培养基的配置

1、1享学课堂享学课堂234C/N:一般指元素一般指元素C/N的比值，也指培养基中还原糖的的比值，也指培养基中还原糖的含量与粗蛋白质含量的比值。含量与粗蛋白质含量的比值。不同微生物所需的不同微生物所需的C/N不同：不同： 细菌细菌 5/1、酵母菌、酵母菌 5/1、霉菌霉菌 10/1；C/N小，小，若碳源不足，易引起菌体衰老和自溶；若碳源不足，易引起菌体衰老和自溶； 氮源氮源过多，会使菌体生长过于旺盛，过多，会使菌体生长过于旺盛，pH偏高，不利于代谢偏高，不利于代谢产物的积累。产物的积累。C/N大大 ，若，若碳源过多，则容易形成较低的碳源过多，则容易形成较低的pH；氮源不；氮源不足，则菌体繁殖量少，

2、从而影响产量。足，则菌体繁殖量少，从而影响产量。56培养基是与微生物细胞渗透压相等的等渗溶液；培养基是与微生物细胞渗透压相等的等渗溶液；微生物生长环境中水的有效性常以微生物生长环境中水的有效性常以水活度水活度（aw）：同温同压下，某溶液的蒸汽压与纯水）：同温同压下，某溶液的蒸汽压与纯水蒸汽压之比。蒸汽压之比。纯水纯水aw为为1.00，溶液中溶质越多，溶液中溶质越多， aw越小。越小。 7 几类微生物生长最适几类微生物生长最适 w89101112 到绿色金属闪光。到绿色金属闪光。13 培养基的配置实验培养基的配置实验14实验目的实验目的明确培养基的配制原理。每个小组配制200ml的牛肉膏蛋白胨固

3、体培养基通过对牛肉膏蛋白胨培养基的配制，掌握配制培养基的一般方法和步骤。仪器和试剂仪器和试剂烧杯（500ml、50ml）、三角烧瓶（250ml）、量筒、玻璃棒、玻璃漏斗、酒精灯、培养皿、牛皮纸、纱绳、托盘天平、灭菌锅、牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、10%NaOH、10%盐酸、精密PH试纸、超净工作台15实验步骤实验步骤1、称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。牛肉膏用玻璃棒挑取，放入小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。蛋白胨很易吸潮，在称取时动作要迅速。另外，称药品时严防药品混杂。162、熔化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石

4、棉网上加热使其溶解。待药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积，得到液体培养基。配制固体培养基，将称好的琼脂放入已熔化的药品中，再加热熔化，在琼脂熔化的过程中，需不断搅拌。最后补充损失的水分，热水定容至200ml。173、调PH在未调PH前，先用精密PH试纸测量培养基的原始PH值，而后加入10%NaOH或10%盐酸调节PH达7.27.4。微生物的生长繁殖除需要一定的营养物质外，还要求适当的PH范围。不同微生物对PH要求不同，霉菌和酵母菌的培养基PH是偏酸性的，而细菌和放线菌的培养基PH为中性或微碱性。所以配制培养基时，要根据不同微生物对象将PH值调到合适的范围。184、灭菌用漏斗将完全熔化的上述

5、培养基趁热倒入 250ml的三角烧瓶加塞后，外包两层牛皮纸（用纱绳以活结形式扎好），置于灭菌锅中以1.05kg/cm2、121,1530分钟高压蒸汽灭菌。同时还须将洗净、干燥的培养皿套上牛皮纸包扎后一起灭菌。195、分装待灭菌好的培养基冷却到50左右，在启动的超净工作台上打开牛皮纸，用酒精灯火焰烧瓶口后，分装于灭过菌的培养皿中备用。20实验注意事项实验注意事项注意PH值不要调过头，以避免回调，将会影响培养基内各离子的浓度。分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口，以免沾污棉塞而引起污染。分装时，若培养皿出现冷凝水，需倒置在恒温箱中干燥，防止杂菌污染。21下表是某微生物培养基成分，请根据表回答： （1）此表培养基可培养的微生物同化作用类型是 自养型 。（2）若除去成分，加入(CH2O)，该培养基可用于培养 自生固氮菌 。（3）表中营养成分共有 3 类。（4）不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是 调整PH。（5）表中各成分重量确定原则是依据微生物生长需要 。 （6）若表中培养基用于菌种鉴定，应