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文档简介

1、输血科工作制度一查对希阴(一)三查就诊卡号(标本接收时) 上 1OH| (一点加 一翰ii溜二需齧读楚,如姓名、性别、年龄、住院号、带書鞏触号,是否写明姓名、病区、床号;2、3、是否-致; 每本是否有祁 ife?5 燧病人身份污染;6、核对输血日缈呈歪一致;的普謠,加網巒册-致' 二领血型蠟薪爲刼;'翩烈山換区派一名能够 j嘍踰辟工似货昭価曲馭歸期液;核对无误后斗来领血,采4、全血及血液成分制品发出血库后应立即输注给病人,原则上不能退:需瀚和蕭观w照血液的保存日期先后进行发血临床医务人输血科质量控制工作制度科獄畫勰辭求所采取的作业技术和活动,以提高医学检验质量,特制定本 度化剌

2、彳§2 (IQC),参加室间质评(EQA),作为科室常规化、制 品丄操4、鑑堀过程、质控结果、上报结果、 云叹,磨E右A成绩、实验差距或不足、改 号團店桃弓、结会议。学习质控有关文献、掌握质控学术 E电累赦行质控工作,对于存在的问题,科室统一汇总并轿ifete制蘆,履行职责,负责门急诊供血的各项工作,ill2卩时,应报告科主任,并番:努力完成职责以内的运转情况,辛己录,并应an/. S甜貝T W 5爲燿懈變鯛触据不同季节各班次上襄赛览薫®®艷攥幫K收器隔实到专孑使用者,必须事先接受培训和带教,实习、进 玉处部、工作: 并作跖下班均'人负责和希 修人負 盖上

3、關年" 畤自拆 翩憾 以保樂為懐器检定率达到wo%,匚:、站 跚攵器、设备、计量器具只限本单位使用,未经领导批准一律不 得外心为【Et-t+afcr黠;Iffl圧41桔善蘿I®讎書籲靱罄所规定的相应资质。 ,=1声恋理籲揉緒愿鷲*业盒稔培养具备指:;希眺卿銘魏讎°床科室的申请和患者的病情,提供合适的 尙:站焚向临床开展科学用血、合理用血的宣传,推广普及新的 :血咚$罐礙麹篠为讎魁豔擁皐住觀T究危重特殊患者的 二般關捫附鈕 证不对、输血方法欠妥、输血4、C性等i3、保存、领发管理制度核耳血爲 co填、號 对:入题 入核 i #, .n 应密陋 不 口al血 合 成、

4、目热 坯題, SS 汚 入右僅 ft f M 括 <Engiix 喙幫拒 H sis1:2、血液验收合格并核对无误后,双方签名确认。血液的贮存卜易甸嘯幼謂两凉 血型、规格和有效日期分别竖立放置于金属架细胞;4±2 C; CAPD 35天;CPD28天;单D 21 天;,B百红细胞:4±2 °C, 的3歪天;CPD28天;ACD22天;细胞:4±2 °C 24小时丙输注;冰冻红纟竊赫眇厂祗以环; 鎰定毎咒以下1年;报警毀iJ®闘 存伽翻:4±2 °C解冻后24:22±2 °C 5-7A U2

5、2±2 _°C. 24小时內m动控制记录或 馆、无燥,严禁:AF>D 35: CPD28天:ACD21 天:、I他导确请k床号;、完整:),用血来 血标术;),寺6、按失空熾歸艸删蹩分制品存放整齐,冶T五对性2、b.c.d.时m.%血日期、尢损;0要求做到:6、(必须7、血液 报单8'为1、嗣薛端礙陽9®需瞬的血液 睡鹭勰癬融嘔霧縣霰应回桦謎金蠶議幌减眶种形式考核。7、侏奖辔诊病次辎话关规齢管理,保证病人用血安全,规范和方便门、急诊输血病人诊输液室交输液室护士实施输血。嚮Jf鋼»饿踊療鑑般辭,、雛 毎腿戏L:緇1照输血规范要求执行。血标本

