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文档简介

1、名词解释1半不连续复制:在生物中普遍存在的这种前导链的连续复制和滞后链的不连续复制方式,称为DNA合成的半不连续性复制2反转录:以RNA为模板,按照RNA中的核苷酸顺序合成DNA,也称为逆转录,由逆转录酶催化进行。3遗传密码:核酸中的核苷酸残基序列与蛋白质中的氨基酸残基序列之间的对应关系。连续的3个核苷酸残基序列为一个密码子,特指一个氨基酸4冈崎片段在DNA复制过程中,后随链合成是不连续的,即先按5-3方向(与复制叉移动方向相反)合成若干片段,即为冈崎片段。5前导链::与复制叉移动的方向一致,通过连续的5-3聚合合成的新的DNA链6 cDNA::互补DNA8 intron 内含子:真核生物的断

2、裂基因中的非编码序列称为内含子。其转录产生的RNA片段在RNA的修饰过程中被剪切掉。9起始子(initiator):II类启动子在转录起始部位周围有一段保守序列10 Operon操纵子:原核生物中,功能相关的基因通常一起被调控,这些被协同调控的基因组织起来的结构叫做操纵子11多顺反子mRNA:操纵子上所有基因被RNA聚合酶转录成的一条长链mRNA12exon外显子 在断裂基因及其初级转录产物中出现,并表达为成熟RNA的核苷酸序列13断裂基因 由若干内含子和外显子互相隔开,但又连续镶嵌的基因14 Cistron顺反子:遗传学中,编码一个多肽的遗传单位。15 Polycistron多顺反子:原核细

3、胞中数个结构基因常串联为一个转录单位,转录生成的mRNA可编码几种功能相关的蛋白质。16 Single cistron单顺反子:真核mRNA只编码一种蛋白质17 Enhancer增强子:,能强化转录起始的序列的为增强子或强化子18 Silencer:沉默子,可降低基因启动子转录活性的一段DNA顺式元件。与增强子作用相反19 基因(gene):是指携带有遗传信息的DNA或RNA序列,也称为遗传因子,是控制性状的基本遗传单位20编码区(coding regions),开放阅读框(open reading frame,ORF):可以翻译成蛋白质的DNA区域;在真核细胞中,编码区可被内含子隔断21非编

4、码区(internal noncoding regions),非翻译区(untranslated regions,UTRs):转录单位中不能翻译成蛋白质的部分22基因座(locus):又称座位。基因在染色体上所占的位置。在分子水平上,是有遗传效应的DNA序列23基因组(genome):生物机体一个细胞所有不同染色体上全部的DNA总和称为基因组24基因转移(gene transfer):外源的遗传信息进入一个细胞的现象25转化(transformation):细胞从周围介质中吸收裸露的DNA,而获得新的遗传表型26转导(transduction):通过病毒介导发生在供体细胞与受体细胞之间的DNA

5、转移及基因重组27转座子(transposon):在基因组中可以移动的一段DNA序列28转座(transposition):由插入序列和转座子介导的基因转移或重排29 SD序列:原核生物蛋白质合成中,一种标明起始密码子的AUG的保守序列,标明了哪一个AUG应该作为起始密码子30 polymerase chain reaction (PCR):聚合酶链式反应,是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性(9297)、低温退火(4555复性)及适温延伸(72、Taq酶)等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增31核糖体循环(ribosomal cycle):肽链延长在核糖体

6、上连续性循环式进行,又称为核糖体循环(ribosomal cycle),包括进位、成肽、转位33端粒酶:由蛋白质和 RNA 两部分组成,是一种特殊的反转录酶34 启动子promoter:基因序列上一段不编码但可以标记基因起始位置的区域,召集RNA聚合酶进而进行转录35模板链(template strand): 指 DNA分子中可转录成 RNA的一股链。36编码链(coding strand):指与模板链互补的一股链。其与产物 RNA的关系:用T代替RNA分子中U外,其余都相同判断选择1. 原核生物转录终止时一定要因子参与。× 内在型终止 依赖型终止2. RNA的转录合成和DNA合成一

7、样,在起始合成前变需要有RNA引物参加。×3真核生物的5端帽子结构是在转录完之后加上去。4在蛋白质生物合成过程mRNA是由3端向5端进行翻译的-× 5-35一般讲,从DNA的三联体密码子可以推定氨基酸的顺序,相反从氨基酸的顺序也可以推定DNA的顺序-× 摆动性6下面哪一个在复制叉前除去紧缠的正超螺旋?A.解螺旋酶B.引物酶C.旋转酶D.、DNA连接酶7大肠杆菌有三种DNA聚合酶,其中参与DNA损伤修复的是A.DNA聚合酶IB.DNA聚合酶IIC.DNA聚合酶III8下列关于遗传密码的描述哪一项是错误的A.密码阅读有方向性,从5端开始,3端比终止B.密码第3位(即3

