砷盐检查标准操作规程

1、碑盐检查标准操作规程目的：建立碎盐检查标准操作规程。2. 依据：中华人民共和国药典2000年版。3. 范围：适用于药品中碑盐的检查。4. 职责：qc检验员对木标准的实施负责。5. 程序：5.1. 简述：5.1.1. 碑盐检查法适用于药品中微量础盐（以as计算）的限量检查。5.1.2. 碑盐检查法中的第一法（占蔡氏法）用作药品中碑盐的限量检查；第二法（二 乙基二硫代氨基甲酸银法）既可检查药品中碑盐限量，乂可测定含量；两法并列，可根据需 要选用。5.13占蔡氏法是利用金属锌与酸作用产生新生态的氢与药品中微量亚碑酸盐反应 生成具有挥发性的碑化氢，遇溟化汞试纸产生黄色至棕色的砒斑，与同一条件下定量标准

2、础 溶液所产生的碑斑比较，以判定碑盐的限量。5.4.1.1.1. 二乙基二硫代氨基甲酸银法是将生成的碑化氢气体导入盛有二乙基二硫代氨 基甲酸银试液的管中，使z还原为红色胶态银，与同一条件下定量的标准碑溶液所制成的对 照液比较，或在510nm波长处测定吸收度，以判定含碑盐的限度或测定含量。5.2. 仪器与用具：5.2.1. 第一法（占蔡氏法）按药典规定。有机玻璃塞d和e的孔径应与导气管c内径一致，以免生成的色斑直径不同，影响比色的准确度；b磨口塞，c管顶端与d、e有 机玻璃旋塞塞盖间应紧密吻合，以防碑化氢泄漏。522.第二法（二乙基二硫代氨基甲酸银法）按药典规定。b磨口塞应密闭，以防砒化 氢泄漏

3、；与标准磨口塞b和连的导气管c 一端长度应不低于80mm,便于装醋酸铅棉屁达 80mm,另一端长度应不低于180mm尖端内径不可超过1mm,以保证产生的砒化氢吸收完 全；d管的标准管与样品管要一致，管内径，色泽，刻线要相同。5.3. 试药与试液：5.3.1. 标准神溶液：精密称取105°c干燥至恒重的三氧化二神0.132g,置1000ml量瓶 中，加20%氢氧化钠溶液5ml溶解后，用适量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml,用水稀释 至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml,置1000ml量瓶中，加稀硫酸10ml,用水稀释至刻度， 摇匀即得（每lml相当t l.ou g的

4、as）。5.4.2.1. 碘化钾试液：按药典规定，应临用新配。5.4.2.2. 酸性氯化亚锡试液：按药典规定，配成后3个月即不适用。5.4.2.3. 乙醇制漠化汞试液：按药典规定，应置棕色磨口塞玻璃瓶内，在暗处保存。5.4.2.1.1. 漠化汞试纸：取质地较疏松的中速定量滤纸条浸入乙醇制漠化汞试液中，1 小时后取出，在暗处干燥，即得。本试纸宜置棕色磨口塞玻璃瓶内保存。5.36 锌粒：以能通过1号筛的细粒无神锌为宜，如使用锌粒较大时，用量酌情增 加，反应吋间亦应延长为1小吋。5.5. 酷酸铅棉花：取脱脂棉，浸入酷酸铅试液与水的等容混合液中，湿透后，沥 去过多的溶液，并使之疏松，在100°

5、;c以下干燥后，贮于磨口塞玻璃瓶中备用。5.6. 二乙基二硫代氨基甲酸银试液：按药典规定。本液应置棕色玻璃瓶中，密塞， 置阴凉处保存。操作方法：5.5.1. 第一法（古蔡氏法）5.5.9. 标准神斑的制备：5.5.12. 装置的准备：取酷酸铅棉花适量（60loomg）撕成疏松状，每次少量，用细玻璃棒均匀地装入导气管c中，松紧耍适度，装管高度为6080mmo用玻璃棒夹取浣 化汞试纸1片（其犬小能覆盖d顶端口径而不露出平面外为宜），置旋塞d顶端平面上，盖 住孔径，盖上旋盖e并旋紧。5.5.13. 精密量取标准神溶液2ml,置a瓶中，加盐酸5ml与水21ml,再加碘化 钾试液5ml与酸性氯化亚锡试液

