气相色谱法测定食用酒中乙醇含量ppt课件

1、1 实实 验验 一一 气相色谱法测定食用酒中乙醇含量气相色谱法测定食用酒中乙醇含量一实验目的1.了解气相色谱仪的基本结构；2.学习和掌握使用氢火焰离子化检测器的基本 操作；3.掌握以内标法进行色谱定量分析的方法及特 点；4.学习气相色谱法测定乙醇含量的分析方法。2二、实验原理 气相色谱法是一种高效、快速而灵敏的分离分析技术。 当液体样品由进样口注入后立即被汽化，并被载气带入色谱柱，经过多次分配而得以分离的各个组分逐一流出色谱柱进入检测器，随时间变化而产生的电信号由记录仪得到气相色谱图。对气相色谱图进行数学分析，即可对样品进行定性定量分析。3三、仪器与试剂 1.仪器：气相色谱仪、氢火焰检测器（F

2、ID）、 色谱柱、微量注射器、容量瓶 （10cm3）、色谱工作站、吸量管（2、 5cm3）。 2.试剂：无水乙醇(A.R)、无水n-C3H7OH(A.R)、 丙酮、食用酒。4四、实验步骤1. 色谱操作条件 柱温：90；汽化室温度：150；检测器温度：130；N2（载气）流速：40cm3/min；H2流速：35cm3/min；空气流速：400cm3/min； 2.标准溶液的测定 用吸量管准确吸取0.50cm3无水乙醇和0.50cm3无水n-C3H7OH于10cm3的容量瓶中，用丙酮定容至刻度，摇匀。用微量注射器吸取0.5L标准溶液，注入色谱仪内，记录各色谱峰的保留时间tR和色谱峰面积，求出以无水

3、n-C3H7OH为标准物的相对校正因子。53.样品溶液的测定 用吸管吸取1.00cm3的食用酒样品和0.50cm3的内标物（无水n-C3H7OH）于10cm3容量瓶中，用丙酮定容至刻度，摇匀。用微量注射器吸取0.5L样品溶液，注入色谱仪内，记录各色谱峰的保留时间tR，对照比较标准溶液与样品溶液的tR，以确定样品中的醇，记录 C2H5OH和n-C3H7OH色谱峰面积，求出样品中C2H5OH的含量。6 实实 验验 二二 气相色谱法测定生物柴油中脂肪酸甲酯气相色谱法测定生物柴油中脂肪酸甲酯一、实验目的1. 了解气相色谱仪的基本构造与一般使用方法2. 掌握气相色谱检测器的原理和操作；3. 了解程序升温

4、色谱法的操作特点；4. 学会用气相色谱仪进行归一化法定量分析。7二、实验原理程序升温是指色谱柱的温度按照适宜的程序连续地随时间呈线性或非线性升高。在程序升温中，采用较低的初始温度，使低沸点的组分得到良好分离，然后随着温度不断升高，沸点较高的组分逐一“推出”。由于高沸点组分较快地流出，因而峰形尖锐，与低沸点组分类似。在一定的色谱操作条件下，每种物质有一定的保留时间，而响应值与进样量成线性关系。当样品中所有组分都能流出色谱柱，并能给出可以测定的信号时，可以采用采用归一化法进行定量分析。归一化法只适用于样品中所有组分都从色谱柱流出并被检测器检出、且都在线性范围内、同时又能测定或查出所有组分相对校正因

5、子的样品。8三、仪器与试剂 1.仪器：6890型气相色谱仪；色谱柱：HP- innowax毛细管色谱柱 （300.250.25）；氢火焰离子化检 测器；微量注射器。2.试剂：生物柴油；正己烷。9四、实验步骤1. 色谱操作条件：汽化室温度280；检测器温度280；柱温采用程序升温：初始温度170，保持0.5min，以5min的升温速率升至200，然后以15min的升温速率升至240，保持时间5min；载气：N2，柱头压60kPa；氢气：32mLmin；空气：320mLmin；进样量：1L。2. 取一定量的生物柴油样品于1mL的容量瓶中，用正己烷定容后，在上述色谱条件下进行气相色谱分析，记录下各色

