用四重位波时A波检测可改善N乙酰神经氨酸和N羟乙酰神经氨酸峰面积响应值的长期稳定性_第1页
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1、用四重位波-a波检测可改善n-乙酰神经氨酸和n-羟乙酰神经氨酸峰面积响应值的长期稳定性摘要：本文研究了重位波-a波检测可改善n-乙酰神经氨酸和n-羟乙酰神经氨酸峰面积响应值的长期稳定性。文章中用四重电位波形（a波）和三电位波形（b波和c波）进行了比较得到a波分析唾液酸时，48小时内稳定性很好，峰面积rsd5%，也可以达到一到两的长期稳定。关键词：四重位波-a波；唾液酸 dionex tn41的方法中指出，用hpae-pad可以准确重复的测定糖蛋白中唾液酸的含量1。自tn41和reference3方法发表以来，用于糖类化合物分析的脉冲电化学波形就出现了，此波形不会导致电极凹进2。本方法描述的波形

2、是四重电位波形（a波），并与dionex tn21中的三电位波形（b波和c波）进行了比较3。这种电位的波形见图1。在本方法中，我们发现用a波分析唾液酸时，48小时内稳定性很好，峰面积rsd5%。 1 实验部分 1.1 仪器与试剂 dionex dx-500色谱装置，包括：gp50梯度泵，带真空脱气装置；lc30或lc25柱温箱；ed40电化学检测器、检测池和金工作电极；as3500自动进样器带tefzel转子密封和不锈钢进样针；peaknet 色谱工作站。naac；50%naoh ；neu5ac和neu5gc；6n hcl；kdn；人铁传递蛋白，部分铁；arthrobacter ureafac

3、iens 神经氨酸苷酶； 1.2 色谱条件 分离柱：dionex ionpac as23分离柱和ionpac ag23保护柱，4.5 mmol/l na2co30.8mmol/l nahco3缓冲溶液等度淋洗，amms iii阴离子抑制器，50 mmol/lh2so4作为再生液。淋洗液流速为1.0 ml/min，进样体积为10 l。 柱 子：carbopac pa10分析柱（0.425cm）带保护柱 流 速：1.0 ml/min 淋洗液：a: 100mm naoh；b: 100mm naoh1mnaac 程 序： 时间（min） a（%） b（%） 检测器：ed40电化学检测器，金工作电极 定

4、量环体积：100 l 自动进样器循环时间：27min 柱温箱温度：30 波形a： 1.3 样品前处理 人铁传递蛋白用0.1nhcl消解或者用arthrobacter ureafaciens神经氨酸苷酶进行处理从而释放处唾液酸 a-波分析唾液酸（200-pmol）时峰面积的长期稳定性2 结论: 虽然用hpae-pad-b-波分析neu5ac和neu5gc也能够取得好的结果，但a-波可以给出更好的长期稳定性。我们建议在分析neu5ac和neu5gc时使用a-波并按照tn21中的指示进行验证。 参考文献: 1dionex technical note 41, 1997. 2rocklin rd, clarke ap, weitzhandler m. an

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