理学微生物的营养与培养基PPT课件

1、第四章第四章 微生物的营养和培养基微生物的营养和培养基第一节第一节 微微生物的生物的 6 类营养要素类营养要素第二节第二节 微生物的营养类型微生物的营养类型第三节第三节 营养物质进入细胞的方式营养物质进入细胞的方式第四节第四节 培养基培养基第1页/共59页营养 微生物获得和利用营养物质的过程营养物质 能够满足机体生长、繁殖和完成各种生理活动所需要的物质 第四章 微生物的营养和培养基 营养物质是微生物生存的物质基础，而营养是微生物维持和延续其生命形式的一种生理过程。第2页/共59页 第四章 微生物的营养和培养基 第一节第一节 微微生物的生物的 6 类营养要素类营养要素微生物细胞的元素组成微生物细

2、胞的元素组成主要元素主要元素：碳、氢、氧、氮，碳、氢、氧、氮，磷、硫、钾、钠、镁、钙磷、硫、钾、钠、镁、钙占干重的占干重的90%97%微量元素微量元素：锌、锰、氯、钼、硒、钴、铜等锌、锰、氯、钼、硒、钴、铜等占干重的占干重的3%10%微生物细胞的物质组成微生物细胞的物质组成1、水分、水分水是微生物及一切生物细胞中含量最多的成分。水是微生物及一切生物细胞中含量最多的成分。第3页/共59页通常情况下，细菌含水量为细胞鲜重的通常情况下，细菌含水量为细胞鲜重的 75%85% 酵母菌含水量为细胞鲜重的酵母菌含水量为细胞鲜重的 70%85% 丝状真菌丝状真菌 85%90% 细菌芽孢和霉菌孢子细菌芽孢和霉菌

3、孢子 40%第4页/共59页2、干物质、干物质有机物质有机物质：蛋白质（肽和氨基酸）、核酸、类脂、碳水化合物、：蛋白质（肽和氨基酸）、核酸、类脂、碳水化合物、维生素和其他有机物质（占干重的维生素和其他有机物质（占干重的90%95%）矿质元素矿质元素：占：占3%10%蛋白质是细胞干物质中含量最多的成分，占干重的50%，是重要的细胞结构物质。核酸与核苷酸核酸有DNA（含量稳定）、RNA （含量变化较大）类脂包括：脂肪、磷脂、甾醇、蜡和多聚-羟基丁酸等是许多种微生物的储藏物质。碳水化合物多糖、寡糖和单糖，参与组成各种细胞结构第5页/共59页维生素主要是B族维生素，是细胞中多种酶的辅酶或活性基团，是保

4、持酶活性必需的成分。其他有机物质核黄素、尼克酰胺和细胞色素、抗生素、激素及毒素等第6页/共59页微生物的营养物质微生物的营养物质6种营养要素水、碳源、氮源、能源水、碳源、氮源、能源生长因子、无机盐生长因子、无机盐第7页/共59页 第四章 微生物的营养和培养基 返回目录（一）水（一）水1、水活度（、水活度（aw） （p98）在相同温度和大气压下，密闭容器中溶液水的饱和蒸汽压和纯水在相同温度和大气压下，密闭容器中溶液水的饱和蒸汽压和纯水蒸汽压的比值，反映微生物可利用水分的多少。蒸汽压的比值，反映微生物可利用水分的多少。当当aw=0 干燥干燥当当aw=1 纯水纯水微生物的微生物的aw：（：（0.60

5、，0.99）2、水的形态、水的形态A、 结合水：不流动，不易蒸发，不冻结，不能作为溶剂，也不渗透B、 与结合水相反第8页/共59页2、水的生理功能主要有、水的生理功能主要有营养物质的溶剂，营养物质进入细胞和代谢废物排出细胞均以水为媒介。维持生物大分子结构稳定和酶的活性细胞内的一切生化反应均在水介质系统中进行水是蓝细菌等少数微生物还原CO2时的供氢体一定量的水分是维持细胞膨胀压的必要条件水能有效调节细胞内的温度（二）碳源 （p87）1、概念、概念凡能提供微生物营养所需碳元素的营养物质称为凡能提供微生物营养所需碳元素的营养物质称为碳源。碳源。第9页/共59页碳源碳源其中糖类是最广泛的碳源，其次为醇

