆器中进行匀浆，上下转动研磨数10次(1015 min),充分 研磨，使组织浆液化。再将制备好的10%匀浆用低温低速离 心机以转速3000转/min离心15 min,取上清液备用。1.2.3皮肤s0d活力测定 参照南京建成生物工程公司 sod试剂盒说明书方法测定sod活力，单位以u/ ml表示。1.2.4皮肤mda含量测定 硫代巴比妥酸(tba)法测定 mda 含量2o组织中mda (umol/g)=(测定管吸光度-测定空白管吸

12、 光度)/(标准管吸光度-标准空白管吸光度)x标准品浓度 (10 u mol/l)/蛋白含量(g / l)1.2.5皮肤務脯氨酸含量测定参见文献3o1.3统计学方法采用spss 11.0统计分析软件，计量 资料均以均数土标准差x±s表示，多个样本均数的比较用 方差齐性检验，当总体方差齐同时选择lds法分析；方差不 齐时选择dunnet c法分析。p0. 05),说明枸杞多糖和丹参 酮均能增强成纤维细胞活性，促进皮肤胶原蛋白合成。3讨论皮肤是最早反应机体衰老的组织，已经引起众多学者对 皮肤皱纹、弹性及营养变化等的防治研究4,因此预防和 延缓皮肤衰老已成为医学和美容的研究热点5o本实验结

13、 果证实，枸杞多糖和丹参酮均有显著的抗皮脐衰老作用，但 枸杞多糖提高d-半乳糖所致衰老模型小鼠皮肤中sod活力作 用不及丹参酮显著。sod作为体内天然的抗氧化酶之一，有 清除自由基的作用，其活力的提高有益于机体抗氧化能力的6, 7,其机制可能为丹参酮有明显扩张小血管、抑制血 小板聚集、降低血粘度、改善微循环的作用，从而使毛细血 管网开放，血流加速，动脉血氧分压和血氧饱和度升高，组织 新陈代谢增强,atp合成增加，促进抗氧化酶类合成，皮肤中 sod活力增强，提高细胞清除h202和-02能力，保护细胞免 受自由基损伤，而延缓衰老进程；丹参酮又有ca2+拮抗剂作 用，可阻止ca2+进入细胞内，抑制黄

14、嚓吟脱氢酶向黄嚓吟氧 化酶转变，减少自由基产生；另外，丹参酮又有轻微雌激素作 用，对皮肤衰老亦有改善作用。枸杞多糖降低d-半乳糖所致 衰老模型小鼠皮肤中mda含量作用却较丹参酮显著，其机制 可能为枸杞多糖有很强的抗氧化作用，能保护细胞内抗氧化 酶类活性，从而阻止多价不饱和脂肪酸的过氧化反应，抑制 过氧化脂质生成，维持生物膜正常脂质结构和生理功能而发 挥抗衰老作用。枸杞多糖和丹参酮均可使成纤维细胞活性增 强，胶原蛋白合成增加，而延缓衰老进程。总之，枸杞多糖和 丹参酮均有显著抗皮肤衰老作用，但二者侧重点不同。参考文献1 王红丽，吴铁，陈垦，等.丹参酮抗d-半乳糖所致 小鼠皮肤衰老作用.中国医院药学

15、杂志，2005 ,25(2):130-132.2 梁杰，张陈威，李建赤，等.小鼠皮肤超氧化物歧 化酶活性与枸杞多糖的干预.中国组织工程研究与临床康 复，2007,11(36):7207-7210.3 徐叔云，陈修.药理实验方法学.人民卫生出版 社,2002： 1464._4 li sp, zhang gh, zeng q, etal. hypoglycemic activity polysacohadde, with antioxidation, isolated from cultured cordyceps mycelia phytomedicine,2006, 13 (6): 428-4

16、33. pmid：16716913.5 kagan ve, kisin er, kawai k, et al. toward mechanism-based antioxidant interventions：lessons from n atural antioxidants .arm n y acad sci,2002,959：188-198. pmid：11976196.6 lin ad, mannikarottua, kogan ba, et a 1. effectof bilateral in vivo ischemia/ reperfusion on the activities of superoxidedismutaseandcatalase：response to a standardized grape suspension mol cell biochem ,2007,2