乳品理化检验作业指导书

1、 编号：XHR-Q-J-021-2011西安宏兴乳业有限公司 版次：A发布日期：理化检验作业指书 文件更改记录单 序号更改通知单号更改页码更改条款号更改日期更改人批准人西安宏兴乳业有限公司 目 录文件更改记录单································

2、83;···························1目录······················

3、·················································2§

4、;1生乳相对密度的测定················································&

5、#183;···3§2乳与乳制品杂质度的测定···········································

6、····4§3生乳掺杂掺假的检测 ···········································

7、········51. 碱性物质的测定········································&

8、#183;············52. 亚硝酸盐的测定···································&#

9、183;·················53. 氯化物的测定······························

10、3;························64. 酒精实验························&#

11、183;·································7§4乳与乳制品酸度的测定·············&#

12、183;··································81. 乳粉酸度的测定·············

13、83;·······································82. 巴氏杀菌乳，灭菌乳，生乳，发酵乳酸度的测定······&#

14、183;·····················9§5乳与乳制品中水分的测定·························&

15、#183;····················11§6乳制品中灰分的测定··························&

16、#183;·······················13§7乳与乳制品蛋白质的测定·······················

17、;·······················15§8乳与乳制品脂肪的测定·······················

18、3;························191.乳粉脂肪的测定························

19、;····························192.盖勃氏乳汁计法····················

20、································22§9乳品中乳糖、蔗糖的测定··············

21、3;·······························23§10乳制品中氯含量的测定···············&#

22、183;·······························29§11乳制品中磷含量的测定···············

23、································31§12 乳与乳制品抗生素残留的测定··············

24、··························34§13 乳与乳制品感官要求的判定····················&

25、#183;·····················37§14 乳与乳制品中非脂乳固体的测定························

26、··············39§1生乳相对密度的测定1.原理使用密度计直接检测，根据其读数与生乳的温度（10-25）查表，换算为20时的读数，通过计算可得生乳的相对密度。2.仪器设备2.1 密度计：20/4。2.2 玻璃量筒或250ml的标准量筒。3.分析步骤取均匀并调节温度为10-25的生乳试样，量筒倾斜，缓慢的倒入量筒内，勿使其产生气泡并准确测量温度，小心的将密度计放入量筒内，使其自然漂浮但不能与量筒内壁接触，静置2-3min后，眼睛平视液

27、面高度，读取读数，根据其读数与生乳的温度查表，换算为20时的读数，通过计算可得生乳的相对密度。4.计算方法 -样品20时的密度。X-根据其读数与生乳的温度查表，换算为20时的读数。5.备注 参考国标GB5413.33-2010§2乳与乳制品杂质度的测定1.原理试样经标准过滤板过滤，冲洗，根据残留于过滤板上的可见带色杂质的数量与杂质度标准板进行比较即可得杂质度。2.仪器与设备2.1 过滤设备：杂质度过滤机或可安放杂质板的抽滤瓶。2.2 标准过滤板。2.3杂质度标准板。3.分析步骤液体乳样量取500ml;乳粉称取62.5g，用500ml加热至60的水充分溶解样品于过滤板上过滤，取下过滤板

28、，置烘箱中烘干，与杂质标准板比较即可得杂质度。当杂质度介于某两个杂质度之间时，判定为杂质含量较多的级别。4.备注本方法参考国标GB5413.30-2010。§3生乳掺杂掺假的检测一碱性物质的测定1.原理溴百里香酚蓝指示剂在pH=6.0-7.6碱性溶液中颜色由黄至蓝发上变化。2.试剂材料2.1溴百里香酚蓝乙醇溶液（0.04%）。2.2试管：18*180mm。2.3刻度吸管。3.分析步骤取奶样5ml于试管中，使试管倾斜，沿管壁小心加入0.04%溴百里香酚蓝乙醇溶液1ml，然后缓慢转动3-5次，静置2min后，观察界面环层的颜色。4.结果判定由环层颜色通过下表判定结果。表：环层颜色变化与判

