色谱仪器分析简介.doc

1、1、简述光电二极管阵列检测器在高效液相色谱中的应用1）色谱峰的纯度检查2）色谱峰的鉴定3）谱带宽度检测4）峰抑制5）选择最佳波长2、简述如何采用二极管阵列检测器检查色谱峰的纯度1）比较光谱法：对于纯物质峰来说，在色谱峰范围内任何洗脱时间处所取的光谱图应该是一直的， 对于非纯物质峰来说， 在色谱峰的不同部位得到的吸收光谱中，吸收最大值发生了位移。2）吸收比法：对于纯物质，两个特定波长处的吸收比为常数，与浓度无关3）双波长法：记录被测组分在两个等吸收波长处的吸收值差对时间色谱法，纯物质峰应该得到一个零信号，否则证明峰有杂志存在。3、试述影响色谱峰展宽的柱内柱外因素答：柱内因素速率理论1）涡流扩散项

2、和填料的均匀程度有关填充颗粒越小，越均匀峰展宽越小。2）纵向扩散项 试样分子在色谱柱内被流动相带向前时， 由分子本身运动引起的扩散会引起峰展宽。流速下降，纵向扩散项增加，理论塔板高度增加，峰展宽。3）传质阻力项流速越快阻力越大峰展宽。柱外因素1）尽量减少连线管线的长度，并采用细内径的管线为连接线。2）采用死体积小的检测器。3）避免溶剂效应。进样时，使溶解待测物的溶剂为流动相或洗脱能力比流动相小的弱溶剂。进样体积越大，柱外效应越大。）采用合适的进样方式和技术44、试述制备气相色谱法填充柱的一般流程和注意事项1）固定液的涂布：要选择合适的溶剂，选择固定液与担体的配比，选择担体的粒度越细柱效越高2）

3、柱管预处理：不锈钢管耐用，但不适用对金属离子不稳定药物的分析，玻璃管易碎，但无金属离子的催化活性3）色谱柱填充及老化：一般多用抽气减压法填充色谱柱，新充好的色谱柱需老化后才能使用5、何谓衍生化技术？其在气象色谱分析中有何应用特点以及三种常见衍生化反应？定义：衍生化技术是药物分析中常用的一种分析手段， 是将药物先进行结构改造，再进行色谱分析的方法，称之为衍生化技术。目的（应用特点）：1）使原来不挥发或挥发差的被测组分转变成具有一定挥发性的化合物，降低沸点以适应气相色谱分离的要求2）降低被测组分的极性，减小或消除拖尾和吸附现象3）改变样品中被测组分或干扰组分的理化性质，以改进分离特性4）产生特殊性

4、质，使待测组分在特定检测器上具备或提高检测特性，以达到痕量分析的目的。5）在与其他一起连用技术中，利用各类衍生化反应能获得更明确或特定的结构信息。常用反应种类：1）硅烷化反应2）酯化反应3）酰化反应）卤代衍生化法 46、试述气相色谱仪使用时的一般流程及注意事项流程：1）打开气相色谱仪电源开关，待自检完毕显示正常后，打开气相色谱工作站2）打开载气的气源阀门，控制载气流速3）在工作站或仪器中输入分析参数4）检查参数无误后，运行仪器5）各项参数达到预设值后，分析样品6）实验结束后，先关加热装置，降温后关载气7）最后关闭仪器电源，工作站注意事项：1）开机前检查是否漏气2）用微量注射器取试样要洗涤，如有

5、气泡则针头朝上排气泡3）关闭气源时，先关减压阀，后关钢瓶阀门4）开启热导检测器前必须通载气，试验结束先关电源后关载气5）保持每次进样的平行性6）进样前，通载气再升温，结束后，降温后再关载气7）通常柱温比固定液最高稳定低30°，检测器温度至少比柱温高30°，气化室温度通常与检测器温度相同。HPLC仪的基本操作步骤：1）操作前的准备工作2）开启稳压电源后，依次打开输液泵、柱温箱、检测器和色谱处理机电源3）在输液泵及检测器上设定所需要的流速、检测波长等参数）排除管路气泡或冲洗管路45）按 pump键，设定输液泵以低流速泵出流动相6）待检测器预热后，打开色谱工作站，开始走基线。基线

6、平稳后进样。7）进样，同时采集数据并记录8）试验后关闭电源，卸下色谱柱。7、色谱法的系统适用性试验通常要考察哪些因素， 这些因素应如何评价或计算，标准如何？1）色谱柱的理论塔板数：在选定的条件下，用对照品或内标计算色谱柱的理论塔板数 n。若达不到规定的理论塔板数，应改变色谱柱的某些条件，是理论塔板数达到要求。2）分离度： 定量分析时，为便于准确测量，要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的分离度。 规定， R应大于 1.53）拖尾因子： 为保证测量精度，特别当采用峰高法测量时，应检查待测物峰的拖尾因子（ T）是否符合该品种项下的规定，或不同浓度进样的校正因子误差是否符合要求。 T 应在 0.95

