洁净室管理及其要求 (药包所)

1、上海市食品药品包装材料测试所洁净室的管理及其要求洁净室的管理及其要求 2016年年11月于上海月于上海主讲人：韩晗主讲人：韩晗 洁净检测室洁净检测室 副主任副主任 上海市食品药品包装材料测试所上海市食品药品包装材料测试所 上海市食品药品包装材料测试所YY0033-2000环境检测项目的标准环境检测项目的标准-表表1上海市食品药品包装材料测试所YY0033-2000环境检测项目的标准环境检测项目的标准-表表2上海市食品药品包装材料测试所各个项目检测方法的参考标准o 风量（换气次数）风量（换气次数） GB 50591-2010GB 50591-2010o 压差压差 GB 50591-2010GB

2、50591-2010o 温湿度温湿度 GB 50591-2010GB 50591-2010o 悬浮粒子悬浮粒子 GB/T 16292-2010GB/T 16292-2010o 沉降菌沉降菌 GB/T 16294-2010GB/T 16294-2010o 浮游菌浮游菌 GB/T 16293-2010GB/T 16293-2010上海市食品药品包装材料测试所风量（换气次数）检测（风量（换气次数）检测（GB 50591-2010GB 50591-2010）o 换气次数的检测的方法o 1.风量罩法o 2.套管法o 3.风管法上海市食品药品包装材料测试所风量罩法o 方法：将风量罩直接套在散流板边框上，并

3、直接进行读数。上海市食品药品包装材料测试所套管法o 直角管法o 锥形套管法错误方法：直接用风速仪在散流板下测量。这样测得的风量会比真值高出许多。上海市食品药品包装材料测试所直角管法直角管：制作长度大于2倍风口边长的套管。用风速仪在套管下截面进行风速测量。测点数不少于6点。风速乘以套管下截面的面积=风量（注意单位）上海市食品药品包装材料测试所锥形套管法锥形套管：制作长度大于1.5倍风口边长的锥形套管。侧壁与垂直面倾角小于7.5度。测点数不少于6点。风速乘以下截面的面积=风量（注意单位）上海市食品药品包装材料测试所套管法风量计算范例o 如果，在锥形管或直角管下截面测得的风速分别为，0.45m/s

4、0.46m/s 0.45m/s 0.43m/s 0.44m/s 0.49m/s。而下截面的面积为1平方米。则风量计算如下o风量=1/6* ( 0.45+0.46+0.45 +0.43+0.44+0.49)*1*3600o=1632m3/h上海市食品药品包装材料测试所风管法风管法o 使用毕托管和风速压力表测量。o 通过测量全压和静压计算出动压的数值，从而计算风速数值的大小。上海市食品药品包装材料测试所压差（GB 50591-2010GB 50591-2010）o 要点：检测时所有房间门始终保持关闭状态各个风机（包括排风机）正常开启注意门缝气流对压差数据的影响上海市食品药品包装材料测试所压差检测的

5、仪器设备o 便携式压差计o 固定式压差计上海市食品药品包装材料测试所便携式压差计的使用范例更衣间的静压力比换鞋间的静压力高47.7pa。也就是更衣间对换鞋间的压差是47.7pa。上海市食品药品包装材料测试所便携式压差计的使用范例更衣间的静压力比换鞋间的静压力低47.7pa。也就是更衣间对换鞋间的压差是-47.7pa。上海市食品药品包装材料测试所便携式压差计的使用范例换鞋间的静压力比更衣间的静压力高47.7pa。也就是更衣间对换鞋间的压差是-47.7pa上海市食品药品包装材料测试所便携式压差计的使用范例换鞋间的静压力比更衣间的静压力低47.7pa。也就是更衣间对换鞋间的压差是47.7pa。上海市

6、食品药品包装材料测试所固定式压差计的使用范例o 较之便携式压差计而言，固定式压差计的使用方法大体相同上海市食品药品包装材料测试所固定式压差计的使用范例注意：定期检查压差计的零位状况。方注意：定期检查压差计的零位状况。方式：打开压差计所在的门，看压差计是式：打开压差计所在的门，看压差计是否回归零值。否回归零值。注意：定期检查压差计内的酒精的量是注意：定期检查压差计内的酒精的量是否满足最低要求。方式：对正极吹气，否满足最低要求。方式：对正极吹气，查看是否酒精是否可以达到满值。查看是否酒精是否可以达到满值。上海市食品药品包装材料测试所温湿度检测（GB 50591-2010GB 50591-2010）