6、切卿鄒聽“舷台峡.砒病人爭踰嗣输血科工作职责科主任职责,1?在医院党委和院长领导下,全面负责输血科的医疗、教学、科研和行 呀工科室长远发 督促和 开豳霽承儡fe准操作施疔荃面质量管理,定期衿単|甯床输血业务的开展和研究工作,积极引进新技术,硏究、分析各项工作开展情况及存在问题,制定 耐殳,经常进行医疗安全教育,严防事故和差错,改进霜确保输rflf麦全:核。学H.S训、员<1员业4HWAn人人宀科岗 拠 sgs2>wr>s££3xHS£SES贵差、爺全-L,技己O'TV 和 1床 临 弊、量 质。II O®XH- si 成塡 fu

7、 术耀 蘇检 应閒 广保定 推,的 iw. 方淵 m 立暮 W0 ,作 动丄 学的 的班能力,6、硕士以lilt沁豹本职工作,遵守医院和科室各项规章制度,具有良好同徽2芈人才(卜力,冇较好的教学组织和甘理岗1>乙3、K CET4 2慫愛,本卿-曲八那冰组织安排,遵守医院和科室各项规章lil卿骸技师、进修人员簡能力厂能承制度,、i»fc4、科研工作 领导.卡纟极申结邮.的医德必凤副主任技师职责负责派定的医疗、教学、科研工作。 鏈蠶加保证输血安全。,八南籠和临床检验的质量。!藉1试剂和消耗品的使用° 財女配合医疗和科研,根据需要开展新的检验项LI,满足研究与临床 勿技师一

8、切岗位职责。续医学教育的教与学工作。指导下级技术人员的实 IB幫WW,囁极监督并指导下级医 ht囱孳专业或临床检验专业基础课新进展,作好读书舎)农冒翻&验室发展规划,操作规范。(2)参加实验的日常科研管理,负责临床检验仪器的请领、维修和保养(3)掌握科研选题、课题设讣及研究方法,能结合临床实践提出课题,开'” 一 麴飜目。胃歪錨騙卿并发适合临床需要的新技术、新方法与新项目,每2年 一项。主管技师职责:、参 工作曲爵芒任和上级技师指导下,负责派定的医疗、教学、科研工作。用。3理、驟仪器设备的使用和维修,检查和督促本部门试剂和消耗品的使“ ,6)考察先进仪器设备在研究与临床工作中的

9、价值与性能,并负责其维护与 土甲1 (7)iyjj?(级技师一切岗位职责。3'飞续医学教育的教与学工作。指导下级技术人员的实术建课和交流至少1次。盘施戢临床检验专业基础课新进展,作好读 于誓密綴見瞬治嬴盔学分不少于15分。发展规划,操作规范。irF L作发歸参;2、三输血保证临床F医疗、科研,在上级医技人员指导下开展新项口,满足研究W 展科负.履职要?制度'貨役计及研究方法等工作,结合临床实践、开 诙需较朱、新方法和新项目。组织安排,遵守医院和科室各项规章4、大殳 际学癥 的组维墓祐畜蠢或国要时主动加班。攵实习生,并能正确引导下级技师处理常见问题,有一定 和上级技师指导下,负责

10、派定的医疗、教学、科研工作。保障嗨舌)扌縛#1 蔘和实习人员的技术操作工作并给予研究生技术和设备使用等帮每: 解诫年对制度。认真核对检验结助。冊年爲 琴云黯魅邈业或临床检验专业基础课12门,了 誓须劉進墓靈噬'教書赛裡,按规定完成继续教育学分。乍暮恿麹保專地鈔勺课题瞌疆豪勸聖°节约各项研究使用的耗林买、登记、使譬,r3>专具 跚度孙垂子工 燔制摯IK456urr安织,遵守医院和科室各项规章献识本从 文型咼 盘论 下,贽 导爲人 段。医。 蛰践 贯础丄慟一 另O 于能,基,学曲 pmt疋技术规范与操作规程ABO和Rh血型鉴定(试管法)【原理】正定型:用已知血清测定红细胞上

11、未知抗原。反定型:用已知抗原测定血清中的未知抗体。【操作】正定型:将受检者的红细胞配成5%的盐水悬液备用,取小试管3支,并 标明A、B和D并各加入1滴抗A和抗B、抗D试剂,再加入受检者红细胞悬液 1滴,混匀,lOOOrpm,离心1分钟。反定型:取小试管2支,并标明a和b,分别加入5%标准A 型和B型红细胞1滴,再加入受检者血清1滴,混匀,lOOOrpm,离心1分钟。将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无 凝集(或溶血)现象,如肉眼不凝集,应将反应物倒在玻片上,再以 显微镜检查。【结果判定】1、ABO血型结果判定正定型反定型A型红细胞 B型红细胞OAB1、Rh (D) fit型

