给好友研究生疾病模型复习题

1、For personal use only in study and research; not for commercial use11 目前欧美国家普遍主张动物实验实行“3R 原则”，上， 能在培养基中重组形成与天然基膜极为相似的人工基2011 年 研究生疾病模型复习题1 简要回答抓取家兔的方法及需注意事项。答： 抓取家兔时， 一般用右手抓住兔颈背部的毛皮提起，用左手托住臀部或腹部，让其身体的重量集中在左手上。注意避免用手抓兔耳提起，因兔挣扎，容易抓不稳脱手而摔伤动物。2 在动物实验中，对照的作用是什么？答： 对照的作用在于减少和抵消非处理因素的干扰，以便分析处理因素的作用。3 简要回答灌

2、胃给药的优点和不足。答： 灌胃给药一般能准确掌握给药量、 给药时间， 并能发现和记录症状出现的时间和经过。 但由于每天强制性灌胃给药操作， 会对动物造成一定程度的机械性损伤和心理影响，要求熟练掌握灌胃技术。4 称量脏器重量时，解剖前为什么要应禁食 12h 左右？答： 一方面解剖前常取血检测生化指标需要禁食， 另一方面禁食后动物体重不受食物的影响。5 低温保存的血清样品应如何使之融化？答： 不能在室温慢慢溶解（融化） ，而应放在2537水浴中短时间快速溶解（融化） ，充分混匀。6 . 成功复制动物模型主要取决于哪三方面的因素？答： 一是实验动物选择得当； 二是动物的饲养环境适宜；三是造模的方法选

3、择适宜和技术操作正确。7 动物实验设立对照的作用？常用对照的形式？答： 对照的作用在于减少和抵消非处理因素的干扰，以便分析处理因素的作用。对照的形式主要有空白对照、实验对照、配对对照、标准对照等。在药效学研究中常用的对照组有：阴性对照组（或空白对照组，包括用生理盐水或溶媒代替药液同量给予者） 、阳性对照组（给予已知药效的典型药物）等。8 给大鼠、小鼠腹腔注射的要点。给小鼠腹腔注射（ intraperitoneal injection ， ip ）时， 左手抓取并固定动物， 将腹部朝上，头部略低于尾部，右手持针，在下腹部腹白线稍向左的位置，从下腹部朝头的方向平行刺入皮肤。 针头到达皮下后， 向前

4、进针35mm，再把针竖起，使针头与皮肤呈45o角刺入腹肌。针尖穿过腹肌进入腹腔后抵抗感消失。回抽针栓，如无血液或异常液体，可缓慢注入药液。9 简述集落形成法的基本原理。答：集落形成试验又称克隆形成试验，是评价抗肿瘤药物作用的简便、可靠的体外方法，目前较为常用。基本原理: 克隆是指一个细胞在特定条件下培养增殖而产生的细胞群。 单个细胞在体外连续增殖 6 代以上时，其后代所组成的细胞群体称为克隆或集落，每个克隆可含 50个以上的细胞， 大小为0.31.0mm。 能形成克隆的细胞称为克隆原细胞，也成干细胞，是具有持续分裂能力的细胞。肿瘤细胞的生长、转移、复发均以干细胞的增殖为基础。当接种的细胞分布较

5、稀疏时，每个克隆彼此不接触，通过克隆计数，可对单个细胞的增殖能力进行定量分析，故能较灵敏地检测药物的抗肿瘤活性。集落形成试验可分为平板和软琼脂两种试验。10回答用沙鼠复制全脑缺血模型的造模机制。答： 沙鼠大脑动脉环的后交通动脉缺乏或非常纤细，颈内动脉系统和椎 -基底动脉系统之间没有血液交通， 故结扎两侧颈总动脉可造成全脑缺血。请简述“ 3R 原则”的具体内容。答："3R'即替代、减少和优化。替代：是指以单细胞生物、微生物或细胞、组织、器官甚至计算机模拟等替代活体动物进行实验。减少： 就是选用恰当的高质量的实验动物进行动物实验，改进实验设计，提高实验的精确度和实验动物的利用率，

6、尽可能减少实验中所用动物的数量。优化： 是指以良好的条件善待动物， 精密设计研究路线，选择合适实验手段，减少实验动物的紧张和痛苦，得出更好的实验结果，保证实验结果的可重复性。12动物模型在研究人类疾病中的意义和作用。答： 优越性： 利用动物进行模拟实验， 可免去对人体的伤害。可以严格控制条件，排除各种干扰。提高 复制成功率和缩短病程，便于实验的多次重复。便于实 验样品的全面采集。局限性： 用一种动物得出的实验结果， 不一定适用于另一种动物。如果想肯定一个实验结果，最好采用两种（啮齿类和非啮齿类）以上的动物进行比较观察。使用动物模型所得出的结论更不能直接地、 简单地照搬于临床，通过动物模型筛选的