6、类、有机酸、脂等；单糖优于双糖和多糖；己糖优于戊糖；葡萄糖、果糖优于甘露糖和半乳糖；淀粉优于纤维素和几丁质等纯多糖，又优于琼脂、木质素等杂多糖。 第四章 微生物的营养和培养基 2、碳源碳源分类分类 有机碳源有机碳源无机碳源无机碳源CO2、CO32-糖类、有机酸、醇、脂类烃类及芳香族化合物3、常用的碳源、常用的碳源 工业生产工业生产实验室实验室碳源常以糖类提供常以糖类提供C源源淀粉类（玉米粉、小麦粉、野生植物）淀粉类（玉米粉、小麦粉、野生植物）第10页/共59页 凡是能提供微生物生长繁殖所需氮素的营养物质称为氮源。 第四章 微生物的营养和培养基 （三）氮源 （p88） 1、概念、概念2、分类、分

7、类有机氮氮源谱氮源谱蛋白质核酸氨基酸尿素无机氮N2 NH3铵盐铵盐硝酸盐硝酸盐3、常用的氮源、常用的氮源第11页/共59页 第四章 微生物的营养和培养基 工业生产工业生产实验室实验室氮源牛肉膏、蛋白胨、酵母膏牛肉膏、蛋白胨、酵母膏鱼粉、花生、豆饼粉、麸皮、蛹粉鱼粉、花生、豆饼粉、麸皮、蛹粉四四. 无机盐（矿质盐类）无机盐（矿质盐类） （p90） 1、主要功能构成微生物的细胞结构（P、S、Ca、Mg、Fe）。酶活性基的组成分和酶的激活剂（Cu2+、Mn2+、Zn2+）调节细胞渗透压、PH值和氧化还原点位（Na、P、K）。化能自养菌的能源（S、Fe、NH4+、NO2-）第12页/共59页微生物生长

8、必需的微量有机物质称为生长因子或生长素。微生物生长必需的微量有机物质称为生长因子或生长素。2、分类大量元素： 需要浓度在10-310-4mol/L范围内的元素P、S、K、Na、Ca、Mg、(Fe ) 微量元素：需要浓度在10-610-8mol/L范围内的元素(Fe ) Cu、Zn、Mn、Mo、Co、B等。五五. 生长因子生长因子1、定义2、生长因子有、生长因子有：氨基酸、维生素、碱基：氨基酸、维生素、碱基3、按微生物与生长因子的关系将微生物分为、按微生物与生长因子的关系将微生物分为3种类型种类型生长因子自养型微生物生长因子自养型微生物野生型或原养型菌株第13页/共59页 生长因子异养型微生物生

9、长因子异养型微生物 有些微生物失去或没有合成生长素类物质能力的微生物叫营养缺陷型。乳酸菌、各种动物病原菌、支原体 生长因子过量合成微生物六六. 能源能源 （p89） 1、概念 能提供给微生物生命活动的最初能量来源的营养物或辐射能称为能源。 2、能源谱第14页/共59页 第四章 微生物的营养和培养基 化化学学物物质质辐射能辐射能化能异养微生物的能源化能异养微生物的能源有机物有机物 无机物无机物NH+4NO-2 、S、 H2S等。等。化能自养微生物的能源化能自养微生物的能源光能自养和光能异养微生物的能源光能自养和光能异养微生物的能源能源单功能营养物：如辐射能双功能营养物：NH4是硝酸细菌的能源和氮

10、源三功能营养物：如”是异养微生物的能源、碳源及氮源。 第15页/共59页第16页/共59页第三节第三节 营养物质进入细胞的方式营养物质进入细胞的方式单纯扩散促进扩散主动运送基团移位渗透吸收吞噬作用第17页/共59页吞噬作用吞噬作用图图1 1第18页/共59页氧CO2乙醇氨基酸单纯扩散示意图第19页/共59页第20页/共59页 物质进入细胞的动力是细胞内外的浓度差。物质进入细胞的动力是细胞内外的浓度差。 不消耗能量不消耗能量 没有特异性，被运输物质不与膜上物质发生任何反没有特异性，被运输物质不与膜上物质发生任何反应，物质不发生化学变化。应，物质不发生化学变化。单纯扩散单纯扩散(simple di

