分析化学课件 第一学期 第10章

1、1沉淀滴定法沉淀滴定法滴定剂滴定剂莫尔法莫尔法法扬司法法扬司法佛尔哈德法佛尔哈德法终点颜色变化终点颜色变化指示剂指示剂 AgNO3 K2CrO4砖红色砖红色NH4SCN铁铵矾铁铵矾NH4Fe(SO4)2红色红色吸附指示剂吸附指示剂如荧光黄如荧光黄 AgNO3 红色红色2化化学学分分析析仪仪器器分分析析酸碱滴定酸碱滴定配位滴定配位滴定氧化还原滴定氧化还原滴定沉淀滴定沉淀滴定光化学分析光化学分析重量分析滴定分析滴定分析第六章第六章 吸光光度法吸光光度法3本次课主要内容：本次课主要内容：6.1 吸光光度法概述吸光光度法概述 吸光光度法的特点吸光光度法的特点光吸收的基本定律光吸收的基本定律比色法和吸光

2、光度法及其仪器比色法和吸光光度法及其仪器 重点与难点：重点与难点：朗伯朗伯比尔定律；比尔定律；摩尔吸光系数及桑德尔灵敏度的概念及计算摩尔吸光系数及桑德尔灵敏度的概念及计算；分光光度计分光光度计4第六章第六章 吸光光度法吸光光度法吸光光度法（分光光度法）：基于物质吸光光度法（分光光度法）：基于物质对光的选择性吸收对光的选择性吸收而建而建立起来的方法立起来的方法6.1 6.1 概述概述一、吸光光度法特点一、吸光光度法特点1.1.光的基本性质光的基本性质光是一种电磁波，不同波长的光具有不同的能量光是一种电磁波，不同波长的光具有不同的能量hchE当用不同波长的光照射物质时，引起物质内部不同能当用不同波

3、长的光照射物质时，引起物质内部不同能量能级的跃迁量能级的跃迁5电磁波谱范围表6远紫外远紫外近紫外近紫外 可见可见近红外近红外中红外中红外 远红外远红外（真空紫外）（真空紫外）10nm200nm200nm 400nm400nm 750nm750 nm 2.5 m2.5 m 50 m50 m 300 m7图图6-1分子中电子能级、振动能级和转动能级示意图分子中电子能级、振动能级和转动能级示意图2、吸收光谱产生的原理、吸收光谱产生的原理1）分子吸收光谱）分子吸收光谱 分子具有三种不同的能级：电子能级、转动能级、振动能级分子具有三种不同的能级：电子能级、转动能级、振动能级10105 5 同一物质与不同

4、显色剂生成不同有色化合物，具同一物质与不同显色剂生成不同有色化合物，具有不同的有不同的值值， 在一定条件下为一常数。在一定条件下为一常数。215 5、桑德尔灵敏度，用、桑德尔灵敏度，用S S表示表示1 1）S S的定义：的定义：S S是指当仪器的检测极限为是指当仪器的检测极限为A=0.001A=0.001时时, ,单位截面单位截面积光程积光程内所能检出吸光内所能检出吸光物质的最低含量物质的最低含量（截面积为（截面积为1cm1cm2 2的的液层，在一定波长处测得的吸光度液层，在一定波长处测得的吸光度A A为为0.0010.001时，所含待测时，所含待测物质的质量）物质的质量）, , S S越小越

5、灵敏（越小越灵敏（gcmgcm-2-2） 2 2）与与S S的关系：的关系： A=bc = 0.001 ，则，则cb=0.001/； c的单位为的单位为mol/L，可变，可变为为mol/1000cm3； b单位为单位为cm，cb/1000为为mol/cm2;MMS310001. 0）（236g10101000cmScbMMcb22式中式中M的单位为的单位为gmol-1，的单位为的单位为Lmol-1cm-124.0050. 0101 . 185.55cmgMS 例例1：铁（：铁（）浓度为）浓度为5.010-4 gL-1 的溶液，与的溶液，与 1，10-邻二邻二氮菲反应，生成橙红色络合物。该络合物

6、在波长氮菲反应，生成橙红色络合物。该络合物在波长508nm，比比色皿厚度为色皿厚度为2cm时，测得时，测得A=0.19。计算计算1，10-邻二氮菲铁的邻二氮菲铁的及及S 需要知两个公式需要知两个公式 A= b c 以及以及S =M/ , 解：已知解：已知 M (Fe)=55.85 C= 5.010-4/ 55.85=8.9510-6 mol/L =A / bc = 0.19/28.9510-6= 1.1104Lmol-1cm-123B. 用用4,7-二苯基邻二氮菲光度法测定铁二苯基邻二氮菲光度法测定铁 5332.2104 Lmol-1cm-1B方法比方法比A方法的灵敏度高方法的灵敏度高.A.