8、端)碱基与反密码子的第1位确碱基配对具有一定自由度,有时会出现多对一情况 摆动性C一种氨基酸只能有一种密码子D.一种密码子只代表一种氨基酸9 DNA指导的RNA聚合酶由数个亚基组成,其核心酶的组成是A2B. 2C. D. 10.1958年Meselson和Stahl利用¹5N标记大肠杆菌DNA的实验首先证明了下列哪一种机制?ADNA能被复制B.DNA的基因可以被转录为mRNAC.DNA半保留复制机制D。DNA全保留复制机制11原核细胞中新生肽链的N-末端氨基酸是A甲硫氨酸B.蛋氨酸C.甲酰甲硫氨酸D.任何氨基酸12下列参与原核生物的肽链延伸的因子是A.IF-1B.IF-2C.RF-1

9、D.EF-Ts13which group of codes stands for Stop Codons?哪一组是终止密码子。A.UCC,UCA,UACB.UAA,UCA,UAC,C. UGG,UAG,UGAD.UAA,UAG,UGA14依赖于DNA的RNA聚合酶所催化的反应需要下列哪组物质存在:A.NTP+,Mg² B.dNTP,DNA, Mg²C. NTP,DNA, Mg²D.RNA,DNA,NTP15关于冈崎片段的叙述哪一个是正确的A是由DNA聚合酶I催化合成的B.合成方向是5-3C.其合成的方向与复制叉移动的方向相同D.其合成方向是3-516下列何处是氨酰

10、tRNA的结合部位?A.核蛋白质小亚基B.核蛋白质的P位C.核蛋白质的A位D.核蛋白质的D位17不参与蛋白质生物合成的物质是:A.mRNAB.rRNAC.tRNAD.内含子填空1. 大肠杆菌RNA聚合酶由_亚基组成,核酶是由_2_亚基组成。2.终止密码子的碱基顺序是_UAA,UAG,UGA_,起始密码子的碱基顺序是_AUG_3.在大肠杆菌DNA合成中的DNA聚合酶_可在RNA引物的3-OH端聚合脱氧核苷酸,而RNA引物的消除和缺口填补是由_DNA聚合酶_来完成的。4.生物得以保持性状代代相传依赖于DNA的半保留复制。5.PCR是DNA离体复制的有效技术,代表的中文意思是_ 聚合酶链式反应_问答

11、题1 SDS-PAGE电泳的原理(不做重点)SDS-PAGE是利用SDS(带负电)和还原剂破坏蛋白的高级结构, 同时SDS与蛋白定量结合, 消除蛋白之间的电荷差异,使得蛋白的迁移率主要依赖分子量 (分子小跑得快) ,加上不连续电泳,即上层为浓缩胶,可将样品压缩到同一起跑线, 下层为分离胶; 可获得更高的分辨率.再用考马斯亮蓝进行染色.即可进行蛋白分子量的测定、蛋白浓度的测定、蛋白的鉴定。2超速离心原理:蛋白质在高达50万g的重力作用下,在溶液中逐渐沉降,直至其浮力与离心所产生的力相等,此时沉降停止。不同蛋白质其密度与形态各不相同,因此用上述方法可以将它们分开。3层析(chromatograph

12、y)原理:待分离蛋白质溶液(流动相)经过一个固态物质(固定相)时,根据溶液中待分离的蛋白质颗粒大小、电核多少及亲和力等,使待分离的蛋白质组分在两相中反复分配,并以不同的速度流经固定相而达到分离蛋白质的目的。4 PCR扩增特异性(不做重点背)引物设计的特异性,使引物能和模版上的特定片段配对,在最优条件下特异扩增。退火温度的不合适,也会出现非特异条带(假阳性)。5 DNA 复制的意义: 1子代保留了亲代DNA的全部信息; 2 DNA通过复制和基因表达决定生物特性;3体现了遗传过程的相对保守性;保守性是相对的,不能忽视其变异性6真核与原核生物复制的主要区别(重点)真核生物原核生物起始点多点单点速度慢

13、快引物大小短(约十个核苷酸)长(约数十个核苷酸)冈崎片段少多酶DNA聚合酶-DNA聚合酶-III主要复制酶端粒酶有无发生一次复制、细胞周期S期ARS自主复制序列多重复复制同时进行大肠杆菌的Oric起始点7 TATA box的功能:(不做重点背) 选择正确的转录起始位点; 影响转录效率; 与TATA盒结合蛋白(TATA box binding protein, TBP)形成复合物,再与其它因子结合。对于无TATA盒的基因,TBP则与其它启动子元件结合8 DNA复制与RNA转录的比较 重点背复制转录模板两股链模板链(反义链)原料dNTPNTP配对A-T G-CA-U G-C聚合酶DNA聚合酶RNA

14、聚合酶产物半保留DNA三种RNA引物有无9乳糖操纵子的作用机制乳糖操纵子中有三种乳糖代谢基因,控制代谢和合成蛋白质,细胞中没有乳糖时,lac阻遏蛋白结合到操纵子操纵基因上,防止lac基因的转录,为负调控。乳糖存在时,它会与lac阻遏蛋白结合,使lac不能与DNA结合,就给了lac基因表达的空间,为别构调控CAP在葡萄糖水平低的情况下,与高浓度的cAMP结合,这时如果lac阻遏蛋白不存在,就强烈激活lac基因表达,在高葡萄糖浓度下,cAMP浓度低,CAP不能结合到DNA上,基因不能表达,为正调控10遗传密码及其特性 重点背遗传密码:mRNA分子上从5¢至3¢方向,由AUG开始