11、ffusion)特点特点第21页/共59页图3促进扩散示意图第22页/共59页第23页/共59页 促进扩散促进扩散 （p93p93）特点不消耗能量参与运输的物质本身的分子结构不发生变化不能进行逆浓度运输运输速率与膜内外物质的浓度差成正比需要载体参与第24页/共59页图图4 4 主动运输示意图主动运输示意图第25页/共59页 被运送的物质可被运送的物质可逆浓度梯度进入细逆浓度梯度进入细胞内胞内 消耗能量，必需消耗能量，必需有能量参加。有能量参加。 有膜载体参加，有膜载体参加，膜载体发生构型变膜载体发生构型变化化 被 运 送 物 质 不 发被 运 送 物 质 不 发生任何变化。生任何变化。三、主动

12、运输特点三、主动运输特点第26页/共59页 基团转位：在研究糖的运输时发现的一种主动运输方式。基团转位：在研究糖的运输时发现的一种主动运输方式。 运输过程中需要能量，被运输的物质发生化运输过程中需要能量，被运输的物质发生化 学变化的运输叫基团移位。学变化的运输叫基团移位。 许多糖靠基团移位进行运输。许多糖靠基团移位进行运输。 这种运输方式是微生物通过磷酸转移酶系统来运输营养物质的。这种运输方式是微生物通过磷酸转移酶系统来运输营养物质的。 四、基团移位(group translocation)第27页/共59页Group Translocation 第28页/共59页基团转移运输特点：（基团转移

13、运输特点：（p93） 需要磷酸酶系统进行催化需要磷酸酶系统进行催化 被运输的物质发生化学变化，被磷酸化被运输的物质发生化学变化，被磷酸化 需要能量需要能量第29页/共59页4 种运送方式种运送方式 总结总结浓度梯度浓度梯度能量能量载体载体动力动力第30页/共59页比较项目比较项目 单纯扩散单纯扩散 促进扩散促进扩散 主动运输主动运输 基团移位基团移位特异载体蛋白特异载体蛋白 无无 有有 有有 有有运送速度运送速度 慢慢 快快 快快 快快溶质运送方向溶质运送方向 由浓至稀由浓至稀 由浓至稀由浓至稀 由稀至浓由稀至浓由稀至浓由稀至浓平衡时内外浓度内外相等平衡时内外浓度内外相等 内外相等内外相等 内

14、部高内部高内部高内部高运送分子运送分子 无特异性无特异性 特异性特异性 特异性特异性特异性特异性能量消耗能量消耗 不需要不需要 需要需要 需要需要需要需要运送前后溶质分子不变运送前后溶质分子不变 不变不变 不变不变改变改变载体饱和效应载体饱和效应无无 有有 有有 有有与溶质类似物与溶质类似物 无竞争性无竞争性有竞争性有竞争性有竞争性有竞争性有竞争性有竞争性运送抑制剂运送抑制剂 无无 有有 有有 有有运送对象举例运送对象举例 水、水、O O2 2 糖、糖、SOSO4 42-2-氨基酸、乳糖氨基酸、乳糖 葡萄糖葡萄糖 嘌呤嘌呤4种运送营养方式的比较第31页/共59页第四节第四节 培养基培养基人工配

15、制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。 营养物质：水、碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子定义培养基的要素营养缺陷型微生物生长素类物质生长素类物质加入自养型微生物碳源碳源不加入固氮微生物氮源氮源不加入 水的活度： 0 aw 1，微生物（0.60，0.99）培养基几乎是一切对微生物进行研究和利用工作的基础培养基几乎是一切对微生物进行研究和利用工作的基础 细菌细菌 酵母菌酵母菌 霉菌、放线菌霉菌、放线菌 耐盐菌耐盐菌0.90.99 0.8以上以上 0.7以上以上 0.6以上以上第32页/共59页 pH值 a 0.1mol/LHCl 或 NaOHb K2HPO4KH2PO4c CaCO3培养

