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文档简介
1、1实验四实验四 影响酶活性影响酶活性的因素的因素 2一、实验目的一、实验目的观察淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。观察不同底物、温度、ph、激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响。3二、原理二、原理影响酶活性的因素包括:底物类型、酶浓度、底物浓度、产物浓度、抑制剂、激活剂、ph值、温度等淀粉在淀粉酶的作用下被降解成单糖,这种降解过程是逐步进行的,降解的中间产物遇碘曾现不同的颜色: 淀粉 红色糊精 无色糊精 麦芽糖 葡萄糖 (紫蓝色)(红色) (无色) 所以根据水解液和碘反应的颜色,可以判断水解是否已完全。4三、试剂和器材三、试剂和器材 1. 试剂 新鲜唾液稀释液、1%蔗糖溶液、benedic
2、t试剂、0.5%淀粉、含0.3%nacl的0.5%淀粉溶液、 5氯化钠溶液、0.1硫酸铜溶液、 0.2 mol/l磷酸氢二钠溶液、柠檬酸钠溶液、ki-i2溶液 2. 器材 恒温水浴锅、冰箱、电磁炉5四、操作方法四、操作方法1. 唾液淀粉酶液的准备:实验者先用蒸馏水嗽口,然后含一口蒸馏水于口中,轻嗽一、二分钟,吐入小烧杯中。将其稀释5-20倍。2. 淀粉酶活性的检测: 取一支试管,注入0.5%淀粉溶液3 ml与稀释的唾液1 ml。混匀后插入1支玻棒,将试管连同玻棒置于37水浴中。不时地用玻棒从试管中取出1滴溶液,滴加在白磁板上,随即加1滴碘液,观察溶液呈现的颜色。此实验延续至溶液仅表现碘被稀释后
3、的微黄色为止。记录淀粉在水解过程中,遇碘后溶液颜色的变化及反应时间。根据反应时间调整酶的稀释倍数。6实验四实验四1 1 酶的特异性酶的特异性7一、实验目的 了解酶的特异性并掌握检查酶的特异性的方法和原理。二、原理二、原理 酶的特异性是指一种酶只能对一种或一类化合物(此类化合物通常具有相同的化学键)起作用,而不能对别的化合物起作用。如淀粉酶只能催化淀粉水解,对蔗糖的水解无催化作用。 本实验以唾液淀粉酶(含淀粉酶和少量麦芽糖酶)对淀粉的作用为例,说明酶的特异性。淀粉和蔗糖都没有还原性,但淀粉水解产物为葡萄糖,蔗糖水解产物为果糖和葡萄糖,均为还原性糖,能与benedict试剂反应,生成砖红色的氧化亚
4、铜沉淀。8三、试剂和器材 1. 试剂 新鲜唾液稀释液、1%蔗糖溶液、benedict试剂、0.5%淀粉、含0.3%nacl的0.5%淀粉溶液 2. 器材 恒温水浴锅四、操作方法 1. 检查试剂 取2只试管,按下表操作。 9 试管 编号试剂处理 1 20.3nacl 的0.5%淀粉溶液/ml3 2%蔗糖溶液/ml3benedict试剂/ml22 沸水浴煮沸23min记录观察结果10 淀粉酶的专一性实验 取2只试管,按下表操作。 试管编号试剂处理 1 2稀释的唾液/ml110.3nacl的 0.5%淀粉溶液/ml3 2% 蔗糖溶液/ml3摇匀,置37水浴保温10min10minbenedict试剂/ml22 沸水浴煮沸23min记录观察结果1112五、注意事项 唾液的稀释倍数因人而异,有时差别很大
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