7、药物必须再经临床试验的检验。13简述抗肿瘤药物作用的MTT法的基本原理。答：MTT是3-（4,5- 二甲基-2-曝唾）-2,5- 二苯基漠化 四氮唑的缩写，商品名为噻唑蓝，是一种能接受氢原子的黄色粉状染料，分子量 414.3 ， 溶于水性溶剂和有机溶剂， 常温下需较长时间才能溶解。 活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶在细胞内可将黄色MTT还原成不溶性的蓝紫色甲朦，而死细胞中此酶消失，MTT不能被还原，因此甲朦的生成量通常与活细胞数成正比。用DMSOM解细胞中的甲朦后，用酶标仪在一定波长下测定习惯度（A）值，即可定量测出细胞的存活率。14重组基膜侵袭实验（又称 Boyden 小室肿瘤侵袭实验）的基本原理

8、。答： 重组基膜侵袭实验又称 Boyden 小室肿瘤侵袭实验。基膜是限制肿瘤细胞侵袭生长的组织屏障。肿瘤细胞侵袭时，首先通过膜表面受体与基膜成分粘附，然后释放和激活多种蛋白酶降解基膜，继而穿越基膜的缺损部位。突破寂寞屏障是肿瘤侵袭至周围正常组织的起始步骤和关键环节。基质胶是从EHS鼠肉瘤中提取的基质成分，含有层黏 连蛋白、W型胶原、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖等。将其铺在无聚乙烯叱咯烷酮的聚碳酸酯多孔滤膜（PVPF 8以M膜结构。 Boyden 小室分为上室和下室， 两室以基质胶隔开。在膜的下室加入趋化因子，在上室加入拟研究的肿鼠细胞，后者受下室内趋化因子的趋化作用而向下运动。当肿鼠细胞分泌的蛋白酶降

9、解了基质胶后， 细胞运动到膜的下室面。 通过计数膜下室面上的细胞数可定量地反映肿鼠细胞在体外的侵袭能力。本方法操作简单、快速，可以定量检测肿鼠细胞的侵袭能力， 与动物体内侵袭模型具有良好的相关性，近年来应用较多。15 简述肾血管性高血压模型的基本原理。答： 肾动脉狭窄可引起肾脏缺血， 导致肾脏内肾素合成 和 分 泌 增多 ， 激活 肾 素 -血 管 紧张 素 - 醛固 酮 系统（ RAAS ） ，血管紧张素可收缩血管，使外周阻力增加，而醛固酮使钠水潴留，血容量增加，使血压升高。16 简述 Heymann 肾炎模型的造模机制。答： 主动型Heymann 肾炎模型：以近端小管刷状缘成分为抗原免疫大

10、鼠，使在大鼠体内产生相应抗体，抗体与 Heymann 抗原形成免疫复合物，引起膜性肾小球肾炎。被动型Heymann肾炎模型：给动物注射抗近端小管刷状缘抗原（ Fx1A ） 的抗体， 此抗体与足突细胞小凹的抗原复合物结合，在肾小球基膜上皮侧 （即肾小球上皮下）形成原位免疫复合物，继而激活补体形成膜攻击复合物C5b-9 。后者插入足细胞膜使足细胞活化，释放氧自由基和蛋白水解酶， 导致基膜完整性破坏， 通透性增加。C5b-9还可使足细胞相关蛋白复合物的结构发生解离， 破坏细胞骨架， 足细胞足突融合， 肾小球滤过屏障完整性受到破坏，答： 卵巢切除法复制大鼠骨质疏松模型。 切除卵巢 （去产生蛋白尿。17

11、 简述抗 Thy-1 肾炎模型的造模机制。答： 抗胸腺细胞抗体肾炎又称抗 Thy1 肾炎。胸腺细胞抗原（ Thy1 抗原）分为Thy1.1 和 Thy1.2 两种，大鼠仅有Thy1.1 抗原。 大鼠 Thy1.1 抗原是分子量为18kD 的糖蛋白，分布于早期胸腺细胞、未成熟的淋巴细胞、成纤维细胞和肾脏系膜细胞等细胞的表面，在肾脏系膜细胞含量较高。利用大鼠胸腺细胞作为抗原免疫家兔，制备的兔抗大鼠Thy1.1 抗血清（ ATS ）可直接与系膜细胞表面抗原结合，固定补体形成膜攻击复合物，使细胞溶解，继而引起残存的系膜细胞增生，制作系膜细胞增生性肾小球肾炎。18 什么是 SCID 小鼠？答： SCID

