茶多酚的提取

1、_茶多酚的提取、精制工艺及产品中茶多酚的定量分析【实验目的】1、了解茶多酚的性质及用途；2、了解植物天然产物常规提取和精制的方法；3、掌握茶多酚提取与精制的原理和方法；4、掌握茶多酚的分析检测方法。【实验材料和仪器】1、仪器电动搅拌器离心机酸度计真空干燥箱抽滤瓶真空蒸发浓缩装置水环式真空泵电子天平水浴锅紫外分光光度计电热恒温干燥箱分液漏斗微量吸管器2、试剂氯化钠碳酸氢钠柠檬酸硫酸铝盐酸亚硫酸氢钠乙酸乙酯维生素 C磷酸氢二钠磷酸二氢钾硫酸亚铁酒石酸钾钠硫酸没食子酸丙酯、工艺过程及操作方法【实验原理】茶多酚是茶叶中30 多种多酚类物质的总称，是一类富含于茶叶中、主要由表儿茶素、表没食子儿茶素及没食

2、子酸酯类等组成的多羟基化合物，含量约占茶精品资料_叶干物质总量的20 30。茶多酚分子中带有多个活性羟基(-OH) ，可终止人体中自由基链式反应，清除超氧离子，类似SOD 之功效。茶多酚对超氧阴离子与过氧化氢自由基的清除率达98以上，呈显著的量效关系，其效果优于维生素 E 和维生素 C。茶多酚还有抑菌、杀菌作用，能有效降低大肠对胆固醇的吸收，防治动脉粥样硬化，是艾滋病毒(人类免疫缺陷病毒， HIV) 逆转录酶的强抑制物，有增强机体免疫能力， 并具抗肿瘤、 抗辐射、抗氧化、防衰老机理。茶多酚安全、无毒，是食品、饮料、药品及化妆品的天然添加成分。目前茶多酚已在医药、饮料、食品、保健等行业中广泛应用

3、。由于茶多酚易溶于热水， 因此本实验首先用热水在一定温度下将茶多酚从茶叶中提取出来； 然后对茶叶浸提液盐析处理除去部分杂质；再利用某些金属离子与茶多酚形成的络合物在一定pH 值下溶解度最低的特性， 将茶多酚从浸提液中沉淀出来并高效地与咖啡碱等杂质分离；经过稀酸转溶将茶多酚游离出来后，用对茶多酚具有很好选择性的有机溶剂再次对其进行萃取分离；最后将茶多酚萃取液通过真空浓缩、真空干燥得到茶多酚精品。【实验步骤】1、浸提：称取一定重量过20 目的茶叶末，加入其重量20 倍的 70 95的热水，搅拌下恒温浸提60min ，过滤得茶叶浸提液。取样分析浸提液中茶多酚的含量，计算浸提液中茶多酚的总量、茶多酚的

4、浸提率。2、盐析：加氯化钠于茶叶浸提液中，使其质量分数为6 ，静置盐析 1.5h 后过精品资料_滤。3、沉淀：在上述滤液中加入茶叶重量2 5的 NaHSO 3 ，然后加入茶叶重量 20 的硫酸铝饱和水溶液，加热至 70 80 ，用 15%NaHCO 3 溶液在快速搅拌下调节 pH 至 56，此时有大量沉淀析出，沉淀自然沉降一段时间后过滤，最后用等体积 70 热水洗涤沉淀三次。4、酸溶：将沉淀在快速搅拌下放入到茶叶重量3 倍的 pH 2.54.5 的盐酸水溶液中溶解沉淀，控制酸转溶液的pH 2.54.5 ，酸溶时间 50min ，少量胶状沉淀经离心分离除去。 取样分析计算酸转溶液中茶多酚的含量和

5、总量，计算茶多酚经过盐析、沉淀及酸溶后的回收率。5、萃取：加入茶叶重量3的 NaHSO 3 至酸转溶液中，然后用其体积0.5 倍的乙酸乙酯萃取 3 次，每次萃取时间为10min ，合并萃取液。 取样分析计算萃余相中茶多酚的总量，计算茶多酚的萃取率。6、洗涤：加入茶叶重量2的维生素 C 至萃取液体积0.4 倍的水中，用柠檬酸调节水溶液的 pH 2.53.0 ，等分成二份对乙酸乙酯萃取液洗涤两次。7、蒸发浓缩：将洗涤后的乙酸乙酯相在50 70 下真空蒸发回收乙酸乙酯，待浓缩成膏状物时， 加入膏状物 2 倍体积的无水乙醇洗涤挂在壁上的物料，继续浓缩成稠的膏状物。8、干燥：将膏状物放入真空干燥箱中，

6、在 60 90 下进行真空干燥， 在前 12h 内，将物料搅动几次，当物料干燥成粉状或干的块状时，结束干燥。干燥时间一般 4 8h。9、包装保存：将干燥好的茶多酚产品转移至自封塑料袋中，称重、取样后立即密封，置入棕色玻璃干燥器中于低(室) 温下避光保存。产品取样用于分析产品精品资料_中茶多酚含量，计算出茶多酚的最终得率。、提取精制过程中及产品中茶多酚含量的分析检测方法（一）、提取精制过程中茶多酚含量的分析检测【实验原理】在一定 pH 值条件下，酒石酸铁能与多酚类物质反应形成蓝紫色络合物，该络合物在540nm波长下具有最大吸光度。 在适当的浓度范围内， 茶多酚的含量与络合物的吸光度成正比， 符合

7、朗伯比尔定律， 因此可用分光光度法对茶多酚定量分析。【实验材料及步骤】1、酒石酸亚铁溶液：称取 1g（准确至 0.0001g ）硫酸亚铁和 5g（准确至 0.0001g ）酒石酸钾钠，用水溶解并定容至1L（此液放置过夜后使用，可稳定1 星期）。2、pH 7.5 的磷酸盐缓冲液： a 液（ 1/15mol/L 的磷酸氢二钠溶液）：称取磷酸氢二钠 23.877g ，加水溶解并稀释至1L；b 液（1/15mol/L 的磷酸二氢钾溶液）：称取经 110 烘干 2h 的磷酸二氢钾 9.078g ，加水溶解并稀释至1L 。取 a 液 85mL 和 b 液 15mL 混匀，即得pH 7.5 磷酸盐缓冲溶液。3、供试液的制备与测定：准确吸取待测溶液1mL ，将其稀释 1 25 倍，再从稀释液中准确吸取1mL ，注入 25mL 的容量瓶中， 加水 4mL 和酒石酸亚铁溶液 5mL ，充分混合，再加 pH 7.5 的磷酸盐缓冲溶液至刻度， 用 1cm 比色杯，精品资料_在波长 540nm 处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度。【实验结果】待测溶液中茶多酚的含量用下式计算：茶多酚（ g/mL ） =1.957AX/500式中 1.957 用 1cm 比色杯，当吸光度等于0.50