7、-1.054）重复性： 取各种项下的对照品溶液，连续进样 5 次，其峰面积测量值的相对标准偏差应不大于 2.0%8、简述反相离子对色谱的分离原理， 并对影响溶质保留值的各个因素加以讨论？离子对色谱法：是用正相或反相色谱柱分离离子型化合物和可解离化合物的方法。原理：反相离子对色谱法是把离子对试剂加到极性流动相中， 被分析的样品离子在流动相中与离子对试剂生成不带电荷的中性离子对， 从而增加了样品离子在非极性固定相中的溶解度，使分配系数增加，改善分离效果。影响因素：1）流动性的 pH 值：一般 pH 在 27.5 ，对酸性样品， pH一般控制 pKa+2的流动相，碱性则 pKa-2）离子对试剂的类型

8、：通常选用与被测样品电荷相反的离子对试剂23）离子对试剂的浓度：当流动相中离子对试剂的浓度增加，被固定相媳妇的离子对试剂的浓度也增加，直至固定相上离子对试剂饱和4）有机改性剂的性质和浓度：增加流动相有机溶剂的比例，吸附在固定相上的离子对试剂减少， 因为可以选择性的降低离子性化合物的保留， 有机溶剂的比例越高， k 越小。9、三类手性高效液相色谱分离法之比较？柱前衍生化法（ CDR）：优点是：价格便宜，柱效高的非手性柱引入发色基团，可提高检测灵敏度衍生化伴随样品纯化； 缺点是：手性衍生化试剂需有高光学纯度外消旋化反应速度不同，反应烦琐费时。手性流动相法（ CMP）：不必柱前衍生化；无需昂贵的手性

9、柱，简便易行非对映异构化，络合具有可逆性；缺点：可拆分的化合物有限；某些添加剂不够稳定，干扰测定大量手性添加剂的使用，增加费用。手性固定相法 （CSP）：适用于不含活泼反应基团的化合物； 无需高光学纯度试剂样品处理简单，制备分离方便应用广泛，可分离上万种化合物，定量准确度高。缺点：有时也需柱前衍生化； 适用性差，不如普通的 HPLC柱，CSP商品柱昂贵。10、分析碱性药物， 采用 RP-HPLC特别是 ODS分离会出现什么问题？解释原因？要分离该物质，在选择流动相可从哪些方面入手？出现问题：会出现色谱峰拖尾、分离效能下降、保留时间过长的问题。原因：亲硅醇基效应所致解决方法：1）向流动相添加小分

10、子有机胺2）使用离子对技术）添加缓冲液 3或者：出现问题：色谱峰裂分或多重峰原因：进样后游离药物与质子化的药物在流动相中重新平衡所致解决办法：1）用流动相溶样后再进样2）调整进样溶液的pH值11、梯度洗脱的步骤1）色谱分离预试验的建立2）梯度洗脱方式的选择3）调整梯度范围4）调整选择性和分离度5）改变色谱柱条件的比较： APCI和 ESI、12适合的样品类型：前者是高极性化合物、 蛋白质、太累、低聚核苷酸等生物分子，胺类、季铵盐等，含杂原子化合物如氨基甲酸酯等；后者是弱极性 / 中等极性的小分子，含杂原子化合物如氨基甲酸酯。不适合的样品类型：非极性化合物；热稳定性差的样品介质和流动相的影响：

11、更敏感，对挥发性强的缓冲溶液要求较低的浓度， 易出现钠离子、钾离子等加合离子； 要求比 ESI 低，对挥发性强的缓冲溶液可使用高的浓度，流动相中水的比例不限。溶剂： pH有较大的影响；有机溶剂的选择很重要并影响离子化效率和产物， pH 有一定的影响。13、基质效应、残留效应的定义与消除。基质效应：是指由于样品中存在的干扰物质，对响应造成的直接或间接的影响。消除：1）优化改进样品的提取制备方法2）优化色谱条件3）减少进样体积4）优化质谱分析条件5）选择合适的内标残留效应：连续分析高浓度样品之后， 进空白样品或者空白流动相，看样品峰是否有响应。消除：1）更换洗针液（ 50%甲醇）2）清洗自动进样器

12、的针座（100%甲醇）14、试述液 - 固吸附色谱法常用的固定相及保留机理常用固定相： 1. 硅胶 2. 氧化铝保留机理：在吸附色谱体系中， 溶剂分子和溶质分子均能被吸附于吸附剂的活性位点上，当流动相流过固定相时， 样品组分分子和流动相分子竞争吸附剂表面活性吸附中心，同时，样品中不同组分分子也在竞争吸附中心。毛细管柱气相色谱的气路与填充柱气相色谱的气路有何不同，为何？进样系统不同。 毛细管气相色谱有分流进样系统， 填充柱不分流。 分流时先将较大体积的样品量注入到气化室中， 样品气化后和载气混合均匀， 通过分流器， 样品被分流为流量相差悬殊的两部分， 其中流量较小的部分直接进入色谱柱， 流量较大

13、的部分放空。不会超载。填充柱没有分流过程。请写出分离度与柱效、 分离因子等因素的关系式， 并对影响分离度的这些因素详加讨论分离度方程n 为理论塔板数 a 为相对保留值之比 ,a>1 柱效项预理论塔板数相关， 柱选择项主要受色谱柱性质影响，柱容量项主要受柱温左右。 k 变小，谱带流出较早，分离度变差， k 变大，分离度增加。但是当 k=5-6 时，对分离度的贡献已基本达到最大，再增加对分离度已无多大贡献。 在毛细管气相色谱中，色谱柱内径与固定液膜厚如何影响载样量和柱效？固定液膜厚度减小可以大幅度提高色谱柱柱效，内径减小可以大幅度提高柱效。内径和膜厚增大，载样量增大。梯度洗脱的步骤1. 色谱

