抗原抗体反应PPT课件

1、第一节第一节 抗原抗体反应的原理抗原抗体反应的原理第1页/共22页抗原抗体反应的原理抗原抗体反应的原理抗原抗体反应的物质基础抗原抗体反应的物质基础: : 抗原表位与抗体高变区间的互补结合抗原表位与抗体高变区间的互补结合 抗原表位与抗体高变区的沟槽分子表面的结合抗原表位与抗体高变区的沟槽分子表面的结合 抗原抗体之间的结合力抗原抗体之间的结合力 亲水胶体转化为疏水胶体亲水胶体转化为疏水胶体抗原抗体反应抗原抗体反应: :指抗原与相应抗体发生的特异性结合反应。指抗原与相应抗体发生的特异性结合反应。第2页/共22页 静电引力静电引力 （electrostatic forceselectrostatic

2、forces） 范德华引力范德华引力: :作用最小作用最小 （van der Waals interactionsvan der Waals interactions） 氢键氢键: :最具特异性最具特异性 （hydrogen bond hydrogen bond ） 疏水作用力疏水作用力: :作用最大作用最大 （hydrophobic interactionshydrophobic interactions） 抗原抗体结合力示意图抗原抗体结合力示意图抗原抗体反应的原理抗原抗体反应的原理抗原抗体结合力抗原抗体结合力第3页/共22页抗原抗体反应的亲和性和亲合力抗原抗体反应的亲和性和亲合力抗体分子一

3、个抗原结抗体分子一个抗原结合部位与一个相应抗合部位与一个相应抗原表位之间的结合强原表位之间的结合强度度 ，取决于二者空，取决于二者空间构型互补的程度间构型互补的程度 亲和性亲和性(affinity)(affinity)抗原抗体的亲和性示意图抗原抗体的亲和性示意图第4页/共22页抗原抗体反应的亲和性和亲合力抗原抗体反应的亲和性和亲合力一个完整抗体分子的一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的相应抗原表位之间的结合强度结合强度 亲合力亲合力(avidity)(avidity)抗原抗体的亲合力示意图抗原抗体的亲合力示意图第5页/共22页 抗原抗体反应的原理抗原抗体反应

4、的原理亲水胶体转化为疏水胶体亲水胶体转化为疏水胶体可见反应可见反应抗原抗体复合物抗原抗体复合物 ( (疏水胶体疏水胶体) )电解质电解质 抗原抗原( (亲水胶体亲水胶体) ) 抗体抗体( (亲水胶体亲水胶体) ) + +第6页/共22页第二节第二节 抗原抗体反应的特点抗原抗体反应的特点第7页/共22页v特异性特异性（specificityspecificity）v可逆性可逆性（reversibilityreversibility）v比例性比例性（proportionalityproportionality）抗原抗体反应的特点抗原抗体反应的特点第8页/共22页特异性特异性: :抗原与抗体结合的专

5、一性抗原与抗体结合的专一性抗原抗体反应的特异性抗原抗体反应的特异性抗原抗体反应特异性示意图抗原抗体反应特异性示意图特异性特异性分子基础分子基础: :抗原表位与抗体分子抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性高变区之间空间构型的互补性 第9页/共22页两种抗原分子有部两种抗原分子有部分相同或类似结构分相同或类似结构的抗原表位，可与的抗原表位，可与彼此相应的抗血清彼此相应的抗血清发生反应发生反应 抗原抗体反应的特异性抗原抗体反应的特异性交叉反应交叉反应（cross reactionscross reactions）抗原抗体交叉反应示意图抗原抗体交叉反应示意图第10页/共22页可逆性可逆性: :