7、用邻二氮菲光度法测定铁时，用邻二氮菲光度法测定铁时，5081.1104 Lmol-1cm-1S = 55.85/(1.1104)0.0051 ( gcm-2)S = 55.85/(2.2104)0.0025 ( gcm-2)24三、比色法和吸光光度法及其仪器三、比色法和吸光光度法及其仪器1 1、目视比色法和吸光光度法的特点目视比色法和吸光光度法的特点：1 1）灵敏度：）灵敏度：质量分数质量分数1%-10-5的微量组分，甚至的微量组分，甚至10-610-8痕痕量组分量组分2 2）准确度：准确度：目视比色分析，相对误差目视比色分析，相对误差5 510%10%，分光光度法，分光光度法，2 25%5%

8、3 3）应用广泛：）应用广泛：可测定几乎所有无机离子和许多有机物可测定几乎所有无机离子和许多有机物4 4）仪器简单、操作简便、快速）仪器简单、操作简便、快速252 2、目视比色法、目视比色法1 1) )定义：定义：用眼睛比较溶液颜色深浅以确定物质含量的方法用眼睛比较溶液颜色深浅以确定物质含量的方法。2 2) ) 优点：优点：设备简单，操作简便，适宜于大批试样分析；灵设备简单，操作简便，适宜于大批试样分析；灵敏度高，不要求严格遵守比尔定律敏度高，不要求严格遵守比尔定律。3 3) ) 用途用途: :用在要求不高的常规分析中用在要求不高的常规分析中。4 4) ) 缺点：缺点：准确度不高，标准系列不能

9、久存准确度不高，标准系列不能久存。263 3、吸光光度法、吸光光度法 借助于借助于分光光度计分光光度计来测量一系列标准溶液的吸光度，来测量一系列标准溶液的吸光度，绘制标准曲线绘制标准曲线，然后根据被测试液的吸光度，从标，然后根据被测试液的吸光度，从标准曲线上求得被测物质的浓度或含量准曲线上求得被测物质的浓度或含量A b c工作曲线法工作曲线法(校准曲线校准曲线) 0 1.0 2.0 3.0 4.0 c(mg/mL)A。 。 。 。*0.800.600.400.200.00Axcx27特点：特点：测定吸光度测定吸光度 入射光为较纯单色光，准确度高入射光为较纯单色光，准确度高 利用吸光度加合性，可

10、测定两种以上物质利用吸光度加合性，可测定两种以上物质 在紫外或红外区域也可测定在紫外或红外区域也可测定目视比色法和吸光光度法的区别目视比色法和吸光光度法的区别：吸光光度法比较有色溶液对某一波长光的吸光光度法比较有色溶液对某一波长光的吸收吸收情况，情况，目视比色法是比较目视比色法是比较透过光透过光的强度的强度4 4、分光光度计及其基本部件、分光光度计及其基本部件0.57529氢灯，氘灯，氢灯，氘灯，185 350 nm； 钨灯，钨灯，360 800 nm.基本要求：光源强，能量分布均匀，稳定基本要求：光源强，能量分布均匀，稳定作用：将复合光色散成单色光作用：将复合光色散成单色光棱镜：玻璃，石英棱

11、镜：玻璃，石英光栅：光栅：平面透射光栅，反射光栅平面透射光栅，反射光栅可见光区用玻璃，紫外光区用石英可见光区用玻璃，紫外光区用石英盛放试液（比色皿）盛放试液（比色皿）30 /nm钨灯（钨灯（热辐射光源热辐射光源）40040060060080080010001000氙灯氙灯（气体放电光源气体放电光源）氢灯氢灯强度强度31棱镜：根据光的折射原理将复合光色散为不同波长棱镜：根据光的折射原理将复合光色散为不同波长的单色光的单色光玻璃棱镜适用于可见光玻璃棱镜适用于可见光石英棱镜在可见光和紫外都可用石英棱镜在可见光和紫外都可用入射狭缝入射狭缝准直透镜准直透镜棱镜棱镜聚焦透镜聚焦透镜出射狭缝出射狭缝白光白光