14、分离预试验的建立2. 梯度洗脱方式的选择3. 调整梯度范围4. 调整选择性和分离度5. 改变色谱柱条件程序升温色谱法的优点：1. 可使低沸点组分与高沸点组分同时得到有效的检测2. 改善了色谱峰形，提高了检测灵敏度缩短了分析时间 3.4. 较快的除去了柱中杂志，便于下个样品的分析。Mobile phase 流动相Retention time保留时间Number of theoretical plates理论塔板数Reverse phase chromatography（RPC）反相色谱法Ion-suppression technique离子抑制技术Programmed temperature G

15、C 程序升温气相色谱法Stationary phase固定相Normal phase chromatography正相色谱法Molecular diffusion分子扩散项拖尾因子T=W0，0.5/2d1W0，0.5 ：0，0.5 峰高处峰宽2d1：峰高极大至峰前没的距离分流比分流比 =Fc/F 分流Fc：样品同股票分流进样器进入柱子的流量F 分流：通过分流器放空的流量表面覆盖度：表面覆盖度 =单位表面键合有机物基团的微摩尔数/ 单位表面含有可反映硅醇基的微摩尔数 =/8.3 。：表面键合相浓度（=W/MS）梯度洗脱：在洗脱过程中不断改变流动相的组成，如溶剂的极性、离子强度、 pH 值等条件的

16、洗脱方式。理论塔板数n=16（tR/W）2W：峰宽理论塔板高度H=L/nL：色谱柱长n：每米的理论塔板数容量因子（分配比或分配容量） ：k=Ms/MmMs：组分在固体相中的质量Mm：组分在流动相中的质量分配系数：K=被分离组分在固体相的浓度 / 被分离组分在流动相 的浓度 =Cs/Cm Cs：每毫升固体相中溶解组分的质量Cm：每毫升流动相中溶解粟粉的质量保留体积：VR=tR*FctR ：保留时间：流动相的流速 FcVan Deemter 曲线方程：H=A+B/u+CuH：板高u：流动相的平均线速度A：涡流扩散项B：分子扩散项C: 传质阻力项死时间：tM=L/uL：柱长u：流动相的平均线速度程序

17、升温Tc=To+rtTc：柱温To：起始温度r ：升温速率 t ：升温时间化学键合相：借助于化学反应的方法将有机分子以共价键连接在色谱担体上而获得的固定相称为化学键合相表面键合相浓度 =W/M*SW：1g 担体上键合有机官能团的质量M：键合有机官能团的摩尔质量S: 担体比表面积分流进样：先将较大体积的样品量注入到气化室中， 样品气化后和载气均匀混合，通过分流器，样品被分流成流量相差悬殊的两部分， 流量小的部分直接进入色谱柱，流量大的部分部分放空不分流进样： 在进样前分流阀将分流气路关闭， 等待 3080 秒，使气化的样品基本进入毛细管柱或大部分进入毛细管柱后， 打开分流气路， 残留在气化室中的

18、样品蒸汽通过分流气路放空。气相色谱住中固定液的液膜越厚，色谱保留越大，传质速率越慢毛细管气相色谱法与填充柱气相色谱法气路的不同之处在于毛细管气相色谱法的气路有分流和尾吹气，原因在于 1. 防止超载 2. 防止峰展宽高效液相色谱法中， 常用的流动相脱气的方法有减压脱气法、 吹氦脱气法和超声脱气法气相填充柱制备时， 柱子的两端用玻璃棉封口， 柱子老化的目的是除去填料中残余溶剂和固定液中带来的低分子聚合物0.951.05中华药典规定拖尾因子合格范围在简述光电二极管阵列检测器在高效液相色谱中的应用1. 色谱峰的纯度检查2. 色谱峰的鉴定3. 谱带宽度检测4. 峰抑制5. 选择最佳波长试述影响色谱峰展宽

19、的柱内柱外因素答：柱内因素速率理论1. 涡流扩散项 和填料的均匀程度有关 填充颗粒越小，越均匀峰展宽越小。2. 纵向扩散项 试样分子在色谱柱内被流动相带向前时，由分子本身运动引起的扩散会引起峰展宽。流速下降，纵向扩散项增加，理论塔板高度增加，峰展宽。3. 传质阻力项 流速越快 阻力越大 峰展宽。柱外因素1. 尽量减少连线管线的长度，并采用细内径的管线为连接线。2. 采用死体积小的检测器。3. 避免溶剂效应。 进样时，使溶解待测物的溶剂为流动相或洗脱能力比流动相小的弱溶剂。4. 采用合适的进样方式和技术 进样体积越大，柱外效应越大。试述制备气相色谱法填充柱的一般流程和注意事项1. 固定液的涂布：

20、 要选择合适的溶剂， 选择固定液与担体的配比， 选择担体的粒度越细柱效越高2. 柱管预处理：不锈钢管耐用， 但不适用对金属离子不稳定药物的分析， 玻璃管易碎，但无金属离子的催化活性3. 色谱柱填充及老化： 一般多用抽气减压法填充色谱柱， 新充好的色谱柱需老化后才能使用何谓衍生化技术？其在气象色谱分析中有何应用特点以及三种常见衍生化反应？定义：衍生化技术是药物分析中常用的一种分析手段，是将药物先进行结构改造，再进行色谱分析的方法，称之为衍生化技术。目的（应用特点）：1. 使原来不挥发或挥发差的被测组分转变成具有一定挥发性的化合物，降低沸点以适应气相色谱分离的要求2. 降低被测组分的极性，减小或消