15、,每3个核苷酸为一组,决定肽链上某一个氨基酸或蛋白质合成的起始、终止信号,称为遗传密码特性:连续性:编码蛋白质氨基酸序列的各个三联体密码连续阅读,密码间既无间断也无交叉简并性:遗传密码中,某些氨基酸具有两个或两个以上的密码子通用性:蛋白质生物合成的整套密码,从原核生物到人类都通用,已发生少数例外摆动性:mRNA密码子和tRNA的反密码子碱基配对是严格的,但反密码与密码间不严格遵守常见的碱基配对规律,称为摆动配对11原核生物与真核生物mRNA的异同 原核生物以多顺反子的形式存在,真核生物一般以单顺反子的形式存在原核生物mRNA转录、翻译一般是偶联的,真核生物转录的mRNA前体要经转录后加工,并与

16、蛋白质结合生成信息体后才开始工作原核生物mRNA半寿期很短,一般为几分钟,最长为数小时,真核生物半寿期较长原核生物mRNA一般5端有一段不翻译区,称前导序列,一般编码几种蛋白质,真核mRNA一般有5端帽子结构,5端不翻译区,3端不翻译区和3端聚A尾巴,构成分子除m7G构成帽子外,常含有其他修饰核苷酸,如m6A等,通常都有翻译的前体,从DNA转录产生的原始产物可称作原始前体12 原核生物转录与真核生物转录的异同点相同点:原核生物与真核生物转录共同的特点:都分为分为起始、延伸、终止三个过程;都有启动子、终止子或终止信号、调控序列;所需原料都有聚合酶、等不同点: 真核生物转录起始,延伸, 终止都需要

17、因子的帮助 原核的启动子为-10box和-35box,真核为TATAbox。 真核生物要进行5加帽 (转录早期进行30 nt) 、 3加尾 (前体mRNA加polyA) 、切除内含子 、 编辑和修饰。 原核生物mRNA, tRNA, rRNA 都 由同一种RNA聚合酶转录而真核是三种不同的酶。 原核生物转录终止是依靠终止子(发夹结构),真核生物是依赖转录信号(AAU、AAG)13原核生物与真核生物翻译的异同点共同点: 都分三步进行,即翻译的起始、肽链的延伸、肽链的终止及释放 遗传密码相同不同点: 翻译起始核糖体识别序列原核是序列且有多个,真核是先通过5Cap序列上的帽结合蛋白,找到mRNA,再

18、通过Kozak序列找到翻译起始AUG进入P位。 原核是转录与翻译相耦联,故翻译也在细胞核内,而真核翻译在细胞核外。 原核翻译起始tRNA为fMet-tRNAfMet ,真核为Met-tRNAMet。 真核翻译有复杂的后加工系统,如糖基化、磷酸化-去磷酸化等,原核无。14原核生物与真核生物复制的异同点共同点:分为起始、延伸、终止三个过程;必须有提供3羟基末端的引物;亲代DNA分子为模板,四种脱氧三磷酸核苷(dNTP)为底物,多种酶及蛋白质 :DNA拓扑异构酶、DNA解链酶、单链结合蛋白、引物酶、 DNA聚合酶、RNA酶以及DNA连接酶等;一般都为半保留复制、半不连续复制。不同点:真核生物为线性D

19、NA,具有多个复制起始位点,形成多个复制叉,DNA聚合酶的移动速度较原核生物慢。原核生物一般为环形DNA,具有单一复制起始位点。真核生物DNA复制只发生在细胞周期的S期,一次复制开始后在完成前不再进行复制,原核生物多重复制同时进行。真核生物有多个复制子大小不一且并不同步。原核生物只有一个复制子。真核生物有五种DNA聚合酶,需要Mg+。主要复制酶为DNA聚合酶(),引物由DNA聚合酶合成。原核生物只有三种,主要复制酶为DNA聚合酶III。真核生物末端靠端粒酶(部分细胞)补齐,而原核生物以多联体的形式补齐。真核生物冈崎片段间的RNA引物由核酸外切酶MF1去除,而原核生物引物由DNA聚合酶I去除。15原核生物与真核生物基因表达调控的异同点相同点:表达为多层次不同点: 原核是以操纵子进行转录的调控,真核是受单基因控制。 原核生物调控在2个水平(转录水平的调控、翻译水平的调控),真核在五个水平(DNA水平的调控、转录水平的调控、转录后水平的调控、翻译水平的调控、翻译后水平的调控)进行基因表达调控。 真核生物中有选择性剪接,原核没有。 原核的基因表达主要受环境等调控,真核是受激素等调控16 PCR与细胞内DNA复制的异同相同点:原料都是四种脱氧核苷酸、模板、都需要引物、都是单链DNA,都遵循碱基互补配对原则不同点:PCR技术 DNA生物复制

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