6、5滴，在室温放置10分钟后，加锌粒2g,立即将准备好的 导气管c密塞于a瓶，并将a瓶置25-40°c水浴中反应45分钟，取出漠化汞试纸，即得。5.5.10. 检查法：取照该药品项下规定方法制成的供试液，置a瓶中，照标准神斑 的制备，自“再加碘化钾试液5ml”起依法操作。将生成的神斑与标准神斑比较，即得。5.5.2. 第二法（二乙基二硫代氨基甲酸银法）5.6.1. 标准神对照液的制备：5.6.2.1. 装置的准备 取酷酸铅棉花适量（80-loomg）,撕成疏松状，每次少量，用细玻璃棒均匀地装入导气管c中，松紧耍适度，装管高度约80mmo精密量取二乙基二硫 代氨基甲酸银试液5ml置d管中

7、。542.12 精密量取标准神溶液2ml,置a瓶中，加盐酸5ml与水21ml,再加碘化 钾试液5ml与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10分钟后，加锌粒2g,立即将准备好的 导气管c与a瓶密塞，使生成的神化氢气体导入d管中，并将a瓶置25-40°c水浴中反应 45分钟，取出d管，添加氯仿至刻度，混匀，即得。5422 检查法：准备好c管装置，取照该药品项下规定方法制成的供试液，置a 瓶中，照标准神对照液的制备，自“再加碘化钾试液5ml”起依法操作。将所得溶液与标准 神对照液同置白色背景上，从d管上方向下观察，比较，即得。必要吋，可将所得溶液与标 准神对照液分别转移至lcm吸收池中，用分

8、光光度计，在510nm波长处，以 二乙基二硫代氨基甲酸银试液作空白，分别测定吸收度。5.7.1. 注意事项：所用仪器和试液等照木法检查，均不生成神斑，或经空白试验至多生成仅可辨认 的斑痕。新购置的仪器装置，在使用前应检查是否符合耍求。可将所使用的仪器装置依法制备标准神斑，所得神斑应呈色一致；同一套仪器应能辩别出标准神溶液1.5ml与2.0ml 所呈神斑的深浅。制备标准神斑或标准神对照液，应与供试品检查同时进行。因神斑不稳定， 反应中应保持干燥及避光，并立即比较。标准神溶液应于实验当天配制，标准神贮备液存放 时间一般不宜超过一年。第一法（古蔡氏法）反应灵敏度约为0.75 u g （以as计），神

9、斑色泽的深度 随神化氢的量而定，药典规定标准神斑为2ml标准神溶液（相当于2ugas）所形成的色斑, 此浓度得到的神斑色度适中，清晰，便于分辨。供试品规定含神限量不同吋，采用改变供试 品取用量的方法来适应耍求，而不采用改变标准溶液取量的办法。药品中存在的微量神盐常以三价的亚神酸盐或五价的神酸盐存在，五价状态 的伸生成神化氢比三价神慢，故先加入碘化钾和氯化亚锡为还原剂，使五价神还原为三价神。如供试品中存在锤盐，将干扰神盐检查，所以木法不适用供试品为锤盐中神盐检查。但在药典规定的实验条件下，100ug的怫存在不致于干扰测定。实验中加入氯化亚 锡不仅有效地抑制铢的干扰，防止窗化氢与浣化汞试纸作用生成

10、锤斑或与二乙基二硫代氨基 甲酸银试液反应，干扰神盐检查，还可与锌作用，在锌粒表面形成锌锡齐，起去极化作用， 从而使氢气均匀连续地发生，使产生的神化氢气体一致，有利于神斑的形成。供试品和锌粒中可能含有少量硫化物，在酸性溶液中产生h2s气体，干扰 实验，故用酷酸铅棉花吸收除去h2s；因此，导气管中的酷酸铅棉花，耍保持疏松、干燥， 不耍塞入近下端。5.58 浸入乙醇制混化汞试液的滤纸的质量，对生成神斑的色泽有影响，用定性滤 纸，所显神斑色调较暗，深浅梯度无规律；用定量滤纸质地疏松者，所显神斑色调鲜明，梯 度规律，因此必须选用质量较好，组织疏松的中速定量滤纸；漠化汞试纸一般宜新鲜 制备。锌粒大小影响反