6、谱峰的保留时间和峰面积。10100%iiiiif AXf A根据公式（1）计算各脂肪酸甲酯的百分含量。11 实实 验验 三三 高效液相色谱法测定萘高效液相色谱法测定萘一、实验目的 认识高效液相色谱仪, 掌握高效液相色谱仪的基本操作；2. 掌握高效液相色谱法进行定性和定量分析的原理； 3. 掌握外标法进行定量分析的方法。12二、实验原理在一定的色谱操作条件下，每种物质有一定的保留时间，而响应值与进样量成线性关系。外标法也叫标准曲线法。13三、仪器与试剂 仪器:Shimadzu LC-10ATvp高效液相色谱仪； 紫外吸收检测器（254mm）；C18柱， 25cm4.6mm；微量注射器；超声波清

7、洗器1台；溶剂过滤器1套。2. 试剂:甲醇：色谱纯；二次蒸馏水；萘：AR 级。14四、实验步骤1.色谱操作条件： 色谱柱：C18柱； 流动相：甲醇：水80：20 流速：1mL/min 检测波长：254nm 柱温：40； 进样量：20L。152. 标准溶液配制；3. 样品溶液的配制；4. 进样并记录色谱图 16五、数据处理与分析100(%) ssiimAAP17 实实 验验 四四 内标法测定联苯内标法测定联苯一、实验目的 进一步熟悉高效液相色谱仪的基本构造与一 般使用方法；2. 理解内标法的测定原理和优点；3. 初步学会设计色谱法进行样品测定的实验步 骤，并以萘为内标物测定样品中联苯的含量。18

8、二、实验原理在一定的色谱操作条件下，每种物质有一定的保留时间，而响应值与进样量成线性关系。内标法也叫内标标准曲线法。19三、仪器与试剂 仪器:Shimadzu LC-10ATvp高效液相色谱仪； 紫外吸收检测器（254mm）；C18柱， 25cm4.6mm；微量注射器；超声波清 洗器1台；溶剂过滤器1套。2. 试剂:甲醇：色谱纯；二次蒸馏水；萘、联 苯：AR级。20四、实验步骤1.色谱操作条件： 色谱柱：C18柱； 流动相：甲醇：水90：10 流速：1mL/min 检测波长：254nm 柱温：40； 进样量：20L。212. 标准溶液配制；3. 样品溶液的配制；4. 进样并记录色谱图 22五、

9、数据处理与分析100(%) iisisiisisiiAAmmmmAAP23 实实 验验 五五 常见阴离子色谱分析常见阴离子色谱分析一、实验目的 了解离子色谱仪的基本构造与一般使用方 法；2. 能用于测定样品中常见阴离子的含量。24二、实验原理 离子色谱法是以为离子交换树脂为固定相，电解质溶液为流动相的液相色谱方法，常以电导检测器作为通用的检测器。 常见阴离子经过阴离子柱分离后，利用保留时间进行定性分析，利用峰面积进行定量分析。25三、仪器与试剂 仪器:ICS-90型离子色谱仪；电导检测器；阴 离子分析系统，微量注射器。2. 试剂：Na2SO4、NaNO3、NaCl(均为分析 纯)；9 mmol

10、/L Na2CO3溶液。26四、实验步骤1. 色谱操作条件的设置；2. 标准溶液配制； 3. 样品溶液的配制；4. 进样并记录色谱图。27五、数据处理与分析100(%) ssiimAAP28 实实 验验 六六 分子荧光光谱分析法测定维生素分子荧光光谱分析法测定维生素B2一、实验目的 了解荧光光谱分析基本原理；2. 掌握荧光法的定量分析方法；3. 了解日立F-2500型荧光分光光度计的构造及 其使用方法。29二、实验原理维生素B2（核黄素）在一定波长的激发光照射下会发射出绿色荧光，根据荧光强度在一定浓度范围内与荧光物质浓度成正比，用标准曲线法对样品进行定量分析。30三、仪器与试剂 仪器：日立F-

11、2500型荧光分光光度计，液体 样品架，50mL容量瓶8个，100mL烧 杯2个，洗瓶一个，玻璃棒二根，蒸馏 水。2. 试剂：1%的醋酸溶液； 维生素B2标准溶液：称出10.0mg维生 素B2先溶于少量的1%的醋酸溶液，然 后转移到1000mL容量瓶中，用1%的醋 酸溶液定容至刻度，摇匀，至阴暗处 保存。此液含维生素B210.0g/mL。31四、实验步骤1. 按照日立F-2500型荧光分光光度计的使用方 法开好仪器。2. 配制系列标准溶液：取5个50mL容量瓶，分 别加入1.00，2.00，3.00，4.00，5.00mL浓度 为10.0g/mL的标准溶液，用水稀释至刻 度，摇匀。323. 标