12、结果判定:红细胞与抗D凝集为Rh (D)阳性,无凝集 为 Rh (D)阴性,阴性必须作抗人球试验确证。【注意事项】1、单克隆抗体试剂和试剂细胞每天使用前必须与相应的红细胞和 血清作阳性、阴性对照,以检测其活性。2、对含有较多自身冷凝集素的受检者,正定型易误定为AB,需用 37°C生理盐水洗涤受检者红细胞23次,去除吸附在红细胞上的冷凝集 素。3、Rh (D)血型只做正定型。ABO和Rh血型鉴定(抗人球法)【工作准备】1、Al, B标准反定型细胞的制备(1%):取5ulA型和B型标准压积红细 胞分别悬浮于05ml低离子稀释液中,制成1%标准反定型细胞。(若是成品试 剂细胞,红细胞浓度为

13、5%,需稀释5倍)2、5%样本红细胞制备:样本压积红细胞25ul或50ul全血悬浮于0.5ml 低离子液中。【操作步骤】1> Al, B管中分别加入50ull%Al, B标准红细胞,再加入50ul标本血清 或血浆(反定型)。2、取5%样本红细胞lOul加入A, B, D和Ctrl管中3、离心10分钟,判断结果,记录。【注意事项】1、每日实验前,先取出低离子稀释液及标准红细胞,平衡至室温,以防 冷凝集。2、必须标记卡。3、DiaMed卡封口已破损时,管中干涸,或有气泡时,不可使用。4、应用低离子稀释液保证反应结果可鼎,正定型细胞浓度要在5%左右, 不可太浓或太稀。5. 纤维蛋白可吸附部分红

14、细胞,应将血样离心。6、反定型先加样,以便标准细胞与血清血浆反应,先加细胞再加血浆或血 清。7、正反定型对照,确定结果及亚型。正定型结果若为弱阳性,应怀疑为 ABO亚型。可重做完全测试。正反定型不符时,请设计实验分析。8、质控管为阳性时,请先用生理盐水洗细胞,再做血型。9. 严格按照标准程序操作可检出弱抗原,血型亚型。10. 某些药物、疾病可导致弱阳性及正反定型不符。11. 细菌及异常血清蛋口可影响结果。ABO标准红细胞的制备【操作步骤】1、取10ml试管3支,分别标记A、B、Oo2、分别取35人份健康新鲜A型、B型、O型红细胞于上述三支试管 内,混匀。3、用大量生理盐水充分洗涤至少3次,每次

15、用滴管充分混匀,洗涤至上 清液澄清为止,弃上清,留压积红细胞备用。4、将压积红细胞根据实验方法的要求配制成不同浓度的标准红细胞悬液 备用。【注意事项】1、配制过程中各型之间应谨防交义污染,滴管、剪刀等要严格分开;2、配制好的压积红细胞4弋保存可用3-5天,一旦有洛血现象,都应 立即重新配制。3、每日使用前都应与对应的血清作阴性、阳性对照,以检测其活性和特异性。ABO血型正反定型不符原因及处理【原因】1. 操作或实验本身的错误2.红细胞的问题3血清的问题【处理】1、排除实验操作失误,如血清未加,使用错误的抗体或红细胞试剂(如 红细胞在洗涤的过程中受到污染),血清或试剂与红细胞比例不当,没能认识

16、到溶血也是阳性反应等。2、排除操作失误后,按下列基本程序处理:1)重取标本。2)多次洗涤标本红细胞或试剂红细胞,除去可能引起意外阳性反应 的血浆中的或试剂红细胞中的化学成分。3)应用抗AB,抗或抗H检测红细胞。4)如果怀疑血清中有抗-Al,则用数份抗A2红细胞标本进行检测。5)用0型筛选细胞检测,确定是否是非特异性的冷抗体的干扰。6)室温孵育30分种后,离心观察凝集结果,能检测弱的抗原抗体 反应,但要用O型和自身红细胞做对照,以排除抗"或抗H等抗体对正 反定型结果的干扰,抗1和抗-H是对所有成人红细胞都反应的凝集素。7)抗原弱表达或血清意外反应应结合临床具体分析,分别对待。8)样本红