29、定结果对照表环层颜色含碱量结果判定黄色无碱合格乳黄绿色含碱0.03%异常乳浅绿色含碱0.05%异常乳绿色含碱大于0.1%严重异常乳二亚硝酸盐的测定1.原理在弱酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化，再与a-萘胺偶合形成紫红色染料。2.试剂材料2.1亚硝酸盐试剂：将0.1ga-萘酚，0.2ga-萘胺及0.6g对氨基苯磺酸溶解于400ml,50%的冰醋酸中，再棕色瓶中避光保存。2.2试管：18*180mm。2.3刻度吸管。3.分析步骤加入2ml亚硝酸盐指示剂，再加入奶样2ml于试管中，摇匀2min后，观察颜色变化。4.结果判定由奶样颜色通过下表判定结果。表：环层颜色变化与判定结果对照表环层颜色含

30、碱量结果判定白色不含亚硝酸盐合格乳微粉色含亚硝酸盐0.2ppm异常乳水粉色含亚硝酸盐0.3ppm异常乳粉红色含亚硝酸盐大于0.4ppm严重异常乳三氯化物的测定1.原理牛乳中氯化物的含量一般小于0.15%，羊乳一般小于0.18%，如果牛乳中掺羊乳，混合乳的氯化物含量将会大于0.15%,通过颜色变化来判定。2. 试剂材料2.1 10%的铬酸钾溶液。2.2 0.05634mol/L的硝酸银溶液。2.3试管：18*180mm。2.3刻度吸管。3.分析步骤取5ml硝酸银溶液于试管中，加2-3滴铬酸钾溶液，摇匀，再滴加1ml奶样于试管中，摇匀，观察其颜色，通过下表判定结果：样品名称混合液颜色结果判定生乳红

31、色合格乳黄色异常乳四酒精实验1.原理新鲜乳中的酪蛋白微粒，由于其表面带有相同的电荷和具有水合作用，故以稳定的胶粒悬浮状态分散于乳中。要想使其从乳中沉淀出来，需有两个条件： 一是除去胶粒所带的电荷，二是破坏胶粒周围的结合水层。当乳的新鲜度下降、酸度增高时，酪蛋白所带的电荷就要发生变化。当pH达4.6时（即酪蛋白的等电点），酪蛋白胶粒便形成数量相等的正负电荷，失去排斥力量，胶粒极易聚合成大胶粒而被沉淀出来。此外，加入强亲水物质如酒精、丙酮等，能夺取酪蛋白胶粒表面的结合水层，也使胶粒易被沉淀出来。酒精试验就是借助于不同酸度的乳加入酒精后，酪蛋白凝结的情况不同，从而判断乳的新鲜程度。在酒精试验时，乳的

32、酸度越高，酒精浓度越大，乳的凝絮现象越易发生。2. 试剂材料2.1 20ml试管2支。2.2 2ml刻度吸管3支。2.3 62%的酒精。3.分析步骤取乳样2ml于清洁试管中，加入等量的62°酒精溶液，迅速轻轻摇动使其充分混合，观察有无白色絮片生成。如无絮片，则表明是新鲜乳，称为酒精阴性乳。出现絮片的乳，为酸度较高的不新鲜乳，称为酒精阳性乳。根据产生絮片的特征，可大致判断乳的酸度。§4乳与乳制品酸度的测定一.乳粉酸度的测定1.原理 用0.1mol/L氢氧化钠中和100ml干物质为12%的复原乳至pH为8.3或以酚酞为指示剂滴定至终点所消耗的体积。2.试剂材料2.1 氢氧化钠标

33、准溶液：0.1000mol/L。2.2 酚酞指示剂。3.仪器设备3.1 三角瓶（250ml），烧杯(100ml)。3.2 天平：感量为1mg。3.3 滴定管：分刻度为0.1ml，可准确至0.05ml。3.4 全自动电位滴定仪。3.5 磁力搅拌器。4.检测步骤4.1 称取混合均匀的样品4g（精确到0.01g）于锥形瓶中。4.2 用量筒量取96ml煮沸冷却至约40-50水，使样品复原，待冷却至20左右，静置20min,即可进行滴定。4.3 将样品放在磁力搅拌器上，设定终点pH为8.3，开始滴定，记录所消耗的氢氧化钠的体积，整个滴定过程在1min内完成，或向样品中滴加2-3滴酚酞指示剂，用滴定管滴定

