葡萄膜炎患者房水闪辉的定量测量

1、0葡萄膜炎患者房水闪辉的定量测量葡萄膜炎患者房水闪辉的定量测量中国医科大学眼科医院2008级硕士研究生 周洋导师 李效岩1前 言 葡萄膜炎是一组累及葡萄膜、视网膜、视网膜血管及玻璃体的炎性疾病，多见于青状年，易合并全身性自身免疫性疾病，常反复发作，治疗棘手，可引起一些严重并发症，是一类常见而重要的致盲性眼病 。2葡萄膜炎累及前房可表现为前房炎症反应特征性改变是血-房水屏障破坏，房水蛋白浓度升高及房水中出现炎症细胞。3血-房水屏障 血-房水屏障由睫状体无色素上皮细胞近顶端细胞间的紧密连接及虹膜血管内皮细胞之间的紧密连接构成。生理状态下，虹膜前表面允许少量细胞和小分子蛋白进入前房。 睫状体色素上皮

2、免疫损伤和虹膜毛细血管增生变化破坏血-房水屏障使其限制能力下降，血浆中大分子蛋白质进入前房，表现为前房闪辉增强，反映炎症对血-房水屏障损害。4目目 的的 本研究选择使用激光蛋白细胞检测仪定量检测葡萄膜炎患者房水中蛋白浓度的变化，探讨激光蛋白细胞检测仪定量测定葡萄膜炎患者房水闪辉的临床应用价值。 5临床资料临床资料 2009年7月至2010年7月在我院就诊、复查的葡萄膜炎患者129例(171只眼),根据其临床特点将其分为前葡萄膜炎组87例（87只眼），中间葡萄膜炎组10例（20只眼），后葡萄膜炎组32例（64只眼），对照组50例（100只眼）。 6葡萄膜炎患者分类（按解剖位置及参考文献标准） 前

3、葡萄膜炎组87例，其中男49例（49只眼），女38例（38只眼）。 中间葡萄膜炎组10例，其中男4例（8只眼），女6例（12只眼）。 后葡萄膜炎组32例，其中男15例（30只眼），女17例（34只眼）。 7对照组 50例正常人(100只眼)作为对照组，其中男29例，女21例，年龄1661岁，平均39岁；无眼科疾病、眼科手术及全身疾病史，眼科检查未见阳性体征。 8方方 法法 仪器： 激光蛋白细胞检测仪（日本Kowa FM-600型）裂隙灯显微镜（苏州六六视觉 YZ5E）标准对数视力表 观察指标：房水蛋白浓度 裂隙灯显微镜下房水闪辉分级 矫正视力 分析方法：SPSS 17.0软件进行单因素方差分析

4、及相关分析,两两比较采用q检验 ，以P0.05为差异有显著意义9 采用FM-600激光蛋白细胞检测仪（LFCM）检测前房闪辉值，裂隙灯显微镜下房水闪辉分级，两项检测分别由一位专业技师和一位葡萄膜病专家完成，裂隙灯检测先于LFCM检测，两项检测间隔在1小时之内。10FM-600激光蛋白细胞检测仪（LFCM）11FM-600激光蛋白细胞检测仪（LFCM） 原理 将半导体激光光电倍增系统检测的散射光子数和峰信号数转换为蛋白浓度和细胞数，实验证明光子数与前房闪辉值线性相关。 蛋白浓度测定时，激光束于包括检测窗在内的垂直06 mm区域上下扫描，检测窗的散射光强度减去眼内组织的背景光(BG)干扰，即为真实

5、蛋白浓度(光子计数毫秒，pcms)。 12FM-600激光蛋白细胞检测仪（LFCM）检测 检测时，采用双盲法，检测者不知所测对象临床上是否有炎性反应存在。 在正常瞳孔下暗室内进行。 测定时间为上午（9-10）时。 检测时自动调准扫描，每只眼作5次，每次背景光干扰15，取其平均值。131415裂隙灯下房水闪辉分级检测 检测时，入射光带为高1mm,宽0.3mm,以30射入前房并采用16放大目镜。16前房闪辉分为5级（半定量分级） 0表示无或可疑闪辉； 1+表示轻度闪辉； 2+表示中度闪辉，虹膜及晶状体细节可辨； 3+表示中度闪辉，难辨虹膜晶状体细节 4+表示重度闪辉和大量纤维素性渗出。17统计学处

6、理方法统计学处理方法 统计学分析采用SPSS17.0软件完成； 数据以X s表示； 总体比较采用（ANVOA）单因素方差分析； 两两比较采用q检验，以P0.05为差异具有统计学意义。 裂隙灯显微镜检查与激光蛋白测定结果，矫正视力结果与激光蛋白测定结果分别进行（Spearman)相关分析。18结结 果果l前，中，后葡萄膜炎患者各级房水闪辉值均高于对照组，具有统计学意义（P0.05）。l前，中，后葡萄膜炎患者各级房水闪辉值与裂隙灯检查分级呈正相关，具有统计学意义（P0.01）。l前，中，后葡萄膜炎患者矫正视力检查与激光蛋白测定结果呈负相关 （ P0.01 ） 。19前葡萄膜炎患者的房水闪辉测定 裂

7、隙灯显微镜检查87只患眼中，0只眼无房水闪辉，房水闪辉l+、2+、3+和4+者分别为48只眼、35只眼、2只眼和2只眼；LFCM检测发现12级房水闪辉的平均值分别为28.66.7pc/ms，144.328.1 pc/ms，34级房水闪辉由于背景干扰大，检测值出现警告显示或无法检测。 20 12级房水闪辉的裂隙灯显微镜检查与激光蛋白测定结果呈正相关性(r=0.855，P0.01)；与正常人(5.11.8 pc/ms)比较，前葡萄膜炎患者的12级房水闪辉值均显著增高(P0.05)(见表1)。12级房水闪辉的视力检查与激光蛋白测定结果呈负相关性(r=-0.455，P0.01) 。21222324中间

