16S鉴定细菌的种属_第1页
16S鉴定细菌的种属_第2页
16S鉴定细菌的种属_第3页
16S鉴定细菌的种属_第4页
16S鉴定细菌的种属_第5页
已阅读5页，还剩26页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、2021/6/161利用16S rDNA鉴定细菌的种属1.什么是 16S rDNA？ 16SrRNA为原核生物核糖体RNA的一个亚基，16SrDNA就是编码该亚基的基因。 原核生物的rRNA含有3种类型：23S、16S、5S rRNA，它们分别含有2900、1540和120个核苷酸。2.用16S rDNA进行细菌鉴定的原因 16S rDNA在原核生物中普遍存在。 16 S rDNA的相对分子量大小适中，约1500 bp，便于序列分析。 在16S rRNA分子中， 既含有高度保守的序列区域，又有中度保守和高度变化的序列区域，因而它适用于进化距离不同的各类生物亲缘关系的研究。 bp=base pa

2、ir 图16SrDNA基因组成（灰色为保守区，绿色为可变区）16S rDNA基因全长1542 bp，由9个可变区和10个保守区组成。其中保守区反映了生物物种间的亲缘关系，而可变区则表明物种间的差异，且变异程度与细菌的系统发育密切相关。DNA的提取 挑取单菌落,然后置于装有100 LPrepMan Ultra的离心管中,涡旋震荡混匀30s左右，然后100水浴10min 后，以离心机最大转速离心3min，取10L上清液与490L ddH2O（即稀释50 倍），混匀作为下步PCR 的模板DNA 。提取的DNA 于-20保存。检测：核酸蛋白仪/琼脂糖凝胶电泳1525R 5 AAG GAG GTG WT

3、C CAR CC 3PCR 反应条件反应条件试剂使用量（试剂使用量（ 20L体系）体系）模板模板DNA （10ng100ng） 2LTaq 酶酶(5U/L) 0.2 L10Taq Buffer(Mg2+) 2 LdNTPs(2.5mM) 1 L引物引物F(10 M) 0.5 L引物引物R(10 M) 0.5 LddH2O 13.8 L1min30s判断16Sr DNA序列扩增是否成功:经琼脂糖凝胶电泳在1500 bp附近出现条带，说明16s rDNA已经扩增成功。/2021/6/16142021/6/16152021/6/16162021/6/16172021/6/16182021/6/16192021/6/16212021/6/16222021/6/16232021/6/16242021/6/16252021/6/16262021/6/16272021/6/16

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 辅导培训

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论