34、至溶液呈微红色，并在30S内不褪色，记录所用氢氧化钠溶液的毫升数。5.计算方法X-样品的酸度，。T。C-氢氧化钠标准溶液的浓度，mol/L。V-滴定时所用氢氧化钠的毫升数，ml。m-样品质量，g。w-样品中水分的质量分数。12-12g乳粉相当于100ml复原乳（脱脂乳粉为9，脱脂乳清粉为7）。0.1-酸度理论定义氢氧化钠的摩尔浓度，mol/L。以重复条件下获得两次独立测定结果的算数平均值表示，结果保留三位有效数字。在重复条件下获得两次独立测定结果的绝对差值不得超过1。T。6.备注 本方法参考国标GB5413.34-2010。二.巴氏杀菌乳，灭菌乳，生乳，发酵乳酸度的测定1.原理 用0.1mol

35、/L氢氧化钠中和100g试样pH为8.3或以酚酞为指示剂滴定至终点所消耗的体积。2.试剂材料2.1 氢氧化钠标准溶液：0.1000mol/L。2.2 酚酞指示剂。3.仪器设备3.1 三角瓶（250ml），烧杯(100ml)。3.2 天平：感量为1mg。3.3 滴定管：分刻度为0.1ml，可准确至0.05ml。3.4 全自动电位滴定仪。3.5 磁力搅拌器。4.检测步骤4.1 称取混合均匀的样品10g（精确到0.01g）于锥形瓶中。4.2 加入20ml新煮沸冷却至20水，混匀。4.3 将样品放在磁力搅拌器上，设定终点pH为8.3，开始滴定，记录所消耗的氢氧化钠的体积，整个滴定过程在1min内完成，

36、或向样品中滴加2-3滴酚酞指示剂，用滴定管滴定至溶液呈微红色，并在30S内不褪色，记录所用氢氧化钠溶液的毫升数。5.计算方法 X-样品的酸度，。T。C-氢氧化钠标准溶液的浓度，mol/L。V-滴定时所用氢氧化钠的毫升数，ml。m-样品质量，g。0.1-酸度理论定义氢氧化钠的摩尔浓度，mol/L。以重复条件下获得两次独立测定结果的算数平均值表示，结果保留三位有效数字。在重复条件下获得两次独立测定结果的绝对差值不得超过1。T。6.备注 本方法参考国标GB5413.34-2010。§5乳与乳制品中水分的测定1.原理利用食品中水分的物理性质，在101.3 kPa（一个大气压），温度101 1

37、05 下采用挥发方法测定样品中干燥减失的重量，包括吸湿水、部分结晶水和该条件下能挥发的物质，再通过干燥前后的称量数值计算出水分的含量。2.试剂和材料2.1盐酸：优级纯。2.2氢氧化钠（NaOH）：优级纯。2.3盐酸溶液（6 mol/L）：量取50 mL盐酸，加水稀释至100 mL。2.4氢氧化钠溶液（6mol/L）：称取24 g氢氧化钠，加水溶解并稀释至100 mL。2.5海砂：取用水洗去泥土的海砂或河砂，先用盐酸（3.3）煮沸0.5 h，用水洗至中性，再用氢氧化钠溶液（3.4）煮沸0.5 h，用水洗至中性，经105 干燥备用。3.仪器和设备3.1扁形铝制或玻璃制称量瓶。3.2电热恒温干燥箱。

38、3.3干燥器：内附有效干燥剂。3.4天平：感量为0.1 mg。4.分析步骤4.1固体试样取洁净铝制或玻璃制的扁形称量瓶，置于101 105 干燥箱中，瓶盖斜支于瓶边，加热1.0 h，取出盖好，置干燥器内冷却0.5 h，称量，并重复干燥至前后两次质量差不超过2 mg，即为恒重。迅速称取2 g5 g混合均匀的试样（精确至0.0001 g）放入此称量瓶中，试样厚度不超过5 mm，如为疏松试样，厚度不超过10 mm，加盖，精密称量后，置101 105 干燥箱中，瓶盖斜支于瓶边，干燥2h3 h后，盖好取出，放入干燥器内冷却0.5 h后称量。然后再放入101 105 干燥箱中干燥1 h左右，取出，放入干燥

39、器内冷却0.5 h后再称量。并重复以上操作至前后两次质量差不超过2 mg，即为恒重。两次恒重值在最后计算中，取最后一次的称量值。4.2半固体或液体试样取洁净的称量瓶，内加10 g海砂及一根小玻棒，置于101 105 干燥箱中，干燥1.0 h后取出，放入干燥器内冷却0.5 h后称量，并重复干燥至恒重。然后称取5 g10 g试样（精确至0.0001 g），置于蒸发皿中，用小玻棒搅匀放在沸水浴上蒸干，并随时搅拌，擦去皿底的水滴，置101 105 干燥箱中干燥4 h后盖好取出，放入干燥器内冷却0.5 h后称量。以下按4.1自“然后再放入101 105 干燥箱中干燥1 h左右”起依法操作。5.结果计算

