颈眩宁胶囊质量标准研究

1、颈眩宁胶囊质量标准研究报告人：冯正腾 专业：微生物与生化药学指导老师：张鹤鸣 田雪梅主要内容 1. 研究背景 2. 目的意义 3. 研究内容 4. 已完成内容 5. 待解决问题1. 研究背景 1.1 颈椎病（椎动脉型 ） 工作压力大，坐姿不良。 脾虚肝旺，肝阳上亢 。 1.1 颈椎病 耳鸣、耳聋、记忆力智力下降。 发病率逐年升高，发病年龄逐年下降。 1.2 颈眩宁胶囊 配伍平肝潜阳、祛痰逐淤、活血通络。 能改善由颈椎病引起的眩晕和头痛症状。 1.2.1 颈眩宁胶囊药材组成 天麻6份、钩藤12份、川芎10份、 延胡索10份、葛根12份、白芷6份 1.2.1.1 天麻天麻素（天麻苷） 天麻能镇静镇

2、痛，治疗头晕目眩、肢体麻木。 天麻素属酚类，有多个羟基，易溶于水及极性溶剂。 1.2.1.2 钩藤钩藤碱 钩藤性凉味甘苦，具有清热平肝息风定惊的功能。 可用于治疗头痛、高血压、眩晕症等。 钩藤碱属于吲哚类生物碱 ，可用碱化乙醚提取。 1.2.1.3 川芎阿魏酸 川芎性温味辛微苦，具活血行气，祛风止痛功效。 川芎能抗心绞痛，改善微循环淤血，提高免疫力。 阿魏酸属酚类，可用有机溶剂回流提取。 1.2.1.4 延胡索延胡索乙素 延胡索具有镇痛、镇静和催眠作用。 延胡索对心肌缺血和损伤有保护作用； 还有抗肿瘤，增强免疫力等作用。 延胡索乙素属季铵碱，可用酸性乙醇回流提取。 1.2.1.5 葛根葛根素

3、葛根性甘辛平，升阳止泻。 具有降低血压，减缓心律的作用。 可用于治疗心肌梗死、高血压、突发性耳聋等。 葛根素属异黄酮类化合物。可用乙醇回流提取。 1.2.1.6 白芷欧前胡素 白芷性温味辛，能散风除湿、通窍止痛、消肿排脓。 能解热镇痛、抗炎，治疗头痛，皮肤病。 欧前胡素属香豆素类，可以用乙醇渗漉法提取。1.2.2 制备方法六味药按比例称量加入10倍体积65%乙醇浸泡3个小时回流提取3次，每次2小时 浓缩药液，制成粉末 加入辅料制粒，装入胶囊 中药质量标准的目的 确保药物质量的稳定、安全、有效、可控。 中药质量标准的意义 促进生产发展 参与国际市场竞争 进行药品评价1.3 中药质量标准概述1.3

4、.1 质量标准分类 1. 法定标准 中华人民共和国药典（已发行2010版） 2. 企业标准 企业内部指标 保护产品，防伪1.3.2 中成药制剂质量标准的内容 名称 处方 制法 性状 鉴别 检查 浸出物 含量测定 功能主治 用法用量 注意事项 规格 贮藏 中药质量存在的问题 重金属污染（汞、镉、砷、铜、铊） 毒性成分 农药残留、微生物、霉菌霉素 质量标准中所检成分未必是主治功能成分1.3.3 中药质量标准的发展 中药质量标准的发展趋势 建立中药指纹图谱可全面反映中药内在质量。 中药指纹图谱 生药材dna指纹图谱 中药饮品成分指纹图谱 中成药成分指纹图谱 中药质量管理方向 gacp基地 检测方法的

5、多样化 基本设备：高效液相色谱、气相色谱、毛细管电色谱 联用技术：色谱-质谱联用、色谱-核磁共振联用 应用多种检测器：紫外检测器、蒸发光散射检测器、荧光检测器、二极管阵列检测器2. 目的意义 建立药物分离、鉴定和含量分析方法。 为新药颈眩宁制定质量标准。3. 研究内容 薄层色谱鉴别（薄层色谱鉴别（tlctlc） 定性鉴别，将供试品与对照品和对照药材比较。 阴性鉴别，制备各药材阴性供试品进行tlc鉴别。 含量测定含量测定 用高效液相法（hplc）测定含量。 阴性鉴定，将各药材阴性供试品进行hplc鉴别。 回收率、精密度、重复性、稳定性、检测下限 检查检查（参考中国药典2010版） 水分检查、装量