21、除拖尾和吸附现象3. 改变样品中被测组分或干扰组分的理化性质，以改进分离特性4. 产生特殊性质， 使待测组分在特定检测器上具备或提高检测特性， 以达到痕量分析的目的。5. 在与其他一起连用技术中， 利用各类衍生化反应能获得更明确或特定的结构信息。常用反应种类：1. 硅烷化反应2. 酯化反应3. 酰化反应4. 卤代衍生化法试述气相色谱仪使用时的一般流程及注意事项流程：1. 打开气相色谱仪电源开关，待自检完毕显示正常后，打开气相色谱工作站2. 打开载气的气源阀门，控制载气流速3. 在工作站或仪器中输入分析参数4. 检查参数无误后，运行仪器5. 各项参数达到预设值后，分析样品6. 实验结束后，先关加

22、热装置，降温后关载气7. 最后关闭仪器电源，工作站注意事项：1. 开机前检查是否漏气2. 用微量注射器取试样要洗涤，如有气泡则针头朝上排气泡3. 关闭气源时，先关减压阀，后关钢瓶阀门4. 开启热导检测器前必须通载气，试验结束先关电源后关载气5. 保持每次进样的平行性6. 进样前，通载气再升温，结束后，降温后再关载气7. 通常柱温比固定液最高稳定低 30°，检测器温度至少比柱温高 30°，气化室温度通常与检测器温度相同。简述如何采用二极管阵列检测器检查色谱峰的纯度1. 比较光谱法：对于纯物质峰来说， 在色谱峰范围内任何洗脱时间处所取的光谱图应该是一直的，对于非纯物质峰来说，

23、在色谱峰的不同部位得到的吸收光谱中，吸收最大值发生了位移。 2. 吸收比法：对于纯物质，两个特定波长处的吸收比为常数，与浓度无关3. 双波长法：记录被测组分在两个等吸收波长处的吸收值差对时间色谱法， 纯物质峰应该得到一个零信号，否则证明峰有杂志存在。色谱法的系统适用性试验通常要考察哪些因素， 这些因素应如何评价或计算， 标准如何？1. 色谱柱的理论塔板数 在选定的条件下，用对照品或内标计算色谱柱的理论塔板数 n。若达不到规定的理论塔板数，应改变色谱柱的某些条件，是理论塔板数达到要求。2. 分离度 定量分析时，为便于准确测量，要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的分离度。 规定， R应大于 1.

24、53. 拖尾因子 为保证测量精度，特别当采用峰高法测量时，应检查待测物峰的拖尾因子（ T）是否符合该品种项下的规定，或不同浓度进样的校正因子误差是否符合要求。 T 应在 0.95-1.054. 重复性 取各种项下的对照品溶液，连续进样 5 次，其峰面积测量值的相对标准偏差应不大于 2.0%离子对反相色谱法的应用（设计流动相）及影响药物反相离子对色谱保留的因素？盐酸二甲双胍，左卡尼叮，L- 肉碱。采用的流动相为烷烃磺酸钠简述反相离子对色谱的分离原理，并对影响溶质保留值的各个因素加以讨论？原理：反相离子对色谱法是把离子对试剂加到极性流动相中， 被分析的样品离子在流动相中与离子对试剂生成不带电荷的中

25、性离子对， 从而增加了样品离子在非极性固定相中的溶解度，使分配系数增加，改善分离效果。 因素：1. 流动性的 pH 值：一般 pH在 27.5 ，对酸性样品，pH 一般控制 pKa+2的流动相，碱性则 pKa-22. 离子对试剂的类型：通常选用与被测样品电荷相反的离子对试剂3. 离子对试剂的浓度： 当流动相中离子对试剂的浓度增加， 被固定相媳妇的离子对试剂的浓度也增加，直至固定相上离子对试剂饱和4. 有机改性剂的性质和浓度： 增加流动相有机溶剂的比例， 吸附在固定相上的离子对试剂减少， 因为可以选择性的降低离子性化合物的保留， 有机溶剂的比例越高， k 越小。试述液 - 固吸附色谱法常用的固定

26、相及保留机理常用固定相： 1. 硅胶 2. 氧化铝保留机理：在吸附色谱体系中， 溶剂分子和溶质分子均能被吸附于吸附剂的活性位点上，当流动相流过固定相时， 样品组分分子和流动相分子竞争吸附剂表面活性吸附中心，同时，样品中不同组分分子也在竞争吸附中心。毛细管柱气相色谱的气路与填充柱气相色谱的气路有何不同，为何？进样系统不同。 毛细管气相色谱有分流进样系统， 填充柱不分流。 分流时先将较大体积的样品量注入到气化室中， 样品气化后和载气混合均匀， 通过分流器， 样品被分流为流量相差悬殊的两部分， 其中流量较小的部分直接进入色谱柱， 流量较大的部分放空。不会超载。填充柱没有分流过程。请写出分离度与柱效、