17、细胞可能由于病理情况被一些未知的抗体致敬,此时要对 红细胞做相应的处理后再定血型,例如多次洗涤样本红细胞再次实验。9)对于血型抗原表达弱的情况下,可采用吸收放散的方法进行血型 的鉴定。10)有些是曲于红细胞自身冷凝的原因,发生自身的凝集所致,应将细 胞做预温处理或恒温下进行血型的鉴定。11)有些进行了血型不合的骨髄移植的病人在一定时间内也可以岀现正 反定型不一的情况,应紧密结合临床作出正确的判断。总之,血型的正反定型不一致,要从红细胞自身和血清两个方面寻找原 因,要结合临床,联系病情等相关因素作相应的处理。盐水法交叉配血【实验原理】红细胞加入血清中,当血清中存在针对红细胞膜上的ABO血型或其它

18、血 型抗原的抗体时,离心力加速抗体抗原的结合速度,山于人类ABO血型抗体 是以IgM型为主(包括MN. P等血型抗体),这种抗体可以结合多个盐水介质中 悬浮的红细胞,最终导致红细胞凝集;也可以激活补体,导致红细胞膜的损伤, 出现溶血。在进行交义配血试验时,加入受血者血清和用生理盐水制备的献血 者红细胞悬液的试管,称为交义配血主侧管,加入献血者血清和用生理盐水制 备的受血者红细胞悬液的试管,称为次侧管。分别离心后,肉眼观察试管中红 细胞有无凝集或溶血。为了防止红细胞弱凝集的漏检,必须用显微镜观察镜下 有无红细胞凝集,两者合称为盐水介质交义配血试验。此试验主要检查受血者 或献血者血清中是否存在破坏

19、对方红细胞的不规则完全性(IgM型)或补体依 赖性红细胞抗体;并可以验证ABO血型鉴定是否正确,确保受血者和献血者血 液相容,防止发生急性输血性溶血反应。【操作步骤】1、抽取受血者静脉血34ml,待凝固后分离血清;以生理盐水洗涤受血者 红细胞3次,配成3%红细胞悬液。同样的方法处理献血者标本;2、取洁净小试管2支,1支加入受血者血清(PS) +献血者红细胞(DC), 标为主侧管,另1支加入献血者血清(DS) +受血者细胞(PC),标为次侧管;3、标为主侧管内加受血者血清2滴,献血者红细胞悬液1滴。次侧管加献 血者血清2滴,受血者红细胞悬液1滴;4、混匀后,立即将两只试管放入离心机,以120g离

20、心lmin或1300 g离 心 15s;5、小心取出试管后,肉眼观察上清液有无溶血现象,再轻轻摇动试管,直 至红细胞成为均匀的混悬液,并观察有无红细胞的凝集;6、取载玻片一张,用两滴管分别从主侧管和次侧管内吸取红细胞悬液各1 滴,分别滴在载玻片两侧,用显微镜观察结果,最后得出试验结果。注:3%红细胞悬液配制方法:取洗涤后压积红细胞30ul,加入lml生理盐水中悬浮,即成为3% 的红细胞悬液。【结果判断】ABO同型配血,主侧和(或)次侧管红细胞无凝集,无溶血,表示受血者 和献血者盐水介质配血相容,献血者血液可以输注。出现主侧和次侧试管或单 独一侧试管内红细胞凝集和(或)溶血则表明两血不相容,献血

21、者血液不可输 注。【注意事项】盐水介质交义配血试验是临床输血前最基本的相容试验,此试验灵敬 度不高,特异性不强,仅能检测完全性(IgM型)红细胞血型抗体,不能检测 不完全性(IgG型)抗体。在临床实际工作中,盐水交义配血完成后,必须增 加另外一种可以检测不完全性抗体介质的配血方法,防止此类抗体漏检,保证 输血安全;2、应用盐水介质交叉配血试验时,出现两血不相容,应当首先重新进行 献血者和受血者ABO血型鉴定,排除ABO血型鉴定错误导致的两血不相容;3、溶血标本不得用于交义配血试验;4、冬季实验室温度较低出现红细胞凝集时,应肖排除受血者或献血者血 清中存在自身冷凝集素。分别取受血者和献血者红细胞