12、 小鼠是由 C.B-17 纯系小鼠 16 号染色体上的 scid 基因突变而来。 由于 scid 基因突变影响了免疫球蛋白基因和 T 细胞受体基因的重排， 导致缺乏功能性 T 和 B淋巴细胞， 形成重度联合免疫缺陷。 与普通裸鼠模型相比，SCID 小鼠模型具有移植成功率高、病理表现更接近人类疾病变化的特点。19 . 乳腺增生症动物模型造模机制答： 乳腺增生症的发生不仅与卵巢功能失调、 雌激素水平增高或活性增强、孕激素水平降低有关，而且与雌激素和孕激素二者之间比例失调及个体乳腺组织对雌激素失调的反应性密切关系。 应用外源性雌激素使实验动物血中雌二醇浓度持续维持在较高水平，造成血中雌、孕激素的比例

13、失调，引起乳腺组织不同程度增生。20 . 庆大霉素致耳聋模型的机制。答： 动物连续给予庆大霉素后蓄积于内耳， 使毛细胞中毒，引起内耳听觉功能下降。21 . 举出三种可以得到2 型糖尿病的方法。答：小剂量STZ （链服霉素）加高脂高糖饮食大鼠模型a. 大鼠静脉注射 STZ25-30mg/kg 体重， 2-3 周后进行葡萄糖耐量试验。b. 选择口服葡萄糖耐量异常者，饲以高脂高糖半合成饲料。c. 动物单笼饲养，喂养 10-18 周。设同批动物的正常对照组。高脂高糖饮食加小剂量STZ大鼠模型a. 大鼠喂饲高糖高脂饲料四周， 以诱发动物胰岛素抵抗。 b. 高糖高脂饮食 4 周后， 模型组大鼠腹腔注射 2

14、5mg/kg体重STZ,对照组仅注射等体积枸檬酸盐缓冲液。继续喂饲高糖高脂饲料。自发性 2 型糖尿病动物模型。 如 db/db 小鼠， OLETF势）引起实验动物体内雌激素分泌下降，使骨代谢呈负平衡，即骨吸收增强，骨量丢失增多，造成骨质疏松，与人类女性绝经期后骨质疏松类似。23. 关于浓度的计算题参：浓度 =溶质/ 体积24. 论述题现从中草药中提取出一种多糖成分 （简称 A 药， 无刺激胰岛素分泌作用），欲初步检测其降血糖效果，请设计一完整的实验方案。（包括动物选择、造模方法、造模中需注意的事项及实验分组）两套方案一、链脲佐菌素诱发糖尿病模型；二、四氧嘧啶诱发糖尿病模型均可。其他方案如正确也

15、给分。一、 链脲佐菌素诱发糖尿病模型 （造模方法 1 分）1 STZ 可在大鼠、小鼠、犬和猴等动物引起糖尿病，较常用的实验动物为大鼠和小鼠， STZ 诱发糖尿病的剂量与动物种类、 品系、 年龄和性别有关。一般雄性、成年和体重大的大鼠成模率高于雌性、幼年和体重低者，以体重 200g250g 雄性大鼠的成模率较高。 （动物选择 1分） 。2 链脲佐菌素，用冷的pH 4.2, 0.1mol/L冷柠檬酸盐缓冲液溶解后配成2%溶液 （临用前现配） 。 STZ纯品为结晶粉状，在室温下和一般冰箱内不稳定，须放置 20C 或 70C 长期保存。其水溶液稳定性极差，但在pH4.0 时最稳定。故其水溶液应在 pH

16、4.0 ，低温保存，临用前现配。（ 1 分）3 造模前大鼠禁食， 不禁水， 确保大鼠禁食1216h 。4 按 STZ 50mg/kg 体重，单次腹腔注射，对照组动物腹腔注射等体积0.1mol/L 柠檬酸盐缓冲液。5 注射 STZ 1 周后尿糖在3+及以上、血糖值 16.67mmol/L者列入糖尿病动物。对于确实未形成糖尿病者，禁食后可再次注射STZ。 （成模标准 2 分）6 为减少注射 STZ后低血糖的危险，于 STZ注射后 4h 或立即腹腔注射25%葡萄糖溶液2ml 。 （ 1 分）7 实验分组 （ 3 分， 每缺一组扣一分）正常对照组， 模型组， 溶媒对照组， 阳性药组， A 药组8 描述逻辑性，系统性 （ 1 分）二、四氧嘧啶诱发糖尿病模型给分标准同上大鼠。22. 哪个模型可以模拟女性绝经期后骨质疏松，原理是什么。以下无正文仅供个人用于学习、研究；不得用于商业用途。tojibko AJiajiioAe ak pTOpwenojib 3 ymaisoid y u u hhs: CReOB ai hhh6ha 0 ji >k h ei Hcnojib3OBaTbCH b KOMMepnecKHx uejiax.For personal use only in study and research; not for commerc