27、 分离因子等因素的关系式， 并对影响分离度的这些因素详加讨论分离度方程n 为理论塔板数 a 为相对保留值之比 ,a>1 柱效项预理论塔板数相关， 柱选择项主要受色谱柱性质影响，柱容量项主要受柱温左右。 k 变小，谱带流出较早，分离度变差， k 变大，分离度增加。但是当 k=5-6 时，对分离度的贡献已基本达到最大，再增加对分离度已无多大贡献。在毛细管气相色谱中，色谱柱内径与固定液膜厚如何影响载样量和柱效？固定液膜厚度减小可以大幅度提高色谱柱柱效，内径减小可以大幅度提高柱效。内径和膜厚增大，载样量增大。三类手性高效液相色谱分离法之比较？柱前衍生化法（ CDR）：优点是：价格便宜，柱效高的非

28、手性柱引入发色基团，可提高检测灵敏度衍生化伴随样品纯化； 缺点是：手性衍生化试剂需有高光学纯度外消旋化反应速度不同，反应烦琐费时。手性流动相法（ CMP）：不必柱前衍生化；无需昂贵的手性柱，简便易行非对映异构化，络合具有可逆性；缺点：可拆分的化合物有限；某些添加剂不够稳定，干扰测定大量手性添加剂的使用，增加费用。手性固定相法 （CSP）：适用于不含活泼反应基团的化合物； 无需高光学纯度试剂样品处理简单，制备分离方便应用广泛，可分离上万种化合物，定量准确度高。缺点：有时也需柱前衍生化； 适用性差，不如普通的 HPLC柱，CSP商品柱昂贵。分析碱性药物，采用 RP-HPLC特别是 ODS分离会出现

29、什么问题？解释原因？要分离该物质，在选择流动相可从哪些方面入手？出现问题：会出现色谱峰拖尾、分离效能下降、保留时间过长的问题。原因：亲硅醇基效应所致解决方法：向流动相添加小分子有机胺1.2. 使用离子对技术3. 添加缓冲液或者：出现问题：色谱峰裂分或多重峰原因：进样后游离药物与质子化的药物在流动相中重新平衡所致解决办法：1. 用流动相溶样后再进样2. 调整进样溶液的 pH 值紫外吸收光谱UV分析原理：吸收紫外光能量，引起分子中电子能级的跃迁谱图的表示方法：相对吸收光能量随吸收光波长的变化提供的信息：吸收峰的位置、强度和形状，提供分子中不同电子结构的信息荧光光谱法 FS分析原理：被电磁辐射激发后

30、，从最低单线激发态回到单线基态，发射荧光谱图的表示方法：发射的荧光能量随光波长的变化提供的信息：荧光效率和寿命，提供分子中不同电子结构的信息红外吸收光谱法 IR分析原理：吸收红外光能量， 引起具有偶极矩变化的分子的振动、 转动能级跃迁谱图的表示方法：相对透射光能量随透射光频率变化提供的信息：峰的位置、强度和形状，提供功能团或化学键的特征振动频率拉曼光谱法 Ram分析原理：吸收光能后，引起具有极化率变化的分子振动，产生拉曼散射谱图的表示方法：散射光能量随拉曼位移的变化提供的信息：峰的位置、强度和形状，提供功能团或化学键的特征振动频率核磁共振波谱法 NMR分析原理：在外磁场中，具有核磁矩的原子核，

31、吸收射频能量，产生核自旋能级的跃迁谱图的表示方法：吸收光能量随化学位移的变化提供的信息：峰的化学位移、强度、裂分数和偶合常数，提供核的数目、所处化学环境和几何构型的信息电子顺磁共振波谱法ESR分析原理：在外磁场中， 分子中未成对电子吸收射频能量， 产生电子自旋能级跃迁谱图的表示方法：吸收光能量或微分能量随磁场强度变化提供的信息：谱线位置、强度、裂分数目和超精细分裂常数，提供未成对电子密度、分子键特性及几何构型信息质谱分析法MS分析原理：分子在真空中被电子轰击，形成离子，通过电磁场按不同m/e分离谱图的表示方法：以棒图形式表示离子的相对峰度随m/e 的变化提供的信息： 分子离子及碎片离子的质量数

32、及其相对峰度， 提供分子量， 元素组成及结构的信息气相色谱法GC分析原理：样品中各组分在流动相和固定相之间，由于分配系数不同而分离谱图的表示方法：柱后流出物浓度随保留值的变化提供的信息： 峰的保留值与组分热力学参数有关， 是定性依据； 峰面积与组分含量有关反气相色谱法IGC分析原理：探针分子保留值的变化取决于它和作为固定相的聚合物样品之间的相互作用力谱图的表示方法：探针分子比保留体积的对数值随柱温倒数的变化曲线提供的信息：探针分子保留值与温度的关系提供聚合物的热力学参数裂解气相色谱法PGC分析原理：高分子材料在一定条件下瞬间裂解，可获得具有一定特征的碎片谱图的表示方法：柱后流出物浓度随保留值的

33、变化提供的信息：谱图的指纹性或特征碎片峰，表征聚合物的化学结构和几何构型凝胶色谱法 GPC分析原理：样品通过凝胶柱时， 按分子的流体力学体积不同进行分离， 大分子先流出谱图的表示方法：柱后流出物浓度随保留值的变化提供的信息：高聚物的平均分子量及其分布热重法TG分析原理：在控温环境中，样品重量随温度或时间变化谱图的表示方法：样品的重量分数随温度或时间的变化曲线提供的信息：曲线陡降处为样品失重区，平台区为样品的热稳定区热差分析 DTA分析原理：样品与参比物处于同一控温环境中， 由于二者导热系数不同产生温差，记录温度随环境温度或时间的变化谱图的表示方法：温差随环境温度或时间的变化曲线提供的信息：提供

