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文档简介

1、大网格吸附树脂的吸附等温线的制作一、实验目的和要求1. 通过实验,加深对人网格树脂吸附机理的理解;2. 了解吸附等温线的制作过程和操作方法。二、实验原理人网格树脂吸附法是利用树脂表面分子(包括树脂外表面和空隙的内 表面)与生化物质分子间的范德华力作用,将液体中的生化物质吸附到树 脂表而,与大景杂质分离,然后再用适当的溶剂将其洗脱t来。大网格聚 合物吸附树脂是一种应用广泛的吸附剂,它与大网格离子交换树脂的主要 区别在于其内部结构没有可与被交换的离子基团,因此,是利用分子间作 用力进行吸附。吸附等温线是表征不同物质吸附的特征曲线,表明在一定温度卜树 脂吸附t衡时的吸附量与溶质浓度之间的函数关系,常

2、用langmui方程和 freundlich方程来描述,前者是建立在单分子吸附层的基础上的,后者是经 验式。木实验采用freimdlich方程式,它对木实验树脂的吸附行为具有更 好的吻合性。freundlich方程式如下:丄(2101)(2102)m=kpn等式两边取对数,得到下式:lgm=lg/c+-lgpn式中:m吸附平衡时固和吸附量(mg/g树脂)p吸附平衡时液相质量浓度(mg/ml)k和n常数由式(2102)可见,lgm与lg/9为线性关系,可由实验求出。木实验以木瓜蛋白酶为实验对象,采用hz802非极性大网格树脂为吸 附剂,在25°c温度下,制作吸附等温线。三、实验器材与试

3、剂器材水浴恒温振荡器,分光光度计,精密电子天平,25ml具塞试管,15ml 试管、比色皿,真空泵,移液枪,烧杯,漏斗,滤纸等。(二)试剂大网格吸附树脂,木瓜蛋g酶,95%乙醇,蒸馏水。四、操作方法(-)吸附等温线的制作1. 吸附树脂的预处理新树脂孔内还宥合成树脂时残留的致孔剂等杂质,故应预处理除去。 用95%乙醇丁烧杯屮浸泡树脂,倾去上浮的杂质,反复多次,直到倾 出的液体与蒸馏水混合不产生g色浑浊(澄清)为止。再用蒸馏水洗至 倾出液无乙醇味即可,最后用真空抽滤,成为抽干树脂。2. 配木瓜蛋白酶称取木瓜蛋白酶lg,溶于50ml蒸饱水,配成约20mg/ml的浴液。3. 精确吸取上述溶液0.5、1.

4、0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml于7只具塞试管 中,加入蒸馏水,均稀释至10ml,配成1、2、4、6、8、10、12mg/ml 的溶液。4. 称取7份抽干吸附树脂各0.5g,小心倒入上述7只具塞试管中,盖上瓶盖, 置于25°c恒温摇床6h左右。5. 达到吸附平衡盾取出,滤纸过滤液体到试管中,除去溶液中的树脂,测定 木瓜蛋白酶液相y衡的a值,带入标准曲线求出对应的浓度。6. 用以下求平衡吋树脂上的吸附量m (mg/g树脂):(zva) xvm0式中:po和/分别为溶液初始质量浓度和平衡质量浓度(mg/ml)v溶液体积(ml)m0树脂质量(g)以液相的t衡质景浓度(mg/m

5、l)为横坐标,树脂的平衡吸附量(mg/g 树脂)为纵坐标,作25°c时的吸附等温线曲线图。(二)制作木瓜蛋白酶浓度标准曲线1. 精确称取木瓜蛋白酶20mg与烧杯屮,加入10ml蒸榴水,配制成2.0mg/ml 的标准溶液2. 吸取上述标准溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml于试管中,分别用蒸榴 水稀释至5ml,然后用石英比色皿,在280nm分光光度计下测吸光值a。 作线性回归,求线性方程和相关系数r。【注意事项】1. 用分光光度计测量木瓜蛋白酶时,应用也英比色m. (280nn<k玻璃比色皿冇吸 光值)。2. 木瓜蛋白酶用完后记得放回4°c冰箱。3.

6、实验数据吋用excel软件分析。【实验准备】仪器数量试剂带塞25ml试管8支木瓜蛋白酶普通10ml试管8支蒸馏水漏斗1个95%乙醇滤纸若干1ml移液枪(及枪头)1支20 ml移液枪(及枪头)1支小烧杯(100ml或50ml)1个石英比色皿2个hz802大网格吸附树脂10g布氏漏斗真空抽滤机分光光度计恒温摇床五、实验结果及分析1、实验结果木瓜蛋白酶标准曲线的制作浓度(mg/ml)a值0.080. 0370. 160. 0680.240.0100. 320. 1350.400. 1700.480. 201木瓜蛋白酶标准曲线y = 0. 4179x + 0.0013r2 = 0. 99960.25

7、-翅釤自0002实验结果八值液相平衡浓度(mg/ml)初始浓度(mg/ml)树脂吸附量0.2130.50658052219.8683895670.5781.379995214212.400095721. 1942.854032065422.91935871.8014.306532663633.869346731.9654.698971046866.020579092.6156.2543670731074.912658532.8686.85977506612102.8044987液相平衡质量浓度(mg/ml)(些 m<?g)mw§«7kgjn:bmlg plg m-0.2953515130. 9942462850.139877581.0934250380.4554588481.3602024620.6341277451. 529806820.6720027691. 8196793290.7961833671.874555210.8363098

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