40、X 试样中水分的含量，单位为克每百克（g/100g)。m1 称量瓶(加海砂、玻棒)和试样的质量，单位为克（g）。m2 称量瓶(加海砂、玻棒)和试样干燥后的质量，单位为克（g）。m3 称量瓶(加海砂、玻棒)的质量，单位为克（g）。水分含量1 g/100 g时，计算结果保留三位有效数字；水分含量1 g/100g时，结果保留两位有效数字。6.备注本方法参考国标GB5009.3-2010。§6乳与乳制品中灰分的测定1.原理食品经灼烧后所残留的无机物质称为灰分。灰分数值系用灼烧、称重后计算得出。2.仪器和设备2.1 马弗炉：温度600 。2.2 天平：感量为 0.1 mg。2.3 石英坩锅或瓷

41、坩埚。2.4 干燥器（内有干燥剂）。2.5 可调控电炉。2.6 水浴锅。3.分析步骤3.1 坩埚的灼烧取大小适宜的石英坩埚或瓷坩埚置马弗炉中，在 550 ±25 下灼烧 0.5 h，冷却至200 左右，取出，放入干燥器中冷却 30 min,准确称量。重复灼烧至前后两次称量相差不超过 0.5 mg为恒重。3.2 称样灰分大于 10 g/100 g 的试样称取 2 g3 g（精确至 0.0001 g）；灰分小于 10 g/100 g 的试样称取 3 g10 g（精确至 0.0001 g）。3.3 测定液体和半固体试样应先在沸水浴上蒸干。固体或蒸干后的试样，先在电热板上以小火加热使试样充分

42、炭化至无烟，然后置于马弗炉中，在 550 ±25 灼烧 4 h。冷却至 200 左右，取出，放入干燥器中冷却 30 min，称量前如发现灼烧残渣有炭粒时，应向试样中滴入少许水湿润，使结块松散，蒸干水分再次灼烧至无炭粒即表示灰化完全，方可称量。重复灼烧至前后两次称量相差不超过 0.5 mg 为恒重。 4.结果计算 X试样中灰分的含量，单位为克每百克（g/100 g）；m1坩埚和灰分的质量，单位为克（g）；m2坩埚的质量，单位为克（g）；m3坩埚和试样的质量，单位为克（g）。试样中灰分含量10 g/100 g 时，保留三位有效数字；试样中灰分含量10 g/100 g 时，保留二位有效数字

43、。5.备注本方法参考国标GB5009.4-2010。§7乳与乳制品蛋白质的测定1.原理 食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质的含量。2.试剂和材料2.1 硫酸铜（CuSO45H2O）。2.2 硫酸钾（K2SO4）。2.3 硫酸（H2SO4 密度为 1.84g/L）。2.4 硼酸（H3BO3）。2.5 甲基红指示剂（C15H15N3O2）。2.6 溴甲酚绿指示剂（C21H14Br4O5S）。2.7 亚甲基蓝指示剂（C16H18ClN3S3H2O）。2.8 氢

44、氧化钠（NaOH）。2.9 95%乙醇（C2H5OH）。2.10 硼酸溶液（20 g/L）：称取 30 g 硼酸，加水溶解后并稀释至 1000 mL。 2.11 氢氧化钠溶液（400 g/L）：称取 40 g 氢氧化钠加水溶解后，放冷，并稀释至 100 mL。2.12 硫酸标准滴定溶液（0.0500 mol/L）或盐酸标准滴定溶液（0.0500 mol/L）。2.13 甲基红乙醇溶液（1 g/L）：称取 0.1g 甲基红，溶于 95%乙醇，用 95%乙醇稀释至 100 mL。2.14 亚甲基蓝乙醇溶液（1 g/L）：称取 0.1g 亚甲基蓝，溶于 95%乙醇，用 95%乙醇稀释至 100 mL