34、聚合物热转变温度及各种热效应的信息示差扫描量热分析 DSC分析原理：样品与参比物处于同一控温环境中， 记录维持温差为零时， 所需能量随环境温度或时间的变化谱图的表示方法：热量或其变化率随环境温度或时间的变化曲线提供的信息：提供聚合物热转变温度及各种热效应的信息静态热力分析 TMA分析原理：样品在恒力作用下产生的形变随温度或时间变化谱图的表示方法：样品形变值随温度或时间变化曲线提供的信息：热转变温度和力学状态动态热力分析 DMA分析原理：样品在周期性变化的外力作用下产生的形变随温度的变化谱图的表示方法：模量或 tg 随温度变化曲线提供的信息：热转变温度模量和 tg 透射电子显微术TEM分析原理：

35、高能电子束穿透试样时发生散射、吸收、干涉和衍射，使得在相平面形成衬度，显示出图象谱图的表示方法：质厚衬度象、明场衍衬象、暗场衍衬象、晶格条纹象、和分子象提供的信息：晶体形貌、分子量分布、微孔尺寸分布、多相结构和晶格与缺陷等扫描电子显微术 SEM分析原理：用电子技术检测高能电子束与样品作用时产生二次电子、 背散射电子、吸收电子、 X 射线等并放大成象谱图的表示方法：背散射象、二次电子象、吸收电流象、元素的线分布和面分布等提供的信息：断口形貌、表面显微结构、薄膜内部的显微结构、微区元素分析与定量元素分析等原子吸收AAS原理：通过原子化器将待测试样原子化， 待测原子吸收待测元素空心阴极灯的光，从而使

36、用检测器检测到的能量变低， 从而得到吸光度。 吸光度与待测元素的浓度成正比。(Inductive coupling high frequency plasma) 电感耦合高频等离子体 ICP 原理：利用氩等离子体产生的高温使用试样完全分解形成激发态的原子和离子，由于激发态的原子和离子不稳定， 外层电子会从激发态向低的能级跃迁， 因此发射出特征的谱线。 通过光栅等分光后， 利用检测器检测特定波长的强度， 光的强度与待测元素浓度成正比。X-ray diffraction ,x射线衍射即 XRDX 射线是原子内层电子在高速运动电子的轰击下跃迁而产生的光辐射，主要有连续 X 射线和特征 X 射线两种。

37、晶体可被用作 X 光的光栅，这些很大数目的原子或离子 / 分子所产生的相干散射将会发生光的干涉作用，从而影响散射的 X 射线的强度增强或减弱。 由于大量原子散射波的叠加， 互相干涉而产生最大强度的光束称为 X 射线的衍射线。满足衍射条件，可应用布拉格公式： 2dsin = 应用已知 波长的 X 射线来测量角， 从而计算出晶面间距 d，这是用于 X 射线结构分析；另一个是应用已知 d 的晶体来测量角，从而计算出特征 X 射线的波长，进而可在已有资料查出试样中所含的元素。）HPCE， high performance capillary electrophoresis高效毛细管电泳（CZE 的基本

38、原理HPLC 选用的毛细管一般内径约为 （），外径为，有效长度为（） 。毛细管两端分别浸入两分开的缓冲液中，同时两缓冲液中分别插入连有高压电源的电极， 该电压使得分析样品沿毛细管迁移，当分离样品通过检测器时，可对样品进行分析处理。 HPLC进样一般采用电动力学进样（低电压）或流体力学进样（压力或抽吸）两种方式。在毛细管电泳系统中， 带电溶质在电场作用下发生定向迁移， 其表观迁移速度是溶质迁移速度与溶液电渗流速度的矢量和。 所谓电渗是指在高电压作用下， 双电层中的水合阴离子引起流体整体地朝负极方向移动的现象； 电泳是指在电解质溶液中，带电粒子在电场作用下，以不同的速度向其所带电荷相反方向迁移的现

39、象。溶质的迁移速度由其所带电荷数和分子量大小决定， 另外还受缓冲液的组成、 性质、值等多种因素影响。 带正电荷的组份沿毛细管壁形成有机双层向负极移动，带负电荷的组分被分配至毛细管近中区域， 在电场作用下向正极移动。 与此同时，缓冲液的电渗流向负极移动，其作用超过电泳，最终导致带正电荷、中性电荷、负电荷的组份依次通过检测器。MECC的基本原理MECC是在 CZE 基础上使用表面活性剂来充当胶束相， 以胶束增溶作为分配原理，溶质在水相、 胶束相中的分配系数不同， 在电场作用下， 毛细管中溶液的电渗流和胶束的电泳， 使胶束和水相有不同的迁移速度， 同时待分离物质在水相和胶束相中被多次分配，在电渗流和