11、应速度，为使反应速度及产生神化氢气体适宜，选2mm左右粒径的锌粒。反应温度一般控制在30°c左右，冬季可置温水浴中。如反应太快，宜适当降 低反应温度，使神化氢气体能被均匀吸收。如供试品为铁盐，需先加酸性氯化亚锡试液，将高铁离子还原为低价铁而 除去干扰。如枸槪酸铁鞍的神盐检查。5511.有机药品中的神盐检查：可溶于水的脂肪族有机酸如枸椽酸、乳酸及其盐、 氨基已酸与葡萄糖酸钙等，一般可不经有机破坏而直接依法检查神盐；多数环状结构的有机 药物，因神与杂环分子可能以共价键结合，需先行有机破坏，否则检出结果偏低或难以检出。 有机破坏时，所用试剂的含神量如超过lug,除另有规定外，对照标准液应取

12、同量的试剂按 供试品同样处理，最后加入神标准液一定量，与供试品比较所生成神斑的颜色。6. 如供试品为硫化物、亚硫酸盐或硫代硫酸盐等，则在酸性溶液中可生成犬 量硫化氢或二氧化硫气体，干扰检查；可加硝酸使氧化成硫酸盐以除去干扰，如硫代硫酸钠 中神盐检查。7. 在二乙基二硫代氨基甲酸银法中，需耍加入一定量的有机碱以中和反应中 的二乙基二硫代氨基甲酸；uspxxii配制成0.5%二乙基二硫代氨基甲酸银的毗唳溶液，其缺 点是毗睫有恶臭；中国药典1995年版采用含1.8%三乙胺和0.25%二乙基二硫代氨基甲酸银 的氯仿溶液，呈色稳定性及试剂稳定性均好，低毒、无臭，与神化氢产生的颜色在510nm波 长处有最

13、大吸收；如遇室温低，按法操作，标准神对照液不显色，可将d管置25-40°c水 浴加温使显色。8. 二乙基二硫代氨其甲酸银试液在配制后两周内稳定。当供试液中含神(as)0.757.5 u g吋显色反应的线性关系良好，2小时内稳定，重现性好。木法操作时，由于神 化氢气体导入盛有准确5ml的二乙基二硫代氨基甲酸银试液中，在2540°c水浴中反应 45min后，有部分氯仿挥发，比色前应添加氯仿至5.00ml,摇匀，比色。因二乙基二硫代氨基甲酸银试液带浅黄绿色，测吸收度时耍用此试液作空白。5.7.2. 记录与计算：9. 记录：必须记录采用的方法，样品取样量，标准神溶液取用量，操作过程

14、， 使用特姝试剂、试液的名称和用量，实验过程中出现的现象及实验结果等。10. 计算：11. 标准神溶液浓度的计算：lmol的三氧化二神质量为197.82g,含神(as) 2x74.92g,称取三氧化二神0.132g溶 于1000ml溶液中配成的贮备液，每lml含as量为:2x74.92 x0.132x 1000 f197.8x1000lmg贮备液定量稀释100倍后所得标准打巾溶液，每lml含as量为lpgo5622 砂限量计算：进行限量检查时，取标准呻溶液2ml制成对照液，与供试品 溶液在相同条件下处理比较帥斑或吸收液颜色的深浅，从而确定帥含量是否超过规定，呻限 量可用下式计算：不申限量=标准碑溶液体积(ml) x标准碑溶液浓度(g/ml) wo和 供试品量(g)°如取标准帥溶液2ml,标准硼溶液浓度0.00000lg/ml,供试品取样lg；神限量=1x 100%-0.0002% (百万分之一)5623 供试品取样量