16、基的物理状态：固、液、半固体灭菌方法：常规高压蒸汽灭菌：常规高压蒸汽灭菌： 1.05kg/cm2 ,121.5 15-30分钟；分钟；任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理。第33页/共59页目的明确目的明确营养协调理化条件适宜经济节约一、设计培养基的原则 （p96）第34页/共59页1.目的明确目的明确 （p96）根据不同的微生物的营养要求配制针对强的培养基根据不同的微生物的营养要求配制针对强的培养基培养化能自养型的氧化硫杆菌的培养基组成为：培养化能自养型的氧化硫杆菌的培养基组成为：S 10g MgSO4.7H2O 0.5g (NH4)2SO4 0.

17、4g FeSO4 0.01g KH2PO4 4g CaCl2 0.25g H2O 1000ml培养化能异养的大肠杆菌一种培养基是由下列化学成分组成：培养化能异养的大肠杆菌一种培养基是由下列化学成分组成：葡萄糖葡萄糖 5g NH4H2PO4 1g NaCl 5g MgSO4.7H2O 0.2g K2HPO4 1g H2O 1000ml第35页/共59页2. 营养协调营养协调 （p96）培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好，营养物质浓度培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好，营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需，浓度过高时则可能对微生物生长过低时不能满足微生物正常生长所需，浓

18、度过高时则可能对微生物生长起抑制作用。起抑制作用。培养基中各营养物质之间的浓度配比直接影响微生物的生长繁殖培养基中各营养物质之间的浓度配比直接影响微生物的生长繁殖和代谢产物的形成和积累，和代谢产物的形成和积累，碳氮比碳氮比（C/N）的影响较大。的影响较大。碳氮比：培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值，有时也指培养碳氮比：培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值，有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。基中还原糖与粗蛋白之比。例：例：利用微生物发酵生产谷氨酸利用微生物发酵生产谷氨酸1、培养基碳氮比：、培养基碳氮比：4/1 菌体量繁殖，谷氨酸积累少；菌体量繁殖，谷氨酸积累少；2、培养基碳氮比：、培养基碳氮

19、比：3/1 菌体繁殖受到抑制，谷氨酸产量菌体繁殖受到抑制，谷氨酸产量大量增加。大量增加。第36页/共59页3. 理化条件适宜理化条件适宜 （p97)pH水活度氧化还原电位第37页/共59页a. pH培养基的培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。微生物的生长繁殖或产生代谢产物。通常培养条件通常培养条件 （p97）细菌与放线菌：细菌与放线菌：pH77.5酵母菌和霉菌：酵母菌和霉菌：pH4.56范围内生长范围内生长为了维持培养基为了维持培养基pH的相对恒定，通常在培养基中加入的相对恒定，通常在培养基中加入pH缓冲剂，或

20、在进行工业发酵时补加酸、碱。缓冲剂，或在进行工业发酵时补加酸、碱。第38页/共59页b. 水活度水活度 aw在天然环境中，微生物可实际利用的自由水或游离水的含量，在天然环境中，微生物可实际利用的自由水或游离水的含量，纯水纯水ww为为1.00,1.00,溶液中溶质越多溶液中溶质越多, , ww越小。越小。 微生物一般在微生物一般在ww为为0.600.600.990.99的条件下生长的条件下生长, , ww过低过低时时, ,微生物生长的迟缓期延长微生物生长的迟缓期延长, ,比生长速率和总生长量减少。比生长速率和总生长量减少。微生物不同，其生长的最适微生物不同，其生长的最适ww不同。不同。第39页/