45、。2.15 溴甲酚绿乙醇溶液（1 g/L）：称取 0.1g 溴甲酚绿，溶于 95%乙醇，用 95%乙醇稀释至 100 mL。2.16 混合指示液：2 份甲基红乙醇溶液与 1 份亚甲基蓝乙醇溶液临用时混合。也可用1份甲基红乙醇溶液与 5 份溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。3.仪器和设备3.1 天平：感量为 1mg。3.2 定氮蒸馏装置。3.3 自动凯氏定氮仪。4.分析步骤4.1凯氏定氮法4.1.1试样处理4.1.1.1液体样品称取液体样品5g于凯氏定氮瓶中，精确至 0.001 g，加入 1 g 硫酸铜、8 g 硫酸钾及 15 mL 硫酸，轻摇后于瓶口放一小漏斗，将瓶以 45°角斜支于有小孔

46、的石棉网上。小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色并澄清透明后，再继续加热 0.5 h1 h。取下放冷，小心加入220 mL 水，60ml氢氧化钠溶液。4.1.1.2固体样品称取液体样品0.5g于凯氏定氮瓶中，精确至 0.001 g，加入 1 g 硫酸铜、10 g 硫酸钾及 20 mL 硫酸，轻摇后于瓶口放一小漏斗，将瓶以 45°角斜支于有小孔的石棉网上。小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色并澄清透明后，再继续加热 0.5 h1 h。取下放冷，小心加入220 mL 水，80ml氢氧化

47、钠溶液。4.1.2测定组装好定氮蒸馏装置。向接收瓶内加入 10.0 mL 硼酸溶液及 1 滴2 滴混合指示液,并使冷凝管的下端插入液面下，开始蒸馏。蒸馏 10 min 后移动蒸馏液接收瓶，液面离开冷凝管下端，再蒸馏 1 min。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部，取下蒸馏液接收瓶。以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定至终点，其中 2 份甲基红乙醇溶液与 1 份亚甲基蓝乙醇溶液指示剂，颜色由紫红色变成灰色，pH 5.4；1 份甲甲基红乙醇溶液与 5 份溴甲酚绿乙醇溶液指示剂，颜色由酒红色变成绿色，pH 5.1。同时作试剂空白。 4.2 自动凯氏定氮仪法4.2.1试样处理4.2.1.1液体样品称取液体样品5g

48、于凯氏定氮瓶中，精确至 0.001 g，加入 1 g 硫酸铜、8 g 硫酸钾及 15 mL 硫酸，轻摇后于瓶口放一小漏斗，将瓶以 45°角斜支于有小孔的石棉网上。小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色并澄清透明后，再继续加热 0.5 h1 h。取下放冷，小心加入10mL 水，60-70ml氢氧化钠溶液。4.2.1.2固体样品称取液体样品0.5g于凯氏定氮瓶中，精确至 0.001 g，加入 1 g 硫酸铜、10 g 硫酸钾及 20 mL 硫酸，轻摇后于瓶口放一小漏斗，将瓶以 45°角斜支于有小孔的石棉网上。小心加热，待内容物全

49、部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色并澄清透明后，再继续加热 0.5 h1 h。取下放冷，小心加入10mL 水，60-70ml氢氧化钠溶液。4.1.2 测定按照自动凯氏定氮的说明书进行操作。5.分析结果的表述 X试样中蛋白质的含量，单位为克每百克（g/100 g）；V1试液消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积，单位为毫升（mL）；V2试剂空白消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积，单位为毫升（mL）；V3吸取消化液的体积，单位为毫升（mL）；C硫酸或盐酸标准滴定溶液浓度，单位为摩尔每升（mol/L）；0.01401.0 mL 硫酸c (1/2H2SO4)1.000 mol/L

50、或盐酸c (HCl) 1.000 mol/L标准滴定溶液相当的氮的质量，单位为克（g）；m试样的质量，单位为克（g）；F氮换算为蛋白质的系数。一般食物为 6.25；纯乳与纯乳制品为 6.38；面粉为 5.70；玉米、高梁为 6.24；花生为 5.46；大米为 5.95；大豆及其粗加工制品为 5.71；大豆蛋白制品为 6.25；肉与肉制品为 6.25；大麦、小米、燕麦、裸麦为 5.83；芝麻、向日葵为 5.30；复合配方食品为 6.25。以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，蛋白质含量1 g/100 g 时，结果保留三位有效数字；蛋白质含量1 g/100 g 时，结果保留两位有效

