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文档简介

1、实验名称:ABO血型鉴定实验人员:实验日期: 年 月 日室温:27C大气压:1个标准大气压(一)实验目的学习ABO型血的鉴定原理和方法。观察红细胞凝集现象,了解抗原抗体反应。(二)实验原理血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中,红细胞膜上抗原分 A和B两种抗原,而血清抗体分抗 A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加 抗B抗体,则产生凝集现象。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清(含有抗B抗体)与标准B型血清(含有抗 A抗体)中,观察有无凝集现象,从而测 知受试者红细胞膜上有无 A或/和B抗原。在ABO血型系统,根据红细胞膜上是否 含A、B抗原而分为A B、AB O四型

2、。(三)实验材料消毒采血针;载玻片;消毒棉签;抗 A、抗B血型定型试剂;75%乙醇;受检者血液(四)实验步骤(1) 取双凹玻片一块,用干净纱布轻拭使之洁净, 在玻片两端用腊笔标明 A及B, 并分别各滴入A及B标准血清一滴。(2) 细胞悬液制备从指尖或耳垂取血一滴,加入含1ml 生理盐水的小试管内,混 匀,即得约 5红细胞悬液。采血时应注意先用 75酒精消毒指尖或耳垂。( 3)用滴管吸取红细胞悬液,分别各滴一滴于玻片两端的血清上,注意勿使滴管与血清相接触(4)竹签两头分别混合,搅匀(5)1030min后观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮 起。先用肉眼看有无凝集现象,肉眼不易分

3、辨时,则在低倍显微镜下观察,如有 凝集反应,可见红细胞聚集成团。(6)判断血型根据被试者红细胞是否被 A,B型标准血清所凝集,判断其血型(五)实验结果:表1实验情况标准A血清标准B血清人血凝集情况不凝集凝集从上表可知:人血与标准 A血清(含抗B抗体)混合后不发生凝集;人血与标准 B 血清(含抗A抗体)混合后发生凝集。(六)讨论:血型通常是指红细胞膜上特异性抗原的类型。若将血型不相容的两个人的血液滴加在玻片上并使之混合,则红细胞可凝集成簇,这一现象称为红细胞凝集。在 补体的作用下,可引起凝集的红细胞破裂,发生溶血。当给人体输入血型不相容 的血液时,在血管内可发生红细胞凝集和溶血反应,甚至危及生命

4、。红细胞凝集 的本质是抗原-抗体反应。红细胞膜上抗原的特异性取决于抗原决定簇,这些抗原 在凝集反应中被称为凝集原。能与红细胞膜上的凝集原起反应的特异抗体则称为 凝集素。凝集素为丫 -球蛋白,存在于血浆中。发生抗原 -抗体反应时,由于每个 抗体上具有210个抗原结合位点,因此抗体可在若干个带有相应抗原的红细胞 之间形成桥梁,使它们聚集成簇,从而发生凝血。根据红细胞膜上是否存在A抗原和B抗原可将血液分为四种 ABO血型:红细胞膜上只含有 A抗原者为A型;只 含B抗原者为B型;含有A与B两种抗原者为AB型;A和B两种抗原均无者为 0 型。不同血型的人的血清中含有不同的抗体,但不会含有与自身红细胞抗原

5、相对 应的抗体。在A型血的血清中,只含有抗B抗体;B型血的血清中只含有抗 A抗体; AB型血的血清中没有抗 A和抗B抗体;而0型血的血清中则含有抗 A和抗B两种 抗体。表2 ABO血型中的抗原和抗体血型红细胞膜上所含的抗原血清中所含的抗体0无A也无B抗A和抗BAA抗BBB抗AABA和B无抗A也无抗B正确鉴定血型是保证输血安全的基础。常规ABO血型的定型包括正向定型和反向定型。正向定型是用抗 A与抗B抗体检测来检查红细胞上有无 A或B抗体;反向抗体是用已知血型的红细胞检测血清中有无抗A或抗B抗体,结果见表10-3.同时进行正向定型和反向定型是为了相互印证。表3 红细胞常规ABC定型(+为发生凝集;为不凝集)正向定型反向定型血型B型血清A型血清

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