21、共59页c. 氧化还原电位氧化还原电位 氧化还原电位又称氧化还原电势（氧化还原电位又称氧化还原电势（redox potential）：度量某氧化：度量某氧化还原系统中的还原剂释放电子或氧化剂接受电子趋势的一种指标，单还原系统中的还原剂释放电子或氧化剂接受电子趋势的一种指标，单位是位是V（伏）或伏）或mV（毫伏）。毫伏）。好氧性微生物：好氧性微生物：+0.1+0.1伏以上时可正常生长伏以上时可正常生长, ,以以+0.3+0.3+0.4+0.4伏为宜；伏为宜；厌氧性微生物：低于厌氧性微生物：低于+0.1+0.1伏条件下生长；伏条件下生长；兼性厌氧微生物：兼性厌氧微生物：+0.1+0.1伏以上时进行

22、好氧呼吸伏以上时进行好氧呼吸, , +0.1 +0.1伏以下时进行发酵。伏以下时进行发酵。第40页/共59页4. 经济节约经济节约以粗代精以粗代精以野代家以野代家以废代好以废代好以国代进以国代进以简代繁以简代繁以氮代朊以氮代朊以烃代粮以烃代粮以纤代糖以纤代糖第41页/共59页二、培养基的种类 （p100） 培养基种类繁多，根据其成分、物理状态和用途可将培养分成多种类型第42页/共59页（一）按培养基的成分区分 （p100）A、 天然培养基：用各种动物、植物和微生物材料制作的成分含量不完全清楚且变化不定的营养基质配制天然培养基的主要原料有：牛肉膏、蛋白胨、酵母膏米曲汁、麦芽汁、马铃薯、玉米粉、麸

23、皮及花生饼粉等优点：取材广泛、营养丰富、经济简便、微生物生长迅速，适合各种异养微生物生长缺点：成分不完全清楚，成分和含量不确定，用于精细实验时重复性差。第43页/共59页B、 合成培养基：完全用化学药品配制而成特点：化学成分和含量完全清楚且固定不变，适于生长、繁殖，适用于进行营养、代谢、生理生化、遗传育种及菌种鉴定等精细研究。缺点：一般微生物在合成培养基上生长缓慢C、 半合成培养基：既有天然物质又有化学药品的培养基第44页/共59页天然培养基天然培养基合成培养基合成培养基含用化学成分还不清楚或化学含用化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物成分不恒定的天然有机物牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁牛

24、肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基培养基化学成分完全了解的物质配制化学成分完全了解的物质配制而成的培养基而成的培养基高氏高氏1 1号培养基、查氏培养基号培养基、查氏培养基第45页/共59页( (二）按物理状态不同划分二）按物理状态不同划分固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基在液体培养基中加入一定量凝固剂，在液体培养基中加入一定量凝固剂，使其成为固体状态，琼脂含量一般为使其成为固体状态，琼脂含量一般为1.5%-2.0%琼脂含量一般为琼脂含量一般为0.2%-0.7%不加任何不加任何凝固剂凝固剂半固体培养基半固体培养基固体培养基常用来进行微生物的分离、固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数

25、及菌种保藏鉴定、活菌计数及菌种保藏 观察微生物的运动特征、分类鉴定观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定及噬菌体效价滴定 大规模工业生产及在实验室进行微大规模工业生产及在实验室进行微生物的基础理论和应用方面的研究生物的基础理论和应用方面的研究 第46页/共59页（三）按用途不同划分（三）按用途不同划分基础培养基基础培养基鉴别培养基鉴别培养基含有一般微生物生长繁殖所需的含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基基本营养物质的培养基用来将某种或某类微生物从混杂的微生用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基物群体中分离出来的培养基用于鉴别不同类型微生物的培养基用于鉴别

26、不同类型微生物的培养基选择培养基选择培养基在基础培养基中加入某些特殊营养物质在基础培养基中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基制成的一类营养丰富的培养基牛肉膏蛋白胨培养基是最常用的牛肉膏蛋白胨培养基是最常用的基础培养基基础培养基加富培养基加富培养基特殊营养物质包括特殊营养物质包括血液、血清、酵母浸血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液膏、动植物组织液等等在培养基中加入相应的特殊营养物质或化在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长利于所需微生物的生长微生物产生某种代谢产物，与培养基中微生物产生某种代谢产