51、数字。6.备注本方法参考国标GB5009.5。§8乳与乳制品脂肪的测定一.乳粉脂肪的测定1.原理用乙醚与石油醚抽提样品的碱水解液，通过蒸馏或蒸发去除溶剂，测定溶于溶剂中抽提物的质量。2.试剂与材料2.1 氨水：质量分数约25%。2.2 乙醇：体积分数至少为95%。2.3乙醚：不含过氧化物，不含抗氧化剂。2.4石油醚：沸程30-60。2.5混合溶剂：等体积混合乙醚与石油醚，实用前现配。2.6刚果红溶液：将1g刚果红溶于水中，稀释至100ml。2.7盐酸（6mol/L）：量取10ml盐酸缓慢倒入40ml水中，定容至100ml，混匀。3.仪器设备3.1分析天平：感量为0.1mg。3.2离心

52、机：500-600s/min。3.3烘箱。3.4水浴锅。3.5抽脂瓶：软木塞应先浸入乙醚中，后放入60左右水中保持至少15min，冷却后使用，不用时需浸泡在水中。4.检测步骤4.1样品的制备 按表1称取一定量的混合均匀的样品于抽脂瓶中，具体操作如下：4.1.1乳粉类称取一定量样品后，用10ml65左右的水洗入抽脂瓶中，充分混匀，直到试样完全分散，放入流动水中冷却。4.1.2液体乳直接称取10g于抽脂瓶中。4.1.3炼乳用10ml蒸馏水分次洗入抽脂瓶中。4.1.4先将奶油，稀奶油放入温水浴中溶解并混合均匀，称取一定量于抽脂瓶中，加入8-10ml45的蒸馏水，加2ml氨水充分混匀。表1:不同样品称

53、样量表样品名称样品状态称取质量/g（精确至0.1mg）巴氏杀菌乳，灭菌乳液体10生乳，发酵乳，调制乳液体10高脂乳粉，全脂乳粉固体1全脂粉，乳基婴幼儿食品固体1脱脂乳粉，乳清粉，酪乳粉固体1.5脱脂炼乳，全脂炼乳固体3-5高脂炼乳固体1.5奶油液体0.5 稀奶油液体1干酪固体24.2脂肪的抽提4.2.1加入2ml氨水，充分混合后立即将抽脂瓶放入65左右的水浴中，加热15-20min，不时取出振荡，冷却至室温后静止30s。加入10ml乙醇，缓和但彻底的混匀后。4.2.2加入25ml的乙醚，塞上瓶塞，将抽脂瓶瓶口朝上的放入混合器上，100次/min振荡1min。4.2.3抽脂瓶冷却后小心的打开塞子

54、，用少量的混合溶剂冲洗塞子与瓶颈，使冲洗液流入抽脂瓶，向其中加入25ml石油醚，塞上塞子，100次/min振荡30s。4.2.4将抽脂瓶放入离心机中，500-600s/min离心5min。否则静止至少30min，直到上层液澄清，并明显与水相分离。4.2.5打开瓶塞，用少量混合溶剂冲洗瓶塞，使冲洗液流入抽脂瓶中，如果两相界面低于小球与瓶身相接处，则沿瓶壁边缘慢慢加入水，使液面高于小球与瓶身相接处，以便于倾倒。4.2.6将上层液尽可能的倒入已准备好的脂肪收集瓶中，避免倒出水层。用少量混合溶剂冲洗瓶颈外部，冲洗液收集在脂肪收集瓶中。4.2.7向抽脂瓶中加入5min，用乙醇冲洗瓶颈内壁。重复4.2.2

55、-4.2.6，进行第二次与第三次抽屉，所用乙醚与石油醚均为15ml。4.3有机物的去除4.3.1合并所有提取液，用少量混合溶剂冲洗收集瓶内壁，可采用（减压）蒸馏方法除去脂肪收集瓶中的溶剂，也可在沸水浴上蒸发至干来除掉溶剂。4.3.2将脂肪收集瓶放入102左右的烘箱中加热1h，取出脂肪收集瓶冷却至室温，称量，精确至0.1mg，再将脂肪收集瓶放入102左右的烘箱中加热1h，冷却至室温，称量若前后质量差值不超过0.5mg时，记录脂肪收集瓶的最低质量。4.3.3含抽提物的脂肪收集瓶与空瓶子的差值，即为脂肪的质量。4.3.4为验证抽提物是否全部为脂肪，可向收集瓶中加入25ml，的石油醚，若全部溶解，即为

