离子色谱定性定量分析PPT课件

1、实验目的：了解离子交换色谱的原理以及离子色谱仪的构造；学习离子色谱仪的基本操作；掌握利用离子色谱仪进行定量分析的方法。第1页/共45页离子色谱的相关介绍（五个方面）实验内容第2页/共45页一.离子色谱简介第3页/共45页定定义义 (主要分离非极性的有机化合物主要分离非极性的有机化合物) 阴离子：，阴离子：，2， 阳离子：，阳离子：， 有机化合物：有机酸、有机碱等有机化合物：有机酸、有机碱等第4页/共45页离子色谱分析的对象物质离子类别 主要离子种类无机阴离子 卤素及简单阴离子、酸根阴离子、阳离子的配阴离子无机阳离子 碱金属、铵离子、碱土金属、过渡金属、稀土元素有机阴离子 有机酸、烷基硫酸、烷基

2、磺酸、磷酸、多聚磷酸有机阳离子 胺、醇胺、铵盐、吡啶、生物碱、锍盐天然有机物 糖、醇、酚、醛、维生素生物物质 有机磷化合物、氨基酸、肽、核酸、核甙酸、蛋白 质、 碱基、抗生素第5页/共45页 ： 离子价态和离子半径离子交换色谱（离子交换色谱（HPLC）基于流动相和固定相基于流动相和固定相上的离子交换基团之间发生的离子交换过程。上的离子交换基团之间发生的离子交换过程。u离子排斥离子排斥离子排斥色谱（Donnan排斥、空间排阻和吸附）u离子离子对对 离子对色谱（吸附）其他分离方式：离子抑制、反相离子色谱的分离方式第6页/共45页 检测具有电导性化合物的通用型检测器 离子色谱最常用的检测器w电化学(

3、安培法) 在特定的条件下可对某些化合物直接进行氧化还原反应w 紫外可见光度法 紫外直接吸收或可见光光度法测定选择性强 可进行柱后衍生w 荧光法 HPLC第7页/共45页二、离子色谱仪结构介绍第8页/共45页第9页/共45页ICS2000内部结构图第10页/共45页ICS-2000流路图第11页/共45页 第12页/共45页 废废液液样样品品 淋洗液淋洗液 至分离柱至分离柱进样阀进样阀 样样品品 废废液液 淋洗液淋洗液至分离柱至分离柱 （）（）（）（） 样样品品环环第13页/共45页w 安装在安装在电导电导池之前池之前w 提高待提高待测测离子的离子的电导电导率率： ： 提高灵敏度提高灵敏度Na+

4、, Cl- H+, Cl-w 降低背景降低背景电导电导 (淋洗液淋洗液) : 减少噪音减少噪音Na+, HCO3- H2CO3Na+,OH-H2O第14页/共45页废液Back Ground： Na2CO3 / NaHCO3(700S)NaF,NaCl,NaNO3Na2HPO4,Na2SO4Retention timeConductivityNaFNaClNaNO3Na2HPO4Na2SO4Back Ground： Na2CO3 / NaHCO3(700S)Retention timeConductivityHFHClHNO3H3PO4H2SO4Retention timeBack Groun

5、d： H2CO3 (15S)Conductivity第15页/共45页w 测测定溶液流定溶液流过电导过电导池池电电极极时时的的电导电导率率w 可可检测检测大部分离子型化合物大部分离子型化合物溶液溶液至检测池电电极极 检测池第16页/共45页三、离子交换色谱分离机理 色谱分离 离子交换分离机理 抑制器工作原理第17页/共45页慢慢中等中等快快临时性过程淋洗液淋洗液第18页/共45页 临时过程 第19页/共45页: : 样品中的阴离子: : 样品中的阳离子H2O第20页/共45页H2O: : 样品中的阴离子: : 样品中的阳离子第21页/共45页四、 离子色谱分析条件的选择1.影响保留时间的参数：

6、离子的性质2.流动相的选择3.检测条件的选择第22页/共45页一、影响保留的参数：离子的性质 价态（Valency） 尺寸（Size） 极化程度（Polarisability）第23页/共45页参数（1）：价态 待测离子的价态越高，保留越强； 例子：tms(NO3-) tms(SO42-) 例外：多价离子的保留如正磷酸盐与淋洗剂的pH有关第24页/共45页参数（2）：离子半径 离子半径越大，保留越强； 保留时间tms : F Cl Br I第25页/共45页参数（3）：极化程度 极化程度越强，保留时间越强tms (硫酸根) tms (硫代硫酸根) 原因：离子交换吸附第26页/共45页二、流动相

7、的选择 淋洗离子的种类和浓度 淋洗液的pH值 有机改进剂 温度第27页/共45页淋洗液选择的条件 有一定的洗脱能力； 化学、物理性质稳定； 与被测离子有一定的性质差异，电导检测为电导差异；抑制电导检测为抑制后电导的差异；紫外检测为紫外吸收的差异；安培检测为氧化还原能力的差异 对检测器响应值尽可能小 如果被测物对检测器没有响应，则可以采用间接检测法第28页/共45页抑制型阴离子色谱的典型淋洗液l四硼酸钠 (Na2B4O7)l硼酸 (H3BO3)l氢氧根 (NaOH)l碳酸氢根 (NaHCO3) l碳酸根 (Na2CO3)通常，作为淋洗剂使用的化合物在水溶液中的pH大于8时为阴离子，pH在5-8之