22、悬液各1滴,滴加在载 玻片上,显微镜下观察有无红细胞自身凝集现象,借以确定是否存在自身冷凝 集素。确定是冷凝集素导致的红细胞凝集,可以把主侧或次侧试管放置在37 度水浴箱内,轻轻摇动试管,取岀试管后立即吸取试管内红细胞悬液放在显微 镜下观察结果。抗人球卡交叉配血【实验原理】微柱凝胶测试法基于生物化学凝胶过滤技术和离心技术及免 疫化学抗原抗体特异性反应。当红细胞上的抗原与相应抗体反应时,通过抗 人球蛋口的桥联,红细胞发生凝集。离心时凝集块不能通过凝胶间隙而留在 凝胶上层,呈阳性反应。未凝集红细胞离心时可通过凝胶间隙而沉积在凝胶 底部,呈阴性反应。【工作准备】1、将低离子稀释液室温平衡。准备样本。

23、2、1%样本红细胞的制备:分别取病人和献血者压积红细胞5ul悬浮于0.5ml 的低离子稀释液中。【抗人球卡的准备】选择配血抗人球卡(Liss/coombs卡),揭去封口锡纸(需要儿孔打开儿 孑L,可用剪刀剪),编上病人(主侧)和献血员(次测)姓名(或号码)。【加样】1. 主侧加入50ul献血者细胞(1%), 25ul受血者血浆或血清。2. 次侧加入50ul受血者细胞(1%), 25ul献血者血浆或血清。【孵育及离心】37°C孵育15分钟。然后离心10分钟(转速1030rpm,机器已自动设定)【读取结果】按达亚美卡图示:主侧(一),次侧(一+),认为交义配血结果良好。【注意事项】1、加

24、样时,每个病人都要更换加样头,避免病人间交叉污染;先病人后 献血员,避免献血员标本污染病人标本(或每次都更换加样头);加红细胞和 血浆要在反应孔两侧壁上,避免主次侧相互污染,影响结果判断。2、加样时,先加红细胞,后加血清,否则会致假阴性。3、LISS溶液从冰箱取出后,室温平衡10分钟,否则会致冷凝集。4、若对次侧弱凝集可疑,可补做病人自身红细胞对照,即只加病人1% 红细胞悬液50 uh其他操作同上。5、10分钟离心过程不能人为中断,否则本次实验结果无效。孵育、离心 时间不能随意缩短或延长。6、结果判断时,溶血也应视为配血不合或由于其他原因造成,不能忽视。凝聚胺交叉配血【原理】红细胞表面带有大量

25、的负电荷,以避免其产生自发性聚集,当红细胞悬浮在 电解质时,阳离子会被红细胞的负电荷所吸引,此时红细胞则被扩散的双层离子 云所围绕,而形成Zeta电位,Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技 术首先利用低离子溶液(LIM),降低介质的离子强度,减少红细胞周圉的阳离子 云,以促进红细胞和血清(血浆)中的抗体结合。其后,加入凝聚胺溶液,它是 一种高价阳离子多聚物,肝素中和剂,溶解后能产生很多正电荷,可以中和红细 胞表面带有的负电荷,使红细胞Zeta电位降低,缩短红细胞表面的距离,使红 细胞产生非特异性的凝聚。最后,加入悬浮液(Resuspending) , (Resuspending) 具

26、有中和凝聚胺的作用,使正常的红细胞非特异性凝聚散开,试验结果为阴性, 但如果红细胞被相应的抗体致敬,则会被凝聚胺凝结,凝集就不会散开,试验结 果为阳性。【试验步骤】1取二支试管,标主次侧,主侧管加病人的血清(血浆)2滴,加供血 者35%红细胞悬液(洗涤不洗涤均可)1滴,次管反之。2、各加LIM0.7ml,混合均匀后,再各加Polybrene溶液2滴,并混合均匀。3、用BASO血库专用离心机lOOOg离心力,离心10秒(若为普通离心机, 离心条件为:3400rpm,离心10秒),然后把上清液倒掉,不要沥干,让管底 残留约0.1ml液体。4、轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重做。5、最后加入Resuspending 2滴,轻轻摇动试管混合并同时观察结果。如 果在30秒1分钟内凝集散开,代表是由Polybrene引起的非特异性聚集, 配血结果相合,如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应,配 血结果不相合。如反应可疑,可进一步倒在玻片上用显微镜观察。【注意事项】1、可以用含EDTA之血浆代替血清。2、若病人血清(血浆)含肝素,如洗肾患者

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