乙型肝炎病毒抗体诊断胶体金法SOP标准操作程序1.doc

1、乙型肝炎病毒抗体诊断（胶体金法sop）测定标准操作程序编写者：宿金涛 日期：2012年3月1日一. 原理：乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒（胶体金法）采用胶体金免疫层析分析技术、将五个诊断意义相关的试剂通过一个包装组合在一起，同时进行乙型肝炎病毒五项标志物的检测，在不影响各自性能的情况下，便于客户的储存和使用。hbsag检测试剂采用双抗体夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区(t)的抗体。测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的抗hbsag抗体 反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先于标本中的hbsag

2、结合，随后家何物会被固定在膜上的抗hbsag抗体结合，在测试区内（t）会出现一条紫红色带。这条带是hbsag抗体-hbsag-hbsag抗体金标粒子的复合物在膜上结合形成的。如是阴性，则测试区内（t）将没有紫红色带。无论hbsag是否存在于标本中，一条紫红色带都会出现在指控内（c）。质控区内（c）所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。hbsab检测试剂双抗原夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（t）的乙肝表面抗体。测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的hbsag反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，胶体金

3、抗体在层析过程中先于标本中的hbsag结合，随后结合物会被固定在膜上的hbsag抗体结合，在测试区内(t)会出现一条紫红色条带。这条带是hbsag-hbsab-hbsag金标粒子的复合物在膜上结合形成的。如果阴性，则测试区内(t)将没有紫红色条带。无论hbsag是否存在于标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内(c)。质控区内(c)所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。hbeag检测试剂采用双抗体夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（t）的乙肝e抗体。测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的hbeag抗体反应。然后，混合物

4、随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先于标本中的hbeag结合，随后结合物会被固定在膜上的hbeag抗体结合，在测试区内(t)会出现一条紫红色条带。这条带是hbeag抗体-hbeag-hbeag抗体金标粒子的复合物在膜上结合形成的。如果阴性，则测试区内(t)将没有紫红色条带。无论hbeag抗体是否存在于标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内(c)。质控区内(c)所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。hbeab,hbcab检测试剂才有竞争抑制法，试剂含有被事先固定于膜上测试区(t)的抗体。测试时，血清或血浆标本滴入试剂加

5、样处，随之标本在毛细效应下向上层析。如标本中含有相应的抗体，则同膜上测试区(t)的抗体竞争与预包被在金标粒子的相应抗体反应。如果标本中没有相应抗体，预包被在金标粒子的复合物的相应抗原则同膜上测试区(t)的抗体全部结合。阳性标本，测试区内(t)将没有紫红色条带，阴性标本，测试区内(t)将会出现明显的紫红色条带。无论相应的抗体是否存在于标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内(c)。质控区内(c)所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。二. 试剂：英科新创乙肝五项检测卡（胶体金法）。规格为25人份/盒。产品标准编号：yzb/国0378-2009。三

6、.操作步骤：1、将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温（1825）并编号。2、将胶体金测试卡从包装盒中取出，打开铝箔包装袋，平置于台面上。编号（与样品相对应）；3、用塑料滴管加2-3滴样本血清或血浆，加入试剂板的五个加样孔。4、等待紫红色条带的出现，测试结果应在测定开始后20分钟开始读取。30分钟后判断无效。四. 参考范围：正常人为阴性。五、结果判定 hbsag hbsab hbeag 阳性：两条紫红色条带出现。一条位于测试区（t）内，另一条位于质控区（c）。阳性结果表明：标本中含有待测物质。阴性：仅质控区（c）出现一条紫红色条带，在测试区（t）内无紫红色条带出现。阴性结果表明：标本中检测不出

7、待测物质无效：质控区（c）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂已变质损坏。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。注意：测试区（t）内的紫红色条带可显现出颜色深浅的现象。但是，在规定的观察时间内，不论该色带颜色深浅，即使只有非常弱的色带也应判定为阳性结果。hbeab hbcab阳性：仅质控区（c）出现一条紫红色条带，在测试区（t）内无紫红色条带出现。阳性结果表明：标本中含有待测物质。阴性：两条紫红色条带出现，一条位于测试区（t）内，另一条位于质控区（c）。阴性结果表明：标本中检测不出待测物质。无效：质控区（

8、c）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂已变质损坏。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。六临床意义： 乙肝肝炎病毒引起的感染带来了严重的公共卫生问题。母婴传播、性传播和血液传播是最主要的传播途径。尽早的发现感染可以有效的减少疾病的传播。 乙肝五项检测卡（胶体金法）定性检测人血清、血浆中的乙肝表面抗原、表面抗体、e抗体、核心抗体、用于乙型肝炎病毒感染的辅助诊断。七. 病人及样本要求： 1、本品适用于血清、血浆样本，血浆样本对临床常用抗凝剂（edta、肝素、枸椽酸钠）无要求；样本的采集须遵循常规的医疗样本的

9、采集方法并遵守相关的医学规定。 2、采集静脉血样本必须在无菌条件下操作，并避免样品溶血。 3、如果血清和血浆样品收集后7天内检测，样品须放在2-8保存；大于7天须20以下冷冻保存。 4、溶血、粘稠及高脂标本不适于本试剂。含特珠物质（如强氧化剂）的标本可能会导致检测结果不稳定，在检测前须清除。八. 注意事项：1、 检测必须符合实验室管理规范和物物安全守则的规定，操作时必须戴手套、穿工作服、严格健全和执行消毒隔离制度。2、 乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒（胶体金法）适用于测试血清或血浆标本，其他标本或溶液进行检测可能出现异常结果。3、 由于在技术上和操作上可能出现的失误，同时也由于标本中存在干扰物质，检测结果有可能错误。4、 请保证适量的标本用于检测，过多或过少的标本量都有可能导致结果的偏差。5、 测试结果应在测定开始后20分钟读取，30分钟后判定无效。6、 本产品为目视读取结果，为保证判定结果的正确，请勿在光线昏暗处对结果进行判读。7、 试剂可在室温下保存，谨防受潮。低温下保存的试剂应平衡到