12、红红紫紫1 12 2800 600 50040032光栅：根据光的干涉和衍射原理，将复合光分解为不同波长光栅：根据光的干涉和衍射原理，将复合光分解为不同波长的单色光的单色光 光栅的分辨率比棱镜大，可用的波长范围也较宽。光栅的分辨率比棱镜大，可用的波长范围也较宽。M1M2出出射射狭狭缝缝光屏光屏透透镜镜平面透平面透射光栅射光栅33h （片）（片）红敏管红敏管 625-1000 nm蓝敏管蓝敏管 200-625 nm 光电管光电管( (Phototube) )34光电倍增管光电倍增管( (Photomultiplier Tube, PMT) )1个光子可产生个光子可产生106107个电子个电子16

13、0-700 nm35361 1、人眼能感觉到的光称为可见光，其波长范围是、人眼能感觉到的光称为可见光，其波长范围是A.400750nm B.200320nmA.400750nm B.200320nmC.200750nm D.2001000nmC.200750nm D.2001000nm答案：答案： A A2 2 、符合比尔定律的一有色溶液，当其浓度增大时，、符合比尔定律的一有色溶液，当其浓度增大时，最大吸收波长和吸光度分别是最大吸收波长和吸光度分别是A.A.不变，增加不变，增加 B.B.不变，减少不变，减少C. C.增加，不变增加，不变 D.D.减少，不变减少，不变答案：答案： A A 373

14、 3、下列表述不正确的是：、下列表述不正确的是：A.A.吸收光谱曲线，表明了吸光度随波长的变化关系吸收光谱曲线，表明了吸光度随波长的变化关系B.B.吸收光谱曲线中吸收光谱曲线中, ,最大吸收处的波长为最大吸收波长最大吸收处的波长为最大吸收波长C.C.吸收光谱曲线，以波长为纵坐标吸收光谱曲线，以波长为纵坐标, ,以吸光度为横坐标以吸光度为横坐标D.D.吸收光谱曲线，表明了吸光物质的吸收特性吸收光谱曲线，表明了吸光物质的吸收特性答案：答案： C C4 4、影响有色物质摩尔吸收系数的因素是、影响有色物质摩尔吸收系数的因素是A.A.吸收池厚度吸收池厚度 B.B.入射光波长入射光波长C. C.有色物质溶

15、液的浓度有色物质溶液的浓度 D.D.入射光的强度入射光的强度答案：答案： B B385 5、某有色物质溶液，遵守比尔定律，当其浓度为、某有色物质溶液，遵守比尔定律，当其浓度为c c 时，时，用用1.001.00cmcm比色皿测得其透光度为比色皿测得其透光度为T T，当浓度减小为当浓度减小为0.50 0.50 c c 时，在同样条件下测定，其透光率应为时，在同样条件下测定，其透光率应为A.A.T T 2 2 B.2 B.2T T C. C.T T 1/21/2 D. D.T T / 2/ 2答案：答案： C C lg1/lg1/T T = = b c b c6 6、紫外可见分光光度计在可见区测量

16、时所用光源是紫外可见分光光度计在可见区测量时所用光源是A.A.氢灯氢灯 B.B.钨灯钨灯 C. C.空心阴极灯空心阴极灯 D.D.红外灯红外灯答案：答案： B B39同学们好！同学们好！上课了！大家安静！上课了！大家安静！40朗伯比尔定律朗伯比尔定律6.1 6.1 概述概述bcKbcIIAtOlg吸光光度法吸光光度法 借助于分光光度计来测量一系列借助于分光光度计来测量一系列标准溶液的吸光标准溶液的吸光度度，绘制标准曲线，然后，绘制标准曲线，然后根据被测试液的吸光度根据被测试液的吸光度，从标准曲线上求得被测物质的浓度或含量从标准曲线上求得被测物质的浓度或含量4142将待测组分转化成有色化合物的的