27、物，与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应，的特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征变化产生明显的特征变化第47页/共59页K2HPO4 30g KH2PO4 10g NH4NO3 5gNa2SO4 1gMgSO4.7H2O 10mgMnSO4.4H2O 10mgFeSO4.7H2O 10mgCaCl2 5mgH2O 1000ml例如，培养细菌例如，培养细菌 营养缺陷型菌株营养缺陷型菌株 的基础培养基的基础培养基b 、 加富培养基（富集培养基、增殖培养基）：根据待分离微生物特殊营养要求配制的适合该类微生物快速生长而不利于其他微生物生长的营养基质（投其所好）a 、 基础培养基：按照微

28、生物的共同营养要求配制。使用前加入少数几种特殊成分就能满足某一具体微生物生长需要的营养基质。 按培养基的功能区分第48页/共59页c 、 选择培养基：利用分离对象对某些化学物质的抗性或生理特长设计的能抑制或限制其它微生物生长而使分离对象正常生长的营养基质（取其所抗）。d 、鉴别培养基：利用微生物代谢产物与指示剂的显色反应快速鉴别不同微生物的营养基质伊红美兰培养基、Pb(Ac)2培养基无色代谢产物+特定试剂产生明显特征（变色、沉淀）第49页/共59页第50页/共59页 发酵培养基发酵培养基 用于合成某种预定的发酵产物的培养基。用于合成某种预定的发酵产物的培养基。 特点：特点： 碳源比例高碳源比例

29、高* 原料粗放、成本低原料粗放、成本低 符合工艺及后提取的要求。符合工艺及后提取的要求。第51页/共59页遗传研究用培养基：遗传研究用培养基： 基本培养基（基本培养基（MM）：）：仅能满足某微生物的野生菌株生长所需的最低养分的培养基。仅能满足某微生物的野生菌株生长所需的最低养分的培养基。 完全培养基（完全培养基（CM）：）：凡可满足一切营养缺陷型菌株生长需要的培养基。凡可满足一切营养缺陷型菌株生长需要的培养基。分析培养基：维生素、抗生素、分析微生物营分析培养基：维生素、抗生素、分析微生物营养要求养要求第52页/共59页补充：常见的培养四大类微生物的培养基补充：常见的培养四大类微生物的培养基:细

30、菌细菌（牛肉膏蛋白胨培养基）：（牛肉膏蛋白胨培养基）：牛肉膏牛肉膏 3g 蛋白胨蛋白胨 10g NaCl 5g H2O 1000ml放线菌放线菌（高氏（高氏1号）号）淀粉淀粉 20g K2HPO4 0.5g NaCl 0.5g MgSO4.7H2O 0.5g KNO3 1g FeSO4 0.01g H2O 1000ml酵母菌酵母菌(麦芽汁培养基麦芽汁培养基)干麦芽粉加四倍水，在干麦芽粉加四倍水，在50-60保温糖化保温糖化3-4小时，用碘液试验小时，用碘液试验检查至糖化完全为止，调整糖液浓度，煮沸后，沙布过滤，调检查至糖化完全为止，调整糖液浓度，煮沸后，沙布过滤，调PH为为6.0。霉菌霉菌（查

31、氏合成培养基）（查氏合成培养基）NaNO3 3g K2HPO4 1g KCl 0.5g MgSO4.7H2O 0.5gFeSO4 0.01g 蔗糖蔗糖 30g H2O 1000ml第53页/共59页补充：配制培养基应注意的问题补充：配制培养基应注意的问题 营养成分的溶解营养成分的溶解 缓冲性物质，高温易破坏的组分，缓冲性物质，高温易破坏的组分， 易沉淀的组分，易沉淀的组分， 高温易发生反应的组分，高温易发生反应的组分， 微量物质，微量物质， pH值及水活度值及水活度 加琼脂加琼脂 灭菌：高压蒸汽灭菌，灭菌：高压蒸汽灭菌，1.05kg/cm2（0.1MPa），），1530min；分别灭菌；过滤除菌；间歇灭菌；分别灭菌；过滤除菌；间歇灭菌； 0.56kg/cm2，112.6， 1530min；加消泡剂；含加消泡剂；含脂、糖、蛋白质高、固体培养基、脂、糖、蛋白质高、固体培养基、pH低灭