56、全部脂肪，若未全部溶解，可用热的石油醚进行洗提，小心倒出石油醚，不要倒出不溶物，重复三次，收集所有石油醚，重复4.3.1-4.3.2，记录最终脂肪收集瓶的质量，其与空收集瓶的质量差即为脂肪的含量。4.4空白实验进行空白实验时在脂肪收集瓶中放入1g无水奶油。必要时，于每100ml溶剂中加入1g无水奶油后重新蒸馏。5.计算方法X-脂肪含量，单位为g/100g。m-样品的质量，g。m1-脂肪收集瓶与抽提物的总质量。m2-脂肪收集瓶的质量。m3-空白实验中脂肪收集瓶与抽提物的总质量。m4-空白实验中，脂肪收集瓶的质量。以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算数平均值表示，结果保留三位有效数字。6.备注

57、本方法参考国标GB5413.3-2010。二盖勃氏乳汁计法1.说明本方法只适用于鲜乳，液体乳。2.原理 在乳中加入浓硫酸破坏乳胶质性和覆盖在脂肪球上的蛋白外膜，使其变性离心分离脂肪后测量其体积，即可得脂肪的含量。3.试剂与材料3.1 浓硫酸：分析纯。3.2 异戊醇：分析醇。4.仪器与设备4.1 乳脂离心机。4.2 盖勃氏乳汁计：最小刻度值为0.1%。4.3 10.75ml单标乳吸管。5.检测步骤先于盖勃氏乳汁计中加入10ml硫酸，再沿着管壁小心准确加入10.75ml样品，使样品与硫酸不要混合，然后加1ml异戊醇，塞上橡皮塞，使瓶口向下，同时用布包裹以防冲出，用力振摇使呈均匀棕色液体，1100s

58、/min离心5min，再置于65-70摄氏度水浴中保温5min,取出，立即读数，即为脂肪的百分数。6备注本方法参考国标GB5413.3-2010。§9乳品中乳糖、蔗糖的测定1.原理 乳糖：试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝为指示剂，直接滴定已标定过的费林氏液，根据样液消耗的体积，计算乳糖含量。 蔗糖：试样经除去蛋白质后，其中蔗糖经盐酸水解为还原糖，再按还原糖测定。水解前后的差值乘以相应的系数即为蔗糖含量。2.试剂和材料2.1 乙酸铅。2.2 草酸钾。2.3 磷酸氢二钠。2.4 盐酸。2.5 硫酸铜。2.6 浓硫酸。2.7 酒石酸钾钠。2.8 氢氧化钠。2.9 酚酞。2.10

59、 乙醇。2.11 次甲基蓝。2.12乙酸铅溶液（200 g/L）：称取 200 g 乙酸铅，溶于水并稀释至 1000 mL。2.13草酸钾磷酸氢二钠溶液:称取草酸钾 30 g，磷酸氢二钠 70 g，溶于水并稀释至 1000 mL。2.14 盐酸（1+1）：1 体积盐酸与 1 体积的水混合。2.15 氢氧化钠溶液（300 g/L）：称取 300 g 氢氧化钠，溶于水并稀释至 1000 mL。2.16 费林氏液（甲液和乙液）2.16.1甲液：称取 34.639 g 硫酸铜，溶于水中，加入 0.5 mL 浓硫酸，加水至 500 mL。 2.16.2乙液:称取 173 g 酒石酸钾钠及 50 g 氢氧

60、化钠溶解于水中,稀释至500 mL,静置两天后过滤。2.17酚酞溶液（5 g/L）：称取 0.5 g 酚酞溶于 100 mL 体积分数为 95 %的乙 醇中。 2.18次甲基蓝溶液（10 g/L）：称取 1 g 次甲基蓝于 100 mL 水中。3.仪器和设备3.1 天平：感量为 0.1 mg。3.2 水浴锅：温度可控制在 75 ±2 。4.分析步骤4.1 费林氏液的标定4.1.1 用乳糖标定4.1.1.1 称取预先在 94 ±2 烘箱中干燥 2 h 的乳糖标样约 0.75 g（精确到 0.1 mg），用水溶解并定容至 250 mL。将此乳糖溶液注入一个 50 mL 滴定管中

