菊花的组织培养(3)课件

1、菊 花 的 组 织 培 养菊 花 的 组 织 培 养 大多绿色开花植大多绿色开花植物都是靠物都是靠种子种子繁殖。繁殖。那么，有没有不用那么，有没有不用种子来培育植物的种子来培育植物的方法呢？方法呢？ 扦插扦插嫁接嫁接压条压条 茎的营养茎的营养繁殖方式繁殖方式 指在人工培养基上，离体培指在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体，养植物的器官、组织、细胞和原生质体，并使其生长、增殖、分化以及再生植株并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。的技术。 组织培养组织培养即已分化的细胞，仍具有发育形成即已分化的细胞，仍具有发育形成完整个体的潜能。完整个体的潜能。离体的植物离体的植物器官、

2、组织、器官、组织、细胞细胞脱分化脱分化愈愈伤伤组组织织再分化再分化 胚状胚状体或体或丛芽丛芽植植物物体体植物组织培养的基本过程植物组织培养的基本过程在植物中在植物中, 去分化细胞成为薄壁细胞去分化细胞成为薄壁细胞, 称为称为愈伤组织愈伤组织 外植体：外植体：脱分化：脱分化：再分化：再分化：愈伤组织：愈伤组织：愈伤组织愈伤组织（二）影响植物组织培养的因素（二）影响植物组织培养的因素1.不同的植物组织，培养的难易程度差别很不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。例如，烟草和胡萝卜的组织培养较为容大。例如，烟草和胡萝卜的组织培养较为容易，而枸杞愈伤组织的芽诱导就比较难。因易，而枸杞愈伤组织的芽诱导就

3、比较难。因此，此，植物材料的选择直接关系到实验的成败。植物材料的选择直接关系到实验的成败。对于同一种植物材料，材料的年龄、保存时对于同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。间的长短等也会影响实验结果。菊花的组织菊花的组织培养，一般选择培养，一般选择未开花植株的茎上部新萌生未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。的侧枝。外植体的年龄：外植体的年龄：幼嫩的植物组织幼嫩的植物组织外植体的大小：外植体的大小：大小适中大小适中外植体所在的部位：外植体所在的部位：茎尖，根尖等茎尖，根尖等外植体的外观形态：外植体的外观形态：表面相对光滑，容易表面相对光滑，容易消毒；消毒；2.2.离体的植物组织

4、和细胞，对营养、环境等条件的要求离体的植物组织和细胞，对营养、环境等条件的要求相对特殊，需要配制适宜的培养基。相对特殊，需要配制适宜的培养基。常用的一种培养常用的一种培养基是基是MSMS培养基培养基。 MSMS固体培养基成分及比例固体培养基成分及比例答案：答案：此时的组织或细胞为离体的，即细胞所生此时的组织或细胞为离体的，即细胞所生活的环境为液体有机物营养环境，而不是能体现活的环境为液体有机物营养环境，而不是能体现其整个植物体的光能自养其整个植物体的光能自养答案：答案：在培养过程中，是脱分化、再分化的过在培养过程中，是脱分化、再分化的过程，随着芽和根的形成，就具有了自养的能力，程，随着芽和根的

5、形成，就具有了自养的能力，是由细胞到一个个体的演变过程是由细胞到一个个体的演变过程思考：高等植物是光能自养型生物，为什么在植思考：高等植物是光能自养型生物，为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基？物组织培养过程中还需要提供有机物培养基？思考：培养过程中为什么需要进行光照？思考：培养过程中为什么需要进行光照？植物激素浓度、使用的先后顺序以及用量的植物激素浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等，会影响实验结果。比例等，会影响实验结果。 按照不同的顺序按照不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的实验结果。使用这两类激素，会得到不同的实验结果。除了上述因素外，除了上述因素外，PHPH、温度、光照