6、差异、崩解时限、微生物限度 3.1.1. 供试液制备 样品制备方法：浸渍法、加热回流提取、超声提取、水蒸汽蒸馏法提取、升华法、液液萃取法、固液萃取法（中性氧化铝柱、大孔吸附树脂柱、离子交换树脂柱和c18柱等）。 3.1.2. 展开条件 展开剂选择：良好分离度 考虑因素：溶剂的种类、极性、配比 展开环境：温度、湿度 3.1.3. 显色方法（参考药典）3.1 tlc实验内容3.2 hplc实验内容 3.2.1. 供试品制备 3.2.2. 流动相选择 3.2.3. 方法学考察 3.2.3. 高效液相色谱法测定含量的方法学考察 a. 标准曲线制作：线性关系、线性范围、相关系数。 b. 稳定性试验：将供

7、试品溶液多次进样，每次进样间隔一段时间（比如12 h），考察供试品溶液中待测成分的稳定性，一般考察36小时。 c.精密度试验：取同一样品，连续测定五次，相对标准偏差不得大于3。 d. 重复性试验：同一批号样品，按样品测定方法操作，测定五份，相对标准偏差不得大于3。 e. 加样回收试验：于已知被测成分含量的样品中精密加入一定量的被测成分纯品，测定含量。用实测值与原样品中含测成分之差，除以加入纯品量计算回收率。一般回收率要求在95105。 f.含量限幅度的制定：根据原料来源不同的三批以上样品测定结果，确定含量范围。3.3. 检查 水分 装量差异 崩解时限 微生物限度4. 已完成内容 样品中天麻素的

8、tlc定性测定及hplc定量测定部分内容。4.1. 材料和设备 标准品：天麻素，中国药品生物制品鉴定所，批号：116807-200205 颈眩宁胶囊：批号：20120716 硅胶板：gf merck生产 展开剂为分析纯 电子天平：奥豪斯仪器（上海）公司，ar224cn 高效液相色谱：dionex ultimate 3000 烘箱：memmert4.2. 方法 4.2.1. 天麻素薄层色谱鉴别 4.2.1.1. 供试品制备 d101大孔树脂，10%乙醇50ml洗脱。 4.2.1.2. 标准品制备 取天麻素对照品，加甲醇制成1mg/ml的对照品溶液。 4.2.1.3. 展开剂选择 用氯仿:甲醇=3

9、:1的比例展开。 4.2.1.4. 显色方法 薄层板晾干后，喷以10%磷钼酸乙醇，在110烘至显出斑点。4.2.1.5. 天麻素薄层色谱鉴别实验结果 1 2 3 4 5 6 7 8 91、8、9为天麻素对照品6为上述方法制备得到的样品其余色谱条带为其它方法制备得到的样品4.2.2 天麻素hplc含量检测 4.2.2.1. 供试品制备 超声处理1小时 4.2.2.2. 标准品制备 称取天麻素标准品0.0059g，容于流动相中。 4.2.2.3. 流动相选择 水:乙腈=3:974.2.2.4天麻素hplc含量检测实验结果0.01.32.53.85.06.37.58.810.011.312.513.

10、815.016.317.518.820.021.322.523.825.0-10.020.040.060.080.0天麻素天麻素标准品标准曲线 （判定系数 99.9997）0.05.010.015.020.00.0000.1000.2000.3000.4000.5000.6000.7000.01.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.012.013.014.015.0-500100200250#14uv_vis_1maumin1 - 0.8202 - 2.1733 - 2.2804 - 2.4805 - 2.5536 - 2.6937 - 2.9138 - 3.153

11、9 - 3.49310 - 3.62711 - 3.73312 - 3.99313 - 4.11314 - 4.33315 - 4.74716 - 4.97317 - 5.33318 - 5.55319 - 5.87320 - 6.08021 - 6.34722 - 6.63323 - 7.55324 - 7.98725 - 9.26026 - 10.04027 - 10.393天麻素29 - 12.15330 - 13.620样品图谱 天麻素含量为0.9605ug/ul5. 待解决问题 其他5味药的定性、定量测定。 hplc的方法学考察。 规定的检查项目。参考文献国家药典委员会.中国药典(一

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