12、准曲线的绘制 把各标准样品置于试样架内，设置好仪器的 工作条件，用蒸馏水做空白，分别扫描空白 和标样的荧光光谱，根据峰高和浓度绘制标 准曲线。4. 未知试样的测定 准确称出一定量的未知试样于小烧杯中，用 水溶解并定容至100mL容量瓶内，摇匀，用 测定标准曲线相同的条件，测其荧光强度。33五、数据处理与分析根据试液的荧光强度，从标准曲线上查出试液中维生素B2的浓度，按下列公式计算维生素B2的含量。维生素B2的含量=C100/G（g/g）C试液中维生素B2的浓度（从标准曲线上查 出，单位是g/mL）C未知试样的重量，单位是克（g）100试样被稀释的体积。34 实实 验验 七七 紫外吸收光谱法测定

13、苯甲酸紫外吸收光谱法测定苯甲酸一、实验目的 了解紫外吸收光谱仪的基本构造与一般使用 方法；2. 能用于测定样品中苯甲酸的含量。35二、实验原理苯甲酸在225nm处有最大吸收峰，其吸光度与浓度的关系服从朗伯比尔定律。36三、仪器与试剂 仪器： UV1600紫外分光光度计；10mL容量 瓶7个；20 mL、5 mL吸量管各1支。2. 试剂: 0.1molL-1NaOH溶液;苯甲酸钠(AR); 蒸 馏水。37四、实验步骤1. 苯甲酸钠贮备液的配制：称量经过干燥的苯 甲酸钠适量于1000mL容量瓶中，用水溶 解，并定容。2. 苯甲酸钠工作溶液的配制：取20.00mL贮备 液稀释定容至1000mL。3.

14、 苯甲酸钠系列标准溶液的配制：分别取苯甲 酸钠工作溶液0-5.00 mL按下表配制。38容量瓶编号12345678工作液（mL）01.002.003.004.005.004.004.00加入NaOH（mL）1.001.001.001.001.001.001.001.00定容（mL)10.010.010.010.010.010.010.010.0C（ppm）02.04.06.08.010.0X1X239五、数据处理与分析1. 标准曲线的绘制：以苯甲酸钠系列标准溶液 的吸光度为纵坐标，相应的浓度为横坐标， 绘制作A-C标准曲线。2. 样品溶液中苯甲酸钠含量计算：从A-C标准 曲线上查出X值，从而求

15、出样品中苯甲酸的 含量。40 实实 验验 八八 双波长法同时测定维生素双波长法同时测定维生素C和和E一、实验目的 进一步熟悉紫外吸收光谱仪的基本构造，掌 握其一般使用方法；2. 能用双波长法同时测定双组分的含量。41二、实验原理吸光度具有加合性，根据两组分吸收曲线的性质，选择两个合适的测定波长，通过解联立方程的可以同时测出样品中双组分的含量。42三、仪器与试剂 仪器: UV1600紫外分光光度计；50mL容量瓶 10个；20 mL、5 mL吸量管各2支。2. 试剂: 维生素C;维生素E;无水乙醇。43四、实验步骤1. 维生素C和维生素E标准溶液的配制；2. 维生素C和维生素E紫外吸收曲线的绘制

16、，确 定测定波长；3. 维生素C和维生素E标准曲线的绘制；4. 未知试样的测定。44五、数据处理与分析1. 维生素C吸收曲线的绘制；2. 维生素E吸收曲线的绘制；3. 根据吸收曲线测定波长的选定；4. 维生素C标准曲线的绘制：5. 维生素E标准曲线的绘制：6. 样品溶液中维生素C和E含量计算。45实实 验验 九九 原子吸收光谱法测定原子吸收光谱法测定井水、河水中镁井水、河水中镁一、实验目的.学会原子吸收光谱法测定金属元素的原理与 方法；.了解原子吸收分光光度计的基本构造，初步 熟悉其操作方法；.掌握火焰法测镁的条件选择。46二、实验原理 将样品试液吸入空气乙炔火焰中，在火焰的高温下，镁化合物离

