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文档简介
1、1第第3章章 微生物细胞的破碎微生物细胞的破碎chapter 3 cell disruption知识点:知识点:细胞壁的组成和结构,微生物细胞的破碎技术,破碎率的测定。重点:重点:工业生产中常用的几种细胞破碎方法的原理,操作过程常用设备,并能就实际生产情况予以合理的选择。难点:难点:常用破碎方法的合理选用。2目录v1微生物细胞的破碎技术概述微生物细胞的破碎技术概述v2细胞壁的组成和结构细胞壁的组成和结构v3微生物细胞的破碎技术微生物细胞的破碎技术v4 破碎方法的影响因素破碎方法的影响因素34 胞外产品:各种胞外酶、胞外多糖、细胞代谢物胞外产品:各种胞外酶、胞外多糖、细胞代谢物细胞本身:细胞本身
2、: 单细胞蛋白(单细胞蛋白(scp)胞内产品胞内产品:碱性磷酸酯酶,基因工程产物,植物细胞产碱性磷酸酯酶,基因工程产物,植物细胞产物等物等1 微生物细胞的破碎技术概述微生物细胞的破碎技术概述5672 细胞壁的组成和结构细胞壁的组成和结构 1.细胞壁的组成和破碎阻力细胞壁的组成和破碎阻力2.细胞壁的结构细胞壁的结构 82.1 细胞壁的组成和破碎阻力细胞壁的组成和破碎阻力细菌细菌:肽聚糖,多糖,磷壁酸,主要阻力来自于肽聚糖的网状结构。酵母菌:酵母菌:葡聚糖,甘露聚糖,蛋白质,主要阻力来自于壁结构交换的紧密程度和厚度。真菌:真菌:多糖,蛋白质,脂类,葡聚糖,几丁质,主要阻力来自于壁强度和聚合物网状结
3、构。back92.2 细胞壁的结构细胞壁的结构细菌的细胞壁细菌的细胞壁酵母菌的细胞壁酵母菌的细胞壁真菌的细胞壁真菌的细胞壁back1011back12back13各种微生物细胞壁的结构与组成各种微生物细胞壁的结构与组成 14153 微生物细胞的破碎技术微生物细胞的破碎技术1微生物细胞的破碎技术:微生物细胞的破碎技术:2常用的破碎技术:常用的破碎技术:3破碎方法的影响因素破碎方法的影响因素:163.1 微生物细胞的破碎技术微生物细胞的破碎技术 17细胞破碎主要方法细胞破碎主要方法 18细胞破碎机理图细胞破碎机理图19机械破碎法与非机械法比较机械破碎法与非机械法比较 20破碎技术的未来发展方向破碎
4、技术的未来发展方向多种破碎方法相结合:多种破碎方法相结合:与上游过程相结合:与上游过程相结合:与下游过程相结合:与下游过程相结合:21破碎方法选择原则破碎方法选择原则(1)(1)仅破坏或破碎存在目标生化物质的位置周围:仅破坏或破碎存在目标生化物质的位置周围:(2)(2)选择性溶解目标生化物质:选择性溶解目标生化物质:223.2 常用的破碎设备常用的破碎设备u机械法:机械法:研磨,匀浆器,组织捣碎法,压榨器u物理处理法物理处理法:u化学法:化学法:u酶解法酶解法:u干燥法:干燥法:23砂磨机砂磨机24高速珠磨机高速珠磨机25高压匀浆器高压匀浆器26撞击破碎器撞击破碎器27电声超声波发生器电声超声
5、波发生器284 破碎方法的影响因素破碎方法的影响因素细胞的数量破碎条件破碎目标29破碎率的测定破碎率的测定 1.直接测定法直接测定法2.测定释放的蛋白质量或酶的活力测定释放的蛋白质量或酶的活力305. 包含体的破碎包含体的破碎 包含体定义包含体中目标蛋白的制备步骤蛋白质的复性操作方法提高目标蛋白质复性效率的对策31作业作业高速湿法珠磨高速湿法珠磨高压匀浆高压匀浆超声波破碎超声波破碎组织捣碎组织捣碎酶解酶解自溶自溶化学溶胞化学溶胞渗透压冲击渗透压冲击冻结冻结- -融化融化干燥干燥撞击破碎撞击破碎 每人请任选一种破碎方法,通过若干个典型实例来详细分析每人请任选一种破碎方法,通过若干个典型实例来详细分析说明工艺流
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