6、抗原抗体为分子表面的非共价结合，抗原抗体为分子表面的非共价结合，形成的复合物不牢固，一定条件下可解离为形成的复合物不牢固，一定条件下可解离为游离抗原和抗体。游离抗原和抗体。抗原抗体反应的可逆性抗原抗体反应的可逆性第11页/共22页抗原抗体反应的可逆性抗原抗体反应的可逆性 亲合力：亲合力越高，结合越牢固，越不易解离亲合力：亲合力越高，结合越牢固，越不易解离 环境因素环境因素:pH:pH、离子强度、离子强度 影响可逆性的因素影响可逆性的因素第12页/共22页v 前带前带( (prezone)prezone)：抗体过量抗体过量v 后带后带( (postzone)postzone)：抗原过量抗原过量v

7、 等价带等价带( (equivalence zone)equivalence zone)： 抗原抗体比例合适抗原抗体比例合适 抗原抗体反应的比例性抗原抗体反应的比例性抗原抗体反应比例性示意图抗原抗体反应比例性示意图比例性：抗原与抗体发生可比例性：抗原与抗体发生可见反应遵循一定的量比关系见反应遵循一定的量比关系第13页/共22页v第一阶段：特异性结合阶段，反应快，不可见第一阶段：特异性结合阶段，反应快，不可见 v第二阶段：反应可见阶段，反应慢，出现凝集、第二阶段：反应可见阶段，反应慢，出现凝集、 沉淀和细胞溶解等现象沉淀和细胞溶解等现象 抗原抗体反应的阶段性抗原抗体反应的阶段性第14页/共22页

8、第三节第三节 抗原抗体反应的影响因素抗原抗体反应的影响因素第15页/共22页反应物自身因素反应物自身因素抗原抗原: :理化性状、表位种类和数目理化性状、表位种类和数目抗体抗体: :来源、特异性、亲和性、效价来源、特异性、亲和性、效价环境因素环境因素电解质电解质: : 生理盐水或缓冲液生理盐水或缓冲液酸碱度酸碱度: pH6: pH69 9温温 度度: 15-40: 15-40，3737最适最适抗原抗体反应的影响因素抗原抗体反应的影响因素第16页/共22页第四节第四节 免疫学检测技术的类型免疫学检测技术的类型第17页/共22页免疫学检测技术的类型免疫学检测技术的类型凝集反应凝集反应（aggluti

9、nationagglutination）沉淀反应沉淀反应(precipitation)(precipitation)补体参与的反应补体参与的反应中和反应中和反应标记免疫反应标记免疫反应反应类型反应类型第18页/共22页免疫学检测技术的类型免疫学检测技术的类型 反应类型反应类型实验技术实验技术结果判断结果判断凝集反应直接凝集试验观察凝集现象间接凝集试验同上抗球蛋白试验同上沉淀反应液相沉淀试验观察沉淀，检测浊度免疫电泳技术观察扫描沉淀峰、沉淀弧补体参与的反应补体溶血试验观察测定溶血现象补体结合试验同上第19页/共22页免疫学技术的类型免疫学技术的类型中和反应病毒中和试验检测病毒感染性毒素中和试验检

10、测外毒素毒性标记免疫反应荧光免疫技术检测荧光现象放射免疫技术检测放射性强度酶免疫技术检测酶底物显色发光免疫技术检测发光强度金免疫技术检测金颗粒沉淀第20页/共22页免疫学检测技术的类型免疫学检测技术的类型按实际用途分为按实际用途分为: :免疫组织化学技术免疫组织化学技术(immunohistochemistry technique,IHCT)(immunohistochemistry technique,IHCT)免疫测定免疫测定(immunoassay)(immunoassay)标记免疫技术标记免疫技术按检测现象分为按检测现象分为: : 放射免疫技术放射免疫技术荧光免疫技术荧光免疫技术酶免疫技术酶免疫技术化学发光免疫技术化学发光免疫技术金免疫技术金免疫技术 按测定反应体系的物理状态分为按测定反应体系的物理状态分为: : 均相免疫测定均相免疫测定(homogenous immunoassay(homogenous immunoassay）非均相免疫测定非均相免疫测定(heterogenous immunoassay)(heterogenous