17、反应。将待测组分转化成有色化合物的的反应。 M RMR（络合反应为主）（络合反应为主） （1）选择性好；）选择性好； （2）灵敏度高，）灵敏度高，104； （3）有色化合物）有色化合物MR要稳定，不分解；要稳定，不分解； （4）MR的组成要的组成要恒恒定；定； （5）MR与与R颜色差别大颜色差别大nmRMR6043：助色团助色团NH，OH，X （孤对电子）孤对电子）neO生色团：生色团：NN，CO，OC=S,N （共轭双键）共轭双键）e3 3、显色剂、显色剂与待测组分形成有色化合物的试剂与待测组分形成有色化合物的试剂无机显色剂（不常用）无机显色剂（不常用）2422,MoOOHSCN有机显色剂有

18、机显色剂44常用有机显色剂的类型常用有机显色剂的类型NNOHCOOHSO3HOO型：型：NNNOH OHON型型：PARNH NHNSNS型型：双硫腙双硫腙NN型：型：邻二邻二氮菲氮菲磺基水杨酸磺基水杨酸45nmFe520,max3nmNi470,max2nmFe508,max2CuCu2+2+, Pb, Pb2+2+，ZnZn2+2+, Cd, Cd2+2+, Hg, Hg2+2+nmPb520,max246主要用于测定稀土离子主要用于测定稀土离子nmAl530,max33Tl474 4、多元络合物、多元络合物a a、三元混配络合物、三元混配络合物 用于钒的测定，灵敏度高，选择性好用于钒的测

19、定，灵敏度高，选择性好b b、离子缔合物、离子缔合物 金属离子首先与络合剂生成络阴离子或络阳离子，金属离子首先与络合剂生成络阴离子或络阳离子，然后再与带相反电荷的离子生成离子缔合物然后再与带相反电荷的离子生成离子缔合物c c、金属离子、金属离子络合剂络合剂表面活性剂体系表面活性剂体系 形成胶束化合物，吸收峰向长波方向移动，灵敏形成胶束化合物，吸收峰向长波方向移动，灵敏度显著提高度显著提高d d、杂多酸、杂多酸1 : 1 : 1:22PAROHV48二、显色条件的选择二、显色条件的选择491 1、溶液的酸度、溶液的酸度M + nR = MRnOH-H+M(OH)nHRRH = + H+ 1pH

20、1350适宜酸度通过实验确定，作适宜酸度通过实验确定，作A-pHA-pH曲线确定最佳曲线确定最佳pH（c(M)、 c(R)一定）一定）51实际工作中，作实际工作中，作 A CR 曲线，寻找适宜曲线，寻找适宜 CR 范围范围2、显色剂的用量：、显色剂的用量： M + nR = MRn平台处用量平台处用量52如如SCN-与与Mo() 需严格控制用量需严格控制用量如如SCN-与与Fe3+配位数越高，颜色越深配位数越高，颜色越深需严格控制用量需严格控制用量533、温度的选择、温度的选择实际工作中，作实际工作中，作 A T 曲线，寻找适宜反应温度。曲线，寻找适宜反应温度。4、反应时间的选择、反应时间的选

21、择实际工作中，作实际工作中，作 A t 曲线，寻找适宜曲线，寻找适宜 反应时间。反应时间。2550t /minA545、溶剂：、溶剂：1）降低有色化合物离解度，增加灵敏度）降低有色化合物离解度，增加灵敏度 如在如在Fe(SCN)3的溶液中加入与水混溶的有机试剂的溶液中加入与水混溶的有机试剂（如丙酮），由于降低了（如丙酮），由于降低了Fe(SCN)3的解离度而使颜的解离度而使颜色加深，提高了测定灵敏度。色加深，提高了测定灵敏度。2）提高显色反应的速率，影响有色络合物的溶解度）提高显色反应的速率，影响有色络合物的溶解度和组成和组成 如用氯代磺酚如用氯代磺酚S法测定铌（法测定铌（V），水中需几个小）

22、，水中需几个小时，加入丙酮后只需时，加入丙酮后只需30min556、干扰及其消除：、干扰及其消除：（1）控制溶液酸度；）控制溶液酸度；（2）加入掩蔽剂；）加入掩蔽剂；（3）利用氧化还原反应改变离子的状态；）利用氧化还原反应改变离子的状态；（4）选择适当的波长，要求吸收大，干扰小；）选择适当的波长，要求吸收大，干扰小；（5）选择合适的参比溶液；）选择合适的参比溶液；（6）采用适当的预先分离的方法。）采用适当的预先分离的方法。56选选520nm进行测定进行测定三、测量波长和吸光度范围的选择三、测量波长和吸光度范围的选择1 1、测量波长、测量波长v “ “最大吸收原则最大吸收原则” ” 无干扰无干扰