40、这种分配过程的双重作用下得以分离。 MECC是电泳技术与色谱法的结合，适合同时分离分析中性和带电的样品分子。扫描隧道显微镜（ STM）扫描隧道显微镜（ STM）的基本原理是利用量子理论中的隧道效应。将原子线度的极细探针和被研究物质的表面作为两个电极， 当样品与针尖的距离非常接近时（通常小于 1nm ），在外加电场的作用下，电子会穿过两个电极之间的势垒流向另一电极。这种现象即是隧道效应。原子力显微镜 (Atomic Force Microscopy，简称 AFM)原子力显微镜的工作原理就是将探针装在一弹性微悬臂的一端， 微悬臂的另一端固定，当探针在样品表面扫描时， 探针与样品表面原子间的排斥力会

41、使得微悬臂轻微变形，这样，微悬臂的轻微变形就可以作为探针和样品间排斥力的直接量度。一束激光经微悬臂的背面反射到光电检测器，可以精确测量微悬臂的微小变形，这样就实现了通过检测样品与探针之间的原子排斥力来反映样品表面形貌和其他表面结构。俄歇电子能谱学（ Auger electron spectroscopy ），j 简称 AES俄歇电子能谱基本原理：入射电子束和物质作用，可以激发出原子的内层电子。外层电子向内层跃迁过程中所释放的能量，可能以 X 光的形式放出， 即产生特征X 射线，也可能又使核外另一电子激发成为自由电子，这种自由电子就是俄歇电子。对于一个原子来说 ,激发态原子在释放能量时只能进行一

42、种发射：特征 X 射原子序数小的射线的发射几率较大， X 特征原子序数大的元素， 线或俄歇电子。元素，俄歇电子发射几率较大， 当原子序数为 33 时，两种发射几率大致相等。 因此，俄歇电子能谱适用于轻元素的分析。- 高氯酸对阿胶进行湿法消化后 , 用导数火焰原子吸收光谱技术测定阿胶中的铜、“中药三大宝 , 人参、鹿茸和阿胶。”阿胶的药用已有两千多年的悠久历史历代宫马作峰论疲劳源于肝脏 J. 广西中医药 ,2008,31(1):31. 史丽萍马东明 ,解丽芳等力竭性运动对小鼠肝脏超微结构及肝糖原、肌糖元含量的影响 J. 辽宁中医杂志王辉武吴行明邓开蓉 内经“肝者罢极之本” 的临床价值 J . 成

43、都中医药大学学报 ,1997,20(2):9. 杨维益陈家旭王天芳等运动性疲劳与中医肝脏的关系 J. 北京中医药大学学报 . 1996,19(1):8.1 运动性疲劳与肝脏张俊明“高效强力饮”增强运动机能的临床 J 中国运动医学杂志， 1989，（）： 10117 种水解蛋白氨基酸。总含量在 56.73%82.03%。霍光华采用硝酸硫酸消化法和 18（）：372-374.1995,206 林华吕国枫官德正等 . 衰竭运动小鼠肝损伤的实验性 J. 天津体育学院党报 , 1994,9(4):9-11. 凌家杰肝与运动性疲劳关系浅谈 J. 湖南中医学院学报 .2003 ，（） 31. 凌家杰肝与运动

44、性疲劳关系浅谈 J. 湖南中医学院学报 2003，（）：1. 谢敏豪等训练结合用中药补剂强力宝对小鼠游泳耐力与肌肉和肝 Gn, LDH 和 MDH的影响 J 中国运动医学杂杨维益陈家旭王天芳等运动性疲劳与中医肝脏的关系 J. 北京中医药大学学报 . 1996,19(1):8.2.1 中药复方 2.2 单味药 33 阿胶和复方阿胶浆常世和等参宝片对机体机能影响的 J. 中国运动医学杂志， 991，10（）：49. 聂晓莉，李晓勇等慢性疲劳大鼠模型的建立及其对肝功能的影响J.热带医学杂志，2007,7(4) ： 323-325.3.1 概述 3.2 关于阿胶和复方阿胶浆医疗保健作用的3.2.1 营

45、养成分和评价 3.2.2 阿胶的药理作用 3.2.3阿胶的临床应用 XieMH,etal Effects of Hong jing tian she u on eproductive xis function andexercise capacities n men. The5周志宏等补肾益元方对运动小鼠抗疲劳能力的影响 J. 中国运动医学杂志， 001， 20（）：83-84202-204.5InternationalCourseandConferenceonPhysiologicalChemistrand Natrition of exercise and training (Abstra

46、ct)6杨维益等中药复方“体复康”对运动性疲劳大鼠血乳酸、 p 一内啡肤、亮氨酸及强啡肤 l-13影响的实验研。 仙灵口服液可提高机体运动能力，加速运动后血乳酸的消除。F3口服液能调整 PCO2孙晓波等鹿茸精强壮作用的 J. 中药药理与临床， 1987，（）：11. 于庆海等高山红景天抗不良刺激的药理 J 中药药理与临床， 1995，（）：83. 牛锐淫羊藿炮制前后对小鼠血浆睾丸酮及附近性器官的影响 J 中国中药杂志， 1989,14(9):18 P<0.01), 其他肝功能相关指标未见异常 (P> 0.05) 。肝脏是动物机体重要脏器之一 ,Pi ，同疲），肝主筋，人之运动皆由于

