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文档简介
1、一、胃蛋白酶原的特性一、胃蛋白酶原的特性三、胃蛋白酶原三、胃蛋白酶原I/III/II临床应用临床应用四、胃蛋白酶原的检测四、胃蛋白酶原的检测第1页/共21页一、胃蛋白酶原的特性 (pepsinogen)第2页/共21页胃蛋白酶原I/II (PG I/II)分泌部位PG是胃底腺的主细胞和颈粘液细胞分泌; PG除主细胞和颈粘液细胞分泌外,幽门腺和十二指肠腺亦可产生.第3页/共21页PGI&PGII第4页/共21页胃蛋白酶原I/II( PG I/II)第5页/共21页介绍内容介绍内容一、一、胃蛋白酶原的特性胃蛋白酶原的特性三、三、胃蛋白酶原胃蛋白酶原I/III/II临床应用临床应用四、胃蛋白
2、酶原的检测四、胃蛋白酶原的检测第6页/共21页检测方法检测方法 放射免疫测定法(RIA)(RIA):有放射性有放射性 酶免疫测定法( EIA)( EIA): 需样少需样少, , 较低特异性和较低特异性和灵敏度灵敏度 时间分辨荧光免疫分析法( TRFIA)( TRFIA):灵敏、简灵敏、简便便, ,较高特异性、灵敏度较低、易受干扰。较高特异性、灵敏度较低、易受干扰。 乳胶增强免疫比浊法:较低灵敏度及特异性较低灵敏度及特异性, ,方方便便, ,适合大规模筛查,易受干扰。适合大规模筛查,易受干扰。五、胃蛋白酶原检测五、胃蛋白酶原检测第7页/共21页第8页/共21页五、胃蛋白酶原检测酶标板酶标板反应底
3、物反应底物包被抗体包被抗体检测抗原检测抗原酶标抗体酶标抗体酶标抗体酶标抗体反应产物反应产物酶免疫测定法第9页/共21页乳胶免疫测定法(LIALIA法) 以血清或血浆为样本,利用全自动生化分析仪对样本的乳胶凝集反应所导致的吸光度变化进行检测。 将抗PG IPG I(IIII)抗体与乳胶颗粒表面结合制成乳胶试剂,与试验样本中的PG IPG I(IIII)反应,使乳胶颗粒产生凝集。在确定的波长下测定该反应的浊度变化,其变化量会随着检测样本中PG IPG I(IIII)的浓度而成比例增加。根据已知浓度的PG IPG I(IIII)标准液制备标准曲线,求出样本中PGIPGI(IIII)的浓度。第10页/
4、共21页+乳胶颗粒 抗体 抗原 乳胶免疫测定法(LIALIA法)凝集产生浊度 第11页/共21页化学发光(chemiluminescencechemiluminescence)是指伴随化学反应过程所产生的光的发射现象。 某些物质( (发光剂) )在化学反应时,吸收了反应过程中所产生的化学能,使反应的产物分子或反应的中间态分子中的电子跃迁到激发态,当电子从激发态回复到基态时,以发射光子的形式释放出能量,这一现象称为化学发光。化学发光法原理第12页/共21页底物A A底物B B发光反应化学发光酶免疫分析法(CLEIACLEIA)第13页/共21页胃蛋白酶原I/II I/II (PGI/PGIIPG
5、I/PGII)试剂盒性能指标BSBE最低检测限为PGI:PGI:1 1ng/ml,PGII:ng/ml,PGII:1 1ng/mlng/ml线性范围,PGI:,PGI:200200ng/mLng/mL,PGII:PGII:100100ng/mLng/mL抗干扰性:0.1g/l0.1g/l的胆红素、18g/l18g/l的甘油三酯和2.5g/l2.5g/l的血红蛋白, RF, RF为520IU/ml520IU/ml, 小于上述浓度的物质不会对该试验产生干扰 稳定性:开盖放在试剂仓中1414天,空白无变化,质控结果基本无变化,可两点定标第14页/共21页采血要求 静脉采血2-3mL2-3mL于普通管
6、中(不能使用含EDTAEDTA、枸橼盐酸试管),离心分离出血清。 2-82-8条件下,样本可保存7 7天,-20-20可长期保存。避免样本反复冻融。五、胃蛋白酶原检测第15页/共21页 检验方法 实验前准备: 1. 将试剂盒从冷藏环境中取出,放置室温(1825)平 衡至少30分钟。 2. 将恒温箱或恒温水浴锅温度调到37,待温度稳定后使 用。 3. 取1包固体洗液用500mL纯化水溶解后备用。 实验步骤: 较准品较准品或血清或血清酶结酶结合物合物室温室温振荡振荡 洗板洗板 拍干拍干发光底发光底物物A A、B B 发光发光仪检测仪检测包被板包被板3737温育温育 60min60min第16页/共21页第17页/共21页河南美凯生物其他二类产品A A:化学发光定量检测系列产品 1)性激素系列 LH、FSH、PRL、T、P、E2、fE3 2)甲功系列 T3、fT3、T4、fT4、TSH、Anti-TG、Anti-TPO 3)糖尿病系列 C-P、INSB B:胶体金快速检测系列产品 LH、HCGC C:微生物类系列产品 BV诊断(唾液酸酶法)、BV联合检测(化学反应法)、 Uu和Mh培养鉴定药敏(微生物检验法)。第18页/共21页 厂家:河南美
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