23、，选选maxmax v”吸收最大，干扰最小吸收最大，干扰最小”：有干扰时有干扰时57 2 2、吸光度范围、吸光度范围 A A 在在0.2-0.80.2-0.8之间（误差最小）之间（误差最小） A A 过大过大, ,稀释或选厚度小的比色皿稀释或选厚度小的比色皿 A A 小小, ,选厚度大的比色皿选厚度大的比色皿cbA58I0It四、参比溶液的选择四、参比溶液的选择A (样样) = A (待测吸光物质待测吸光物质) + A （干扰）干扰）+ A （池）池）A （参比）参比） = A （干扰）干扰）+ A （池）池）59无色无色无吸收无吸收溶剂溶剂蒸馏水蒸馏水有色有色无吸收无吸收吸收吸收不加显色不加

24、显色剂的试液剂的试液无色无色吸收吸收吸收吸收不加试样不加试样溶液的试溶液的试剂空白剂空白有色有色吸收吸收吸收吸收吸收吸收显色剂显色剂 + 试液试液 + 待测组分待测组分的掩蔽剂的掩蔽剂试液试液显色剂显色剂吸光物质吸光物质参比液参比液60五、标准曲线的制作1 1、制作依据：比尔定律、制作依据：比尔定律 A A = =KbcKbc 吸光度与吸光物质的含量呈正比关系吸光度与吸光物质的含量呈正比关系2 2、制作方法：、制作方法：1 1）在选择的实验条件下，从低浓度到高浓度分别测量一系）在选择的实验条件下，从低浓度到高浓度分别测量一系列（不少于列（不少于5 5）不同含量的标准溶液的吸光度）不同含量的标准

25、溶液的吸光度2 2）以标准溶液中）以标准溶液中待测组分的含量为横坐标，吸光度为纵坐待测组分的含量为横坐标，吸光度为纵坐标标作图，得到一条通过原点的直线，称为标准曲线（或作图，得到一条通过原点的直线，称为标准曲线（或工作曲线）。工作曲线）。3 3）再测量待测溶液的吸光度，在标准曲线上就可以查到与）再测量待测溶液的吸光度，在标准曲线上就可以查到与之相对应的被测物质的含量。之相对应的被测物质的含量。61 0 1.0 2.0 3.0 4.0 c(mg/mL)A。 。 。 。*0.800.600.400.200.00Axcx626.3.1 对朗对朗伯伯比耳定律的偏离比耳定律的偏离6.3.2 吸光度测量的

26、误差吸光度测量的误差636.3 6.3 光度分析法的误差光度分析法的误差一、对朗伯一比尔定律的偏离一、对朗伯一比尔定律的偏离64iKAA或或 1 2 1 对应的对应的 1较小较小 2 对应的对应的 2较大较大1 1、非单色光引起的偏离、非单色光引起的偏离（单色光不纯）（单色光不纯）651 1、非单色光引起的偏离、非单色光引起的偏离A A 提高单色器的精度提高单色器的精度某一波段的复合光某一波段的复合光B B 使用最大吸收波长测定使用最大吸收波长测定，提高灵敏度，减少对朗伯，提高灵敏度，减少对朗伯 一比尔定律的偏离。一比尔定律的偏离。C C 选择适当的浓度范围选择适当的浓度范围2 2、介质不均匀

27、引起的偏离介质不均匀引起的偏离 在分析中避免溶液产生胶体和浑浊，发生散射在分析中避免溶液产生胶体和浑浊，发生散射损失，使透射比减少损失，使透射比减少663、由于溶液本身的化学反应引起的偏离、由于溶液本身的化学反应引起的偏离 控制溶液条件，使被测组分以一种形式存在控制溶液条件，使被测组分以一种形式存在67100806040200T/% c1 c2 c3 T T T-透光率读数误差透光率读数误差 c c1c1 c2c2 c3c3 由于由于T 与浓度与浓度c 不是线性关系，不是线性关系，故不同浓度时故不同浓度时的仪器读数误的仪器读数误差差T 引起的引起的测量误差测量误差 c/c不同。不同。二、吸光度