47、筋，故为罢极之本”。人体肝脏的功能活动也必阿胶 , 味甘性平入肺、肝、肾经 , 具有补血止血、滋阴润肺的功效。 神农本阿胶又称驴皮胶为马科动物驴的皮去毛后熬制而成的胶块是中国医药宝库中阿胶、 熟地配伍能使补而不滋腻 , 共奏益气补血之功 , 主要治疗各种原因导致的气血阿胶对细有促进作用； 提示阿胶能提高机体免疫功能。另外阿胶具阿胶具有很好的止血作用， 常用来治疗阴虚火旺、 血脉受伤造成的出血。比如，阿胶能治疗缺铁性贫血，再生障碍性贫血等贫血症状，阿胶对血小板减少， 白细阿胶是一类明胶蛋白， 经水解分离得到多种氨基酸， 阿胶具有很多的药理作用和阿胶又称驴皮胶 , 为马科动物驴的皮去毛后熬制而成的

48、胶块。中药界有句口头禅阿胶中的营养成分比较多， 主要有蛋白质、多肽、氨基酸、金属元素、硫酸皮肤。把阿胶应用于运动员或人群中的实践应用性， 具有很大的潜力和市场前景，白血病、鼻咽癌、食道癌、肺癌、乳腺癌等。阿胶不温不燥，老少皆宜，一年四季均伴随现代竞技体育的强度越来越大，运动员在大运动量训练后出现的各种疲劳征象，胞减少等症也具有效果明显效果；另外，经配伍，阿胶可用来治疗多种出血症。医学保健作用，阿胶具有耐缺氧、耐寒冷、抗疲劳和增强免疫功能作用； 同时，阿胶具有本文的目的意义有以下两个方面：一是通过阿胶的抗疲劳能力，来进一本以运动性疲劳相关症状明显的篮球运动员为对象，以谷丙转氨酶、 谷表明，阿胶还

49、用于治疗妊娠期胎动不安，先兆流产习惯性流产等。对于月经病步了解运动员服用阿胶以后，不但能够使男女运动员的谷草转氨酶含量水平、谷丙转参促进人体对糖原和三磷酸腺苷等能源物质的合理利用,并使剧烈运动时产生的乳草经将其列为上品。本草纲目载阿胶“疗吐血衄血血淋尿血 ,肠风下痢 ,女草转氨酶、 谷酰转肽酶、 总胆红素、白蛋白和白蛋白球蛋白含量水平为测定指标， 产生运动。从中医学的观点来看， 筋就是聚集在一起的肌肉束，膜是筋的延长和扩布； 常所说的肌腱和韧带等器官，韧带和肌腱坚韧有力。通过韧带和肌腱伸缩牵拉骨骼肌充在筋”,也就说明了筋的功能受到肝脏的调节 ,所以 ,医家大多从筋与肝相关的角除运动后的疲劳,已

50、经成为运动医学领域的热点而中医药在改善、 消除运动性促进肌肉和肝脏有氧氧化能力的作用。红景天圣露能促进机体运动后的恢复和消除促进血液凝固和抗贫血作用，有提高血红蛋白红细胞， 白细胞和血小板的作用。 到影响。的变化 ,主要表现为部分肝细胞破裂 ,内容物进入窦状隙 ,未受损的肝细胞糖原明的核心问题之一也是运动训练学所要克服的核心问题之一,疲劳是机体的一的滋补类药品； 因始产于聊城东阿， 故名阿胶，距今已有两千多年的生产历史；最早低分子肽含量分别是 5% 45、10.97%13.18% 。霍光华采用标准水解法和氨基低运动后血清尿素氮含量；加速体内尿素氮及血乳酸的清除速率；提高小鼠的游泳点、 “肝之合

51、筋”的观点、“肝者其充在筋”的观点、 “食气入胃散精于肝淫气于动领域的广泛应用。动性疲劳关系最为密切者当首推肝脏。 动性疲劳后机体恢复作用和机制的十分活跃。动员和贮备，以及机体对运动刺激的适应和运动后的疲劳的恢复起到重要的促进作用度阐述肝与疲劳的关系 , 其实肝尚可通过脏腑气血等多个途径影响疲劳感的产生和度的 DS 标准液 , 加适量天青试液 , 36nm 处测定吸收值建立工作曲线回归方程。对于运动产生的机理 , 中医学解释比较通俗易懂 , 即：韧带和肌腱的伸缩牵拉骨对运动性疲劳的多集中于中枢疲劳与外周肌肉疲劳， 而较少涉及肝脏实质器而略于补立法， 以健脾保肝、补中益气组方的确是防治运动性疲劳

52、的一条新思新。 故发挥和延缓运动性疲劳的产生都能起积极而有效的作用。总之体力和脑力的产生均复的适应能力。复方阿胶浆是由阿胶、红参、党参、熟地、山楂等药组成 , 主入肝、脾两经。方肝，人动血运于经”的论述。明确指出运动能力与肝和血密切相关。 这种“动则血肝脾同处于中心位置， 共同掌管着气化的职责，所以运动性疲劳的气虚神乏大多是由肝损害可导致动物运动能力下降 , 也有大量实验观察了急性力竭疲劳对动物肝脏的肝糖原、肌糖元含量下降 , 其程度随着衰竭运动次数增加而增加。 林华等通过对衰肝有关， 由此可以推测神经递质、激素的释放等生理活动均同肝脏有密切关系。 再者肝与筋的关系非常密切，在许多著作中都阐述了这一观点。如“肝主筋”的观肝脏对内分泌具有促进作用。中医认为，胆汁的分泌、女子的排卵、男子的排精均主藏血、主筋，