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文档简介
1、实验六、乙醚注入法制备亚甲基蓝脂质体傅红兴HydrophilicHydrophobic一、实验目的:(1)掌握注入法制备脂质体的工艺;(2)熟悉脂质体的形成原理,作用特点;二、基本原理(1)定义:)定义:脂质体(liposome): 系指将药物包封于类脂质双分子层内而形成的微型泡囊体。双分子层结构,成分为:磷脂和附加剂(主要为胆固醇)。(2)分类:)分类:1.按照所包含类脂质双分子层的层数不同,分为单室脂质体和多室脂质体。小单室脂质体(SUV):粒径约0.020.08um;大单室脂质体 (LUV)为单层大泡囊,粒径在0.1l um。多层双分子层的泡囊称为多室脂质体 (MIV),粒径在15um之
2、间。2.按照结构分:单室脂质体,多室脂质体,多囊脂质体。3.按照电荷分:中性脂质体,负电荷脂质体,正电荷脂质体。4.按照性能分:一般脂质体,特殊功效脂质体。(3)制备方法:)制备方法:注入法、薄膜分散法、超声波分散法、逆向蒸发法。(4)质量评价:1、形态、粒径及其分布采用扫描电镜、激光散射法或激光扫描法测定。根据给药途径不同要求其粒径不同。 2、包封率和载药量包封率:包封率=(脂质体中包封的药物/脂质体中药物总量)100%载药量:载药量=脂质体中药物量/(脂质体中药物+载体总量)100%3、脂质体的稳定性1)、物理稳定性:主要用渗漏率表示。渗漏率=(放置前介质中药物量放置后介质中的药量)/制剂
3、中药量x100%胆固醇可以加固脂质双分子层膜,降低膜流动,可减小渗漏率。2)、化学稳定性:(1)磷脂氧化指数:氧化指数=A233nm=A215nm;一般规定磷脂氧化指数应小于0.2。(2)磷脂量的测定:基于每个磷脂分子中仅含1个磷原子,采用化学法将样品中磷脂转变为无机磷后测定磷摩尔量(或重量),即可推出磷脂量。4、防止氧化的措施:防止氧化的一般措施有充入氮气,添加抗氧剂-生育酚、金属络合剂等;也可直接采用氢化饱和磷脂。5、脂质体的灭菌:灭菌的一般方法有过滤除菌、无菌操作、射线照射(60钴1520kGy)、121热压灭菌等。三、实验操作(乙醚注入法)处方:处方: 亚甲蓝 20 mg 胆固醇 0.
4、3 g注射用大豆卵磷脂 0.9 g 乙醚 10 ml磷酸盐缓冲液(PBS) 40 ml制备脂质体 30 ml制备工艺:制备工艺:(1)称取亚甲蓝至30 mlPBS溶液中,保持60水浴搅拌;(2)称取注射用大豆卵磷脂(PL)与胆固醇(CH)至烧杯中,加10 ml乙醚溶解;(3)缓慢将此乙醚溶液滴加至60水浴搅拌的亚甲蓝PBS溶液中,保持水浴温度持续搅拌20 min,再室温下磁力搅拌1.5-2 h,取样镜检( 400);3500-4000 rpm离心10 min,弃上清,取沉淀与10 mlPBS重新混合,取样镜检。四、结果:(1)脂质体的显微镜下观察(2)画图,测定脂质体的粒径五、讨论与思考(1)脂质体的优缺点?(2)如何提高脂质体的稳定
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