28、测量误差68仪器测量误差公式推导吸光定律吸光定律cbA根据误差传递公式，有根据误差传递公式，有 cdcAdATAlg又又Tln434.0TdTdA434. 0TTdTAdAlnTTdcdcETrln得得浓度测量的浓度测量的相对偏差相对偏差得得T = 0.368 = 36.8 %A = 0.434 此时，此时，仪器测量误差最小仪器测量误差最小为了减少测量误差，控制溶液的为了减少测量误差，控制溶液的吸光度吸光度 A = 0.2 0.8T = 65 15 %0)ln(TT令令691 1、以、以M M 表示被测物质的摩尔质量，则摩尔吸收系数表示被测物质的摩尔质量，则摩尔吸收系数 与吸光系数与吸光系数K

29、 K 之间的关系为之间的关系为A A。 =K K / /MM B B。 =KMKMC C。 =KM KM /1000 D/1000 D。 =(=(K K/ /M M ) ) 10001000答案：答案： B B2 2、在光度分析中，选择参比溶液的原则是、在光度分析中，选择参比溶液的原则是A A。一般选蒸馏水一般选蒸馏水B B。一般选试剂溶液一般选试剂溶液C C。根据加入试剂和被测试液的颜色性质选择根据加入试剂和被测试液的颜色性质选择D D。一般选褪色溶液一般选褪色溶液答案：答案： C C71 3、下列几组吸光度范围，测量相对误差较小的是 A。0.20.8 B。0.10.8 C。0.30.6 D

30、。0.20.6 答案： C 4、下列表述中错误的是 A。吸收峰随浓度增加而增高，但最大吸收波长不变 B。透射光与吸收光互为补色光，黄色和兰色互补 C。比色法又称分光光度法 D。在公式A =bc 中， 称摩尔吸收系数，其数值越大，反应越灵敏 答案： C72 5 5、某有色物质溶液的吸光度值较小时，则表明、某有色物质溶液的吸光度值较小时，则表明 A。该物质的浓度较小 B。该物质摩尔吸收系数较小 C。所用比色皿较薄 D。上述三者都可能 答案： D 6、一有色溶液在一定波长下，测定其吸光度为0.740，如果溶液及比色皿都减小一半，则其吸光度为 A。2.96 B。0.740 C。0.370 D。0.18

31、5 答案： D73献给勤奋学习的同学们！献给勤奋学习的同学们！746.4.1 示差吸光光度法示差吸光光度法6.4.2 双波长吸光光度法双波长吸光光度法6.4.3 弱酸和弱弱酸和弱碱碱解离常数的测定解离常数的测定6.4.4 络合物组成的测定络合物组成的测定756.4 其它吸光光度法和光度分析法应用普通光度法是采用普通光度法是采用空白溶液作为参比溶液，调吸光度为零空白溶液作为参比溶液，调吸光度为零。示差法是采用示差法是采用比待测溶液浓度稍低的标准溶液显色后作参比液，比待测溶液浓度稍低的标准溶液显色后作参比液，调吸光度为零，调吸光度为零，那么测得的试液吸光度那么测得的试液吸光度A A，实际是两者吸光

32、度之，实际是两者吸光度之差差A A ，它与两者的浓度之差它与两者的浓度之差C C 成正比。成正比。设由普通法测得：设由普通法测得： 浓度稍低标准溶液浓度稍低标准溶液 obcA0:xxbcA:待测1、 方法原理（以高浓度示差法为例）方法原理（以高浓度示差法为例）一、示差吸光光度法一、示差吸光光度法76调调A0为零后实测：为零后实测： cbccbAAAAxx)(00相对配标准系列：配标准系列： 404303202101,CCCCCCCCCCCC以以C C0 0为参比测得为参比测得A A1 1, ,A A2 2, ,A A3 3, ,A A4 4，作作A A - - C C 标准曲线，设待测液为标准

33、曲线，设待测液为A Ax x ，根据标准曲线查得浓，根据标准曲线查得浓度为度为C C ，则待测液浓度为，则待测液浓度为C C0 0+ + C C772、示差吸光光度法误差、示差吸光光度法误差示差法测定时，读数落在测量误差较小的区域，因此提高了示差法测定时，读数落在测量误差较小的区域，因此提高了测量的准确度。测量的准确度。 普通法测得参比溶液透射比为普通法测得参比溶液透射比为10%10%，待测液是，待测液是7%7%，在示差法，在示差法中将参比溶液透射比从中将参比溶液透射比从10%10%调至调至100%100%（即（即A=0A=0），），就意味着就意味着将仪器透射比扩展了将仪器透射比扩展了1010