8、间为中性分子，其阴离子对固定相亲合力.与待测离子相近，这类化合物可作阴离子分析的淋洗液。 第29页/共45页一般淋洗液的选择情况 价态越高，洗脱能力越强； 离子半径越大，洗脱能力越强； 电离越强，洗脱能力越强； 极化度越大，洗脱能力越强； 对常规淋洗液硼酸根氢氧根碳酸氢根碳酸根第30页/共45页淋洗液浓度对保留的影响 淋洗液浓度与保留值呈对数线性关系； 不同价态的被测离子，对数线性斜率不同； 不同极化度和亲脂性，淋洗液浓度对保留影响比较小。第31页/共45页 pH值对被保留的影响 pH值提高，氢氧根浓度增加，一般情况保留减小（与淋洗液浓度对保留值影响一致）； 对于弱酸、多元酸pH值提高，电离增

9、加，保留时间反而增加。第32页/共45页有机改进剂对保留的影响 缩短保留时间，对疏水性离子影响更大； 增加样品的溶解度； 改善疏水性和极化离子的色谱峰形； 清洗被污染的色谱柱第33页/共45页阳离子交换淋洗液的选择 淋洗液有足够的电离，以提供阳离子的脱离； 多价阳离子有更大的洗脱能力； 洗脱离子半径越大，洗脱能力越强； 与被测离子有足够大的电导差异；对抑制电导法，抑制后淋洗液背景电导足够小 淋洗液的背景较小较理想；酸或对应的弱碱 对于有机胺类，加入有机改进剂，会减少保留时间并且改善峰形第34页/共45页阳离子交换所用的淋洗液 盐酸 硝酸 硫酸 甲磺酸 吡啶2,6二羧酸第35页/共45页检测的条

10、件 电导检测直接电导要求淋洗液与被测离子电导有差异抑制电导要求被测离子对应的酸或碱有一定的电离 安培检测易氧化还原，在淋洗液还没有电解条件下，被测物施加电位下电解 紫外可见淋洗液与被测离子电导有光学差异，或通过柱后衍生达到这个差异 荧光检测与紫外可见的差异第36页/共45页抑制电导检测条件 抑制电导检测灵敏度和检测限取决于抑制器的好坏（而不是检测器）； 背景电导是影响检测灵敏度和检测限的最主要因素； 检测器恒温和温度补偿有利于提高灵敏度和检测限；第37页/共45页提高检测灵敏度的方法 增大进样量；但进样量的增加需要不影响分辨、水负峰不影响和基线不干扰 采用微孔型柱可以提高灵敏度内径缩小一半，同

11、样的进样量灵敏度增加4倍 提高柱效，缩短保留时间，可以灵敏度第38页/共45页五、离子色谱的应用第39页/共45页离子色谱的应用离子色谱的应用 应用领域 主 要 应 用 对 象 环境 大气成分（粉尘、颗粒物、雾、酸气）、酸雨、 水质分析、空气水质自动检测 食品 生鲜、果菜、酒、饮料、纯净水分析、酿造过程监控 农业 农药、肥料、土壤、饲料、粮食、植物分析 生物医学 血液、尿、输液成分、临床检查、人体微量元素分析 制药 植物药材、矿物药成分、制剂成分分析 材料 金属材料、半导体材料、表面处理、超纯水分析 工业 原料分析、产品质量控制、电解电镀液解析、造纸 化工 原料和产品分析、反应过程监控 日化

12、化妆品、洗涤剂、清洁剂、原料和产品成分分析第40页/共45页实验内容 标准溶液的配置 样品的准备（0.22um或0.45um滤膜） 仪器的操作练习及数据处理 实验报告的书写第41页/共45页 标准储备液(混标)的配置: 选择试剂、烘干、计算、称量、溶解定容、储存 标准溶液的配置： 根据需要稀释标准储备液，配置6-8个浓度梯度的标准溶液第42页/共45页 样品的准备： 0.22um或0.45um滤膜第43页/共45页仪器的操作练习开机步骤： 1 打开氮气总阀，将分压表调至 0.2Mpa。再调节淋洗液瓶上分压表的分压至 56psi。 2 接通 ICS2000主机电源，开启电脑，双击屏幕右下角，点击

13、“start”出现图标后，启动桌面的 图标，进入 Broswer 界面，找到“ICS2000_Tradition_System.pan”文件并双击进入变色龙软件的仪器控制界面。 3 在pump和detector模块中的connected前的方块中打上勾，使仪器与电脑处于联机状态。 4. 根据具体样品分别设置各模块（包括泵，淋洗液发生器，柱加热器及抑制器）参数，此时 SRS Mode设为Off。 5. 开启泵。 6. 待抑制器Regent Out处的管路中无气泡流出时将抑制器的SRS Mode设为On。 7. 等待仪器稳定，可点击控制面板上的“”按钮，采集基线，等待系统平衡。 分析步骤： 1 建立程序文件 program file， 参考软件说明书。 2 建立方法文件 method file，参考软件说明书。 3 建立序列文件，参考软件说明书。 4 启动序列文件：依次点击 Batch，start 开始样品分析： 5 数据处理，报告输出。 关机步骤： 1分析结束后先关闭SRS，即将S