6、等条件、温度、光照等条件也很重要。也很重要。不同的植物对各种条件的要求往往不同的植物对各种条件的要求往往不同。进行菊花的组织培养，一般将不同。进行菊花的组织培养，一般将PHPH值控制值控制在在5.85.8左右，温度控制在左右，温度控制在18-2218-22，并且每日用，并且每日用日光灯照射日光灯照射12h12h。阅读课文，思考以下问题阅读课文，思考以下问题2、你认为组织培养过程中，成功的关键、你认为组织培养过程中，成功的关键有哪些？这些步骤的适宜条件是什么？有哪些？这些步骤的适宜条件是什么？组织的脱分化及愈伤组织的再分化。组织的脱分化及愈伤组织的再分化。植物组织培养过程中，影响植物细胞植物组织

7、培养过程中，影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是植物激素，脱分化、再分化的最重要因素是植物激素，细胞分裂素与生长素之间的浓度比可以调细胞分裂素与生长素之间的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根的形成。控植株组培过程中芽和根的形成。 生长素生长素/细胞分裂素细胞分裂素高高 有利于根的分化、抑制芽的形成有利于根的分化、抑制芽的形成低低 有利于芽的分化、抑制根的形成有利于芽的分化、抑制根的形成同常规的无性繁殖方法相比，组织培养快速同常规的无性繁殖方法相比，组织培养快速繁殖法主要具有以下优点：繁殖法主要具有以下优点：（1 1）快速。）快速。采用常规的方法如分株法，一棵花采用常规的方法如分株法，一棵花

8、卉一年一般只能生产几株或几十株，但用组卉一年一般只能生产几株或几十株，但用组织培养的方法则每年可以繁殖出几万甚至数织培养的方法则每年可以繁殖出几万甚至数百万的小植株。百万的小植株。（2 2）周年生产。）周年生产。花卉组织培养快速繁殖是在实花卉组织培养快速繁殖是在实验室中进行，因条件可控，所以不受季节限验室中进行，因条件可控，所以不受季节限制，可以全年进行连续生产。而常规的无性制，可以全年进行连续生产。而常规的无性繁殖则受季节限制，只能在花卉生长季节进繁殖则受季节限制，只能在花卉生长季节进行繁殖。行繁殖。组织培养与常规繁殖相比优点众多组织培养与常规繁殖相比优点众多（3 3）经济效益高。）经济效益

9、高。花卉组织培养快速繁殖所花卉组织培养快速繁殖所需要的空间小，在一个需要的空间小，在一个200200平方米的培养室平方米的培养室内一年可生产试管苗上百万株。如按每株内一年可生产试管苗上百万株。如按每株1 1元计算，每年产值上百万元。元计算，每年产值上百万元。（4 4）以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同）以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同的遗传基因。的遗传基因。所以使用这项技术可让优良所以使用这项技术可让优良的品种不断地延续。的品种不断地延续。组织培养与常规繁殖相比优点众多组织培养与常规繁殖相比优点众多转基因植物的培育，转基因植物的培育，1 1、植物快速繁殖、植物快速繁殖制备制备MSMS固体固体

10、培养基培养基外植体消毒外植体消毒接种接种培养培养栽培栽培移栽移栽冲洗冲洗70%酒精酒精无菌水冲无菌水冲洗洗氯化汞氯化汞无菌水冲洗至无菌水冲洗至少三次之上少三次之上1 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）2 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）、外植体的消毒（酒精、氯化汞）3 3、接种的无菌操作（酒精、酒精、接种的无菌操作（酒精、酒精灯灯灼烧）灼烧）4 4、无菌箱中的培养；、无菌箱中的培养；5 5、移栽到消过毒的环境中生存一、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。段时间。在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？植物组织培养过程示意图植物组织培养过程示意图 上面的示意图中还有什么地方不够上面的示意图中还有什么地方不够完善的？完善的？没有进行灭菌处理，试管也没有做没有进行灭菌处理，试管也没有做密