测量不确定度计算

1、附件：高效液相色谱/串联质谱法测定硝基呋喃代谢物残留量的测量不确定度计算一、 检测流程称样+5ml 0.2m hcl+50l 100mm 2-nba震荡30min37过夜+0.5ml 0.3m na3po4+2m naoh调ph7.4+2×5ml乙酸乙酯震荡20min乙酸乙酯层40 n2吹干1ml流动相溶解 +2×1.5ml正己烷震荡1min4000r/m离心3 min下层溶液0.20m过滤hplc/ms/ms检测二、 建模分析残留量检测公式：内标法定量 (1)式中:试样中目标化合物含量，g/kgp样试样中目标化合物峰面积/内标化合物峰面积p标标准溶液中标准化合物峰面积/内

2、标化合物峰面积 c标标准溶液浓度（ng/ml） v标标准溶液进样体积(l) v终样品溶液最终定容体积(ml) v样样品溶液进样体积(l) w样品称样量（g）充分考虑样品检测过程中的各种不确定性因素，建立不确定性评估模型： (2)式中： 均匀化因子提取因子 液液萃取因子回收率校正因子三、不确定度计算表1 计算硝基呋喃多残留不确定度的有关量值项目量值标准不确定度相对标准不确定度paoz0.9830.00580.0058amoz0.990.00580.0058sem0.9990.00580.0058ahd0.9990.00580.0058mstandard100mg0.216mg0.0022c标0.

3、01ppm0.000029 ppm0.0029w2.004g0.00204g0.0010v样20l00v标20l00v终1ml0.00980.0098fmon1.00.020.02fext1.00.0050.005fll1.00.0300.030frecaoz1.00.02200.0220amoz1.00.03700.0370sem1.00.04230.0423ahd1.00.04940.0494espe1.0g/kg1 aoz（呋喃唑酮代谢物）标准品纯度的不确定度up(aoz)按供应商目录所给纯度(所用标准品的纯度不确定度为0.51%,此处取最大值1)为98.3±1，即0.983&

4、#177;0.01，按均匀分布转换成标准偏差为：2标准品称量称量不确定度来自两个方面：第一，称量变动性，根据历史记载，在50g 以内，变动性标准偏差为0.07 mg；第二，天平校正产生的不确定度，按国家标准物质研究中心校准证书给出的在95%置信概率时为0.4mg，换算成标准偏差为0.4/1.96=0.204mg。此两项合成得出称量的标准偏差为：3标准品浓度的不确定度3.1配制的aoz标准储备液不确定度使用100ml 容量瓶配制呋喃唑酮标准储备液，其不确定度包括三个部分：第一，容量瓶体积的不确定度，按国家标准物质研究中心校准证书为0.08ml，按均匀分布换算成标准偏差为；第二，充满液体至容量瓶刻

5、度的变动性，可通过重复称量进行统计，重复10次统计出标准偏差为0.012 ml；第三，容量瓶和溶液的温度与校正时温度不同引起的体积不确定度，假设差3,对水体积膨胀系数为2.1×10-4/,则95%置信概率时体积变化的区间为±100×3×2.1×10-40.063ml，转换成标准偏差为0.063/1.960.032ml。ucstock= (3)= 0.24mg/l3.2配制的aoz标准工作液的不确定度现分析由标准贮备液配制标准工作溶液所产生的不确定度。用浓度为100mg/l的标准溶液配制0.01mg/l标准工作液。将贮备液（100

6、77;0. 24mg·l-1）按1：10000稀释得到0.01mg/l标准溶液，故： （4）其中 c0.10.01mg/l的标准溶液浓度cstock贮备液浓度 （5）其中 f 稀释因子vf 稀释后体积vi 稀释前体积这里1：100稀释是采用1ml 移液管和100ml容量瓶来完成的；故： （6）对1ml移液管和100ml容量瓶进行不确定度分析，由标定、刻度充满及校准和使用温度不同三个不确定度来源合成给出v1、v100的不确定度列于表2中。表2移液管和容量瓶的不确定度项目描述u (vi)(ml)相对标准不确定度u (vi)/viv11ml移液管0.0090.009v100100ml容量瓶

7、0.080.0008由公式（6）可得 将以上各值列于表3中。表3 贮备液及稀释因子不确定度项目值标准不确定度u相对标准不确定度cstock10mg/l0.024 mg/l0.0024f10010.00120.0012由（4）式可得 4样品称量的不确定度称量由下列数据获得：容器和样品的质量为13.028g；容器质量为15.032g；故样品的质量为2.004g。称量不确定度来自两个方面：第一，称量变动性，根据历史记载，在50g以内，变动性标准偏差为0.07mg；第二，天平校正产生的不确定度，按国家标准物质研究中心校准证书给出的在95置信概率时为4mg，换算成标准偏差为4/1.962.04mg。此两

8、项合成得出称量的标准偏差为：5 v样仪器自动进样器，不确定度此处不予考虑6 v标仪器自动进样器，不确定度此处不予考虑7 v终其不确定度来源为：第一，移液管体积的不确定度，按国家标准物质研究中心校准证书移液管体积不确定度为0.006ml，按均匀分布转换成标准偏差为0.006/0.0035ml；第二，充满液体至移液管刻度的变动性，通过重复测定进行统计，例如进行10次测量，其变动性标准偏差为0.0092ml；第三，移液管和溶液温度不同引起的不确定度，同样假定有3差异，在95置信概率下体积变化的区间为±1×3×2.1×10-4，转换成标准偏差为1×3&

9、#215;2.1×10-4/1.960.0003ml。以上三项合成有：8 fmon将整个样品打碎成糊状，由于aoz的分布不存在样品不同部分含有两种或多种不同含量水平的情况。而且直接测量样品的均匀程度也是不现实的。这种不均匀性的影响可以用二项统计来估计。为了估算该值，需要分离后随机选取的n等分样品中物质的量的平均值和标准偏差s。这些值通过以下公式计算：在试验中进行样品均匀度处理试验，经检验算得：u0.029 fext在溶液中添加标准物质，进行提取试验，同时在样品中添加标准物质，其主要影响因素为震荡时间与震荡速度，以及提取溶液的体积，在室温条件下温度对其影响不大可忽略，经检测算得：u0.00510 fll在试验中每一次试验经过三遍液液萃取，其主要影响不确定度的因素来自于萃取震荡的时间，以及萃取的次数，经检验算得：u0.03011 frec试验对aoz作添加回收数据，具体数据见研究报告表6，表中数据显示10个样品的平均回收率为98.4，相对标准偏差为2.1%。标准不确定度采用平均值的标准偏差：所以，aoz的相对标准不确定度为： 即：取包含因子k2，则