61、，待滴定。4.1.1.2 预滴定：吸取 10 mL 费林氏液(甲、乙液各 5 mL)于 250 mL 三角烧瓶中。加入 20 mL 蒸馏从滴定管中放出 15 mL 样液于三角瓶中，使其在 2 min 内沸腾，水，放入几粒玻璃珠，置于电炉上加热，保持沸腾状态 15 s，加入 3 滴次甲基蓝溶液，继续滴入至溶液蓝色完全褪尽为止，读取所用样液的体积。4.1.1.3 精确滴定：另取 10 mL 费林氏液（甲，乙液各 5 mL）于250 mL 三角烧瓶中， 再加入 20 mL蒸馏水，放入几粒玻璃珠，加入比预滴定量少 0.5 mL1.0 mL 的样液，置于电炉上，使其在 2 min 内沸腾，维持沸腾状态

62、2 min，加入 3 滴次甲基蓝溶液，以每两秒一滴的速度徐徐滴入，溶液蓝色完全褪尽即为终点，记录消耗的体积。4.1.1.4 按式（1）、（2）计算费林氏液的乳糖校正值（f1）： (1) (2) A1实测乳糖数，单位为毫克（mg）； V1滴定时消耗乳糖溶液的体积，单位为毫升（mL）；M1称取乳糖的质量，单位为克（g）； f1费林氏液的乳糖校正值；AL1由乳糖液滴定毫升数查表 1 所得的乳糖数，单位为毫克（mg）。表1: 乳糖及转化糖因数表（10 mL 费林氏液）滴定量（ml）乳糖（mg）转化糖（mg）滴定量（ml）乳糖（mg）转化糖（mg）1568.350.53367.851.71668.250

63、.63467.951.71768.250.73567.951.81868.150.83667.951.81968.050.83767.951.92068.050.93867.951.9268.051.03967.952.02267.951.04067.952.02367.951.14168.052.12467.951.24268.052.12567.951.24368.052.22667.851.34468.052.22767.851.44568.152.32867.851.44668.252.32967.851.54768.252.43067.851.54868.252.43167.851.

64、64968.252.53267.851.65068.352.5注：“因数”系指与滴定量相对应的数目，可自表 1 中查得。若蔗糖含量与乳糖含量的比超过 3: 1 时，则在滴定量中加表 2 中的校正值后计算。表2 乳糖滴定量校正值数滴定终点时所用的糖液量（ml）用10ml 费林氏液、蔗糖及乳糖量的比3:16:1150.150.30200.250.50250.300.60300.350.70350.400.80400.450.90450.500.95500.551,054.1.2 用蔗糖标定4.1.2.1 称取在 105 ±2 烘箱中干燥 2 h 的蔗糖约 0.2 g（精确到 0.1mg）

65、，用 50 mL 水溶解并洗入 100 mL 容量瓶中，加水 10 mL，再加入 10 mL 盐酸（10.14），置于 75 水浴锅中，时时摇动，使溶液温度在 67.0 69.5 ，保温 5 min，冷却后，加 2 滴酚酞溶液，用氢氧化钠溶液调至微粉色，用水定容至刻度。再按 4.1.1.2 和 4.1.1.3 操作。4.1.2.2 按式（3）、（4）计算费林氏液的蔗糖校正值（f2）： (3) (4) A2实测转化糖数，单位为毫克（mg）； V2滴定时消耗蔗糖溶液的体积，单位为毫升（mL）； m2称取蔗糖的质量，单位为克（g）； 0.95果糖分子量和葡萄糖分子量之和与蔗糖分子量的比值； f2费林

66、氏液的蔗糖校正值； AL2由蔗糖溶液滴定的毫升数查表 1 所得的转化糖数，单位为毫克（mg）。4.2 乳糖的测定4.2.1 试样处理4.2.1.1 称取婴儿食品或脱脂粉 2 g，全脂加糖粉或全脂粉 2.5 g，乳清粉 1 g，精确到 0.1 mg，用 100mL 水分数次溶解并洗入 250 mL 容量瓶中。4.2.1.2 徐徐加入 4 mL 乙酸铅溶液（10.12）、4 mL 草酸钾磷酸氢二钠溶液，并振荡容量瓶，用水稀释至刻度。静置数分钟，用干燥滤纸过滤，弃去最初 25 mL 滤液后，所得滤液作滴定用。4.2.2 滴定4.2.2.1 预滴定：操作同 12.1.1.2。4.2.2.2 精确滴定：操作同 12.1.1.3。4.3 蔗糖的测定4.3.1 样液的转化与滴定取 50 mL 样液于 100 mL 容量瓶中，以下按 4.1.2.1 自“加 10 mL 水”起依法操作。5.分析结果的表述5.1 乳糖 试样中乳糖