34、倍，那么此时待测液透射比将是倍，那么此时待测液透射比将是70%70%。 78例例称钢样称钢样0.500g，溶解溶解MnO4-50mL容量瓶，摇容量瓶，摇匀，从中取匀，从中取5.00mL50mL容量瓶定溶，用容量瓶定溶，用2cm比色比色皿在皿在525nm，=2235，测测A=0.124，计算计算Mn%=？(Mn=54.94) 解解 A 0.124 c2= = = 2.7710-5mol/L b 22352 Mn c2 50 1000 Mn%= 100=0.152 5.00 0.500 5079bcA111:bcA222:bcAAA)(2121光光源源单色器单色器单色器单色器检测器检测器切切光光器

35、器狭狭缝缝吸吸收收池池二、双波长吸光光度法二、双波长吸光光度法1 1、 方法原理：方法原理：使两束不同波长的单色光交替的照射同一吸收池，测量并记使两束不同波长的单色光交替的照射同一吸收池，测量并记录两者吸光度的差值录两者吸光度的差值A A，根据，根据A A与吸光物质浓度与吸光物质浓度c c成正比成正比进行定量分析，可以消除试液与参比液及两个吸收池之间的进行定量分析，可以消除试液与参比液及两个吸收池之间的差异所引起的测量误差，消除干扰差异所引起的测量误差，消除干扰802、 双波长吸光光度的应用双波长吸光光度的应用混浊试液中组成的测定。混浊试液中组成的测定。单组分测定单组分测定两组分共存时的分别测

36、定两组分共存时的分别测定21AAA）（yxyxAAAA2211)(yyAA21xxAAA21xxxbCA）（21 2A 1XYY 的存在不干扰的存在不干扰 X 的测定的测定81三、弱酸弱碱解离常数的测定三、弱酸弱碱解离常数的测定设在某波长下，设在某波长下，HB和和B-均有吸收，液层厚度均有吸收，液层厚度b=1cm。根据吸光度的加和性根据吸光度的加和性 lg,BHBpHpKHBBHKBHHBaaBHBAAABHBBHBHKcKHKcHaaBaHB在高酸度时，主要以在高酸度时，主要以HB形式存在形式存在cHBAHBHBHBcAHBHB82在强碱性时，主要以在强碱性时，主要以B B- -型体存在，这

37、时型体存在，这时cBABBBcABB代入上式并取负对数得：代入上式并取负对数得： BHBaAAAApHpKlgA A为某一确定为某一确定pHpH时溶液的吸光度，可由时溶液的吸光度，可由n n个个pHpH不同的溶液求得不同的溶液求得n n个个pKapKa，取其平均值。，取其平均值。aBHBaaaBaHBKAHAHKAHKKAHKHAA)(83原式变换为：原式变换为： aBHBpKpHAAAAlg以以 为纵坐标，以为纵坐标，以 为横坐标作图，曲为横坐标作图，曲线与横轴的交点即为线与横轴的交点即为 BHBAAAAlgpH解离常数也可由图解法求出解离常数也可由图解法求出apk84四四 多组分分析：多组

38、分分析：以两组分为例以两组分为例1、吸收光谱不重叠：、吸收光谱不重叠：同单组分同单组分2、吸收光谱重叠：、吸收光谱重叠：列方程组求解列方程组求解在在1处：处： 在在2处：处： BBAABAbcbcA111BBAABAbcbcA22285五、络合物组成的测定1、摩尔比法（饱和法）：、摩尔比法（饱和法）：1）常适用于离解度小，组成比高的配合物）常适用于离解度小，组成比高的配合物2）方法：）方法： M+nRMRn 配置一系列配置一系列M一定、一定、R不同的溶液的吸光度，以相应的不同的溶液的吸光度，以相应的试剂空白为参比，分别测定其吸光度值，绘制试剂空白为参比，分别测定其吸光度值，绘制A R/M图。运用外推法求得一交点，从交点向横坐标做垂线，对图。运用外推法求得一交点，从交点向横坐标做垂线，对应应R/M即为络合物络合比即为络合物络合比N86固定固定cM