17、解为镁基态原子，基态原子蒸气对镁空心阴极灯发射的特征谱线产生吸收。将测得的试样溶液的吸光度扣除试剂空白的吸光度，利用标准曲线法，确定试液中的镁含量。三、仪器与试剂、仪器：TAS-986型/GGX-型原子吸收分光 光度计、试剂：10g/ml Mg标准液47四、实验步骤. 配制Mg标准系列取10g/ml Mg标准液0.50、1.00、0.50、 2.00、2.50ml，分别置于5个50ml容量瓶 中，用蒸馏水稀释至刻度摇匀，得Mg标准 系列。. 样品：井水直接取4.00ml稀释至100ml；河水过滤 后取10ml，稀释至100ml。48元素光源灯电流波长通带火焰燃烧器高度Mg Mg灯1.mA285

18、.2nm2A乙炔空气mm. 仪器检测条件49按照上述条件，根据仪器操作步骤依次从低到高浓度测定标液和样液。五、数据处理 采用标准曲线法处理，样品稀释倍数。50附.正确连接仪器及计算机各连线和插头，确认 仪器电源开关处于“关”位，再开启稳压器电 源。.顺序打开打印机、显示器、计算机电源开 关，等待计算机处于“Windows”界面。.装上待测元素空心阴极灯，并记下灯位。打 开TAS-986主机电源开关，双击“AAwin”软 件图标联机“确定”，仪器自动进入自检。51.自检完成后，设定和选择工作灯和预热灯 “下一步” 修改或输入正确的灯电流、 分光带宽、燃气流量、燃烧器高度和位置 “下一步“寻峰”

19、“下一步”“完成”。.在任务栏击“仪器”，选择“燃烧器参数”， 调 节火焰原子化器的前后、上下及角度位 置，其对准光路。52.击“仪器”选择“扣背景方式”选择“氘 灯” 或“自吸”扣背景，并输入适当的氘灯电流或 窄脉冲电流，在能量窗口再进行调节和能量 自动平衡。若不进行背景校正，本步可省去。. 击“参数”按钮在常规界面输入“测量重复次 数”、“采样间隔”、及“采样延时参数”；在显 示界面输入“吸光度显示范围”及“页面更新时 间” 在数据处理界面选择“计算方式”，输入 “积分时间”、“滤波系数” “确定”。53 .击“样品”按钮选择“校正方法”、“曲线方 程”、“ 浓度单位”“下一步”选择“标准

20、系列样品个数”，输入“标准系列样品 浓度值” “下一步”选择“未知样品个数” “完成”。.顺序打开空压机“风机开关” “工作开关”， 待压力稳定后，检查并调节出口压力为0.25 0.3Mpa之间（推荐压力0.25 Mpa）。5410.打开乙炔钢瓶总阀，检查并调节出口压力为 0.05 0.09 Mpa之间（推荐压力0.06 Mpa）。11.击“点火”按钮点火吸喷蒸馏水1 2 分钟 吸喷标准系列空白溶液击“校零”按钮自动调 零。12.击“测量”按钮顺序吸喷标准系列溶液并在测 量窗口击“开始”按钮测量标准溶液，作校准曲 线。5513. 吸喷未知样品溶液，击“开始”按钮测量未 知样品。全部未知样品测量

21、完毕后击“终 止”按钮退出测量吸喷蒸馏水1 2 分 钟清洗燃烧器。14. 击“应用”按钮选择“实验记录” 输入 “测量元素”、“样品名称”、“分析员”、“记 录” “确定” 。5615. 在测量表格上击右键选择“表格设置” 选择所需显示和打印的项目在任务栏击 “打印”按钮选择所需打印的内容击“确 定”打印相应内容。16. 关闭乙炔钢瓶总阀，烧去管路中余气，待 火焰熄灭后按空压机“放水阀”放水关闭 空压机“工作开关” 1 2分钟后关闭“风 机开关”。5717. 退出AAWin操作软件关闭TAS-986主机 电源关闭打印机、计算机、稳压器电源。18. 整理实验室卫生、检查实验室水、气、电安 全。581. 开机前准备将主机各操作钮置于适当位置；安装空心阴极灯。2. 开机依次开稳压器、总电源、调灯电流后预热 1520分钟；选择分析线及狭缝宽度后，调灯及燃烧器 的位置，调负高压，用“状态检查（工作选 择）”检查负高压与15V电源是否正常。593. 点火关紧主机上各气体调节针阀，将“空气-笑 气” 钮旋至“空气”，开排废气装置； 开空压机，调空气输入压为23kgcm-2； 打开助燃气针阀，开大至限压开关被启动 后，调助燃气流量；依次打开乙炔钢瓶总阀、分阀，调节乙炔 输出压力0.8 kgcm-2，调燃气流量后点火。4. 测定依次从低到高浓度测