8、葡萄膜炎患者的房水闪辉测定 裂隙灯显微镜检查20只患眼中，房水闪辉l+为10只眼，房水闪辉2+为10只眼，LFCM检测发现,12级房水闪辉的平均值分别为31.75.0pc/ms，130.712.9pc/ms。25 12级房水闪辉的裂隙灯显微镜检查与激光蛋白测定结果呈正相关性(r=0.867，P0.01)；与正常人(5.11.8 pc/ms)比较，中间葡萄膜炎患者的12级房水闪辉值均显著增高(P005)（见表2）。12级房水闪辉的视力检查与激光蛋白测定结果呈负相关性(r=-0.455，P0.01)。 26272829后葡萄膜炎患者的房水闪辉测定后葡萄膜炎患者的房水闪辉测定 后葡萄膜炎患者32例（

9、64只眼），此期裂隙灯显微镜检查未检测到房水闪辉，记录为0级，LFCM检测发现64只眼房水闪辉的平均值为9.83.1pc/ms，与正常人(5.11.8 pc/ms)比较，后葡萄膜炎患者的房水闪辉值显著增高(P0.05) 。后葡萄膜炎患者视力检查与激光蛋白测定结果呈负相关性(r=-0.215，P0.01)。30 后葡萄膜炎组患者和对照组的前房闪辉测定组别眼数前房闪辉检测值（pc/ms）P值范围均值（xs）对照组1002.110.65.11.8后葡萄膜炎组0级642.318.19.83.10.053132讨讨 论论 人眼房水中的蛋白浓度可反映血-房水屏障的功能，以往多因使用裂隙灯显微镜等检测手段所

10、限，仅可获得定性或半定量检测结果，不仅无法观察眼部功能的细微变化，而且结果缺乏重复性和可比性； 荧光造影法敏感性高，但操作麻烦，且荧光素的全身副作用限制了其临床应用； 直接抽取房水进行蛋白浓度定量检测的方法具有创伤性，不易被患者接受。 33 Sarri等通过研究证明激光蛋白细胞检测仪检测出的闪光值与房水中的总蛋白浓度呈线性相关，即闪光值可间接定量反映房水中的总蛋白浓度 。 使用该仪器进行检测，无接触且无创伤。 34 文献报道使用托品酰胺散瞳者房水蛋白浓度的检测值低于正常瞳孔者； 眼房水蛋白浓度随昼夜不停变化，高峰出现在早6:00，低峰出现在晚6：00。 因此，本研究为了避免瞳孔和时间因素对检测

11、结果的影响，术眼均不使用散瞳剂，且测定时间均选定为早9:00-10:00。35 我们用FM-600型LFCM进行测量，每眼重复测7次，仪器自动算出均值和标准差。仪器会自动警告和删除测量中个别离异较大的值。 为消除测量者人为因素和仪器本身对测量值造成的影响，我们将正常人和患者的前房闪辉测定值的变异系数进行了单因素方差分析及q检验，结果差异均有显著意义。 证明系统误差并非检查者和仪器本身造成的，所测结果在很大程度上克服了人为因素带来的偏差，有很好的重复性，误差小。36 采用FM-600型LFCM检测50例正常人，结果房水蛋白平均值为(5118)pcms，此数据与GuillenMonterrubio

12、等的结果相似，提示正常人房水中有少量蛋白存在。 37 随着眼内炎性反应的加重，眼内周围组织的反射和散射光增强，即背景光干扰增大。因此，在34级房水闪辉，背景光干扰极大时，其检测值的可信度显著下降或检测不出。 可见，LFCM对于判断轻、中度和恢复期炎性反应有重要价值。 38 通过对后葡萄膜炎患者检测，我们发现虽然64只眼裂隙灯显微镜检查无房水闪辉，但LFCM检测发现其房水蛋白均值仍显著高于正常人。 此表明，临床上无明显炎性反应的葡萄膜患者，其血-房水屏障功能也遭到一定破坏，这可能是葡萄膜长期受到慢性炎症的刺激，从而引起血一房水屏障功能持续紊乱，其真正的机制还有待进一步研究。 39 血-房水屏障功

13、能的恢复尚需相当长时间，因此，在临床炎性反应消失后，仍需使用睫状肌麻痹剂以利患者完全恢复。40 以往对前房闪辉的测定均是在裂隙灯显微镜下进行。 现通过LFCM检测，我们发现二者在一定范围内有较好的一致性。 眼科医生联合使用裂隙灯显微镜和LFCM可以精确判断眼前段炎性反应。41 葡萄膜炎患者各级房水闪辉的矫正视力与激光蛋白测定结果呈负相关性，说明随着房水闪辉的加重，视力也随之下降，房水闪辉是视力的影响因素之一，准确测量房水蛋白含量有助于临床诊断和指导治疗。 42结结 论论FM-600激光蛋白细胞检测仪可确切判断葡萄膜炎患者轻、 中度的血-房水屏障破坏，对判断眼前段炎性反应和指导临床治疗有重要意义

14、。43参考文献参考文献1.赵堪兴，杨培增眼科学, 第7版, 北京：人民卫生出版社.2008； 171-172.2.Sawa M,Tsurimaki Y.New quantitative method to determine protein concentration and cell number in aqueous in vivo. Jpn J Ophthalmol.1988；32:132-142.3.杨培增.葡萄膜炎诊断与治疗.北京:人民卫生出版社，200984-86.4.Sarri KM, Guillen-Morterrubio OM, Hartikainen MM,et al. M

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