7、上海市食品药品包装材料测试所温湿度检测o 对于无恒温要求的洁净室温湿度检测的要点检测前，空调系统应已连续运行至少8h温度检测仪表的最小刻度不宜高于0.4度。湿度检测仪表的最小刻度不宜高于2%测点为房间中间一点，应在读数稳定后记录。上海市食品药品包装材料测试所温湿度检测o 有恒温恒湿要求房间的温湿度检测的要点： 仪器要求：n温度计：采用铂电阻、热电偶或其他类似温度传感器组成测温系统n湿度计：可采用湿球温度计或其他固态湿度传感器组成测湿系统方法要求：n检测前，空调系统已连续运行至少12hn确定检测周期（8-48h）n每次检测时间间隔不应大于30minn选择具有代表性的测点位置上海市食品药品包装材料

8、测试所温湿度计的使用方法o 对于电子显示的温湿度计，在遵循正确的检测方式的情况下，直接读数即可。上海市食品药品包装材料测试所固定式温湿度计的使用方法这是温度指针这是温度指针这是相对湿度指针这是相对湿度指针上海市食品药品包装材料测试所干湿球温湿度计的使用方法这是湿球温度刻度这是湿球温度刻度(相对湿相对湿度与干球温度和湿球温度度与干球温度和湿球温度有函数关系有函数关系)这是干球温度刻度这是干球温度刻度（也就是我们所说（也就是我们所说的温度）的温度）上海市食品药品包装材料测试所干湿球温湿度计的使用方法然后，在此处读然后，在此处读出相对湿度的数出相对湿度的数值值保证实际的干球保证实际的干球温度和湿球温

9、度温度和湿球温度的数值刻度重合。的数值刻度重合。上海市食品药品包装材料测试所干湿球温湿度计的使用方法定期检查湿球的纱定期检查湿球的纱布绳线始终浸没在布绳线始终浸没在水中，并且保证一水中，并且保证一定的水量。定的水量。上海市食品药品包装材料测试所悬浮粒子检测（GB 16292-2010GB 16292-2010）上海市食品药品包装材料测试所悬浮粒子的测试条件o 在测试之前，要对洁净室（区）相关参数进行预先测试，这类测试将会提供测试悬浮粒子的环境条件，例如：这种预先测试或可包括：o a）温度和相对湿度的测试。洁净室（区）的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应（无特殊要求时，温度在1826，相对

10、湿度在45% 65%为宜），同时应满足测试仪器的使用范围。o b）室内送风量或风速的测试，或压差的测试。o c）高效过滤器的泄漏测试上海市食品药品包装材料测试所最小采样点数目方法一o 利于以下公式计算出最小采样点数量。o 式中NL最少采样点；o A洁净室或被控洁净区的面积(m2)。o 注：公式计算后向上取整，得出的结果即为最小采样点。在单向流情况下，面积A可以认为是垂直于气流方向上的横截面积。LNA上海市食品药品包装材料测试所最小采样点数目方法一的范例o 若房间面积为10平方米。o 则 ，那么最小采样点数就为4点。2 . 310 上海市食品药品包装材料测试所最小采样点数目方法二上海市食品药品包

11、装材料测试所最小采样量上海市食品药品包装材料测试所采样点分布上海市食品药品包装材料测试所采样注意事项 o 对于单向流洁净室（区），粒子计数器的采样管口应正对气流方向；对于非单向流洁净室（区），粒子计数器的采样管口宜向上。o 布置采样点时，应尽量避开回风口。o 采样时，测试人员应在采样口的下风侧，并尽量少活动。o 采样完毕后，宜对粒子计数器进行自净。o 应采取一切措施防止采样过程的污染。上海市食品药品包装材料测试所采样点的平均悬浮粒子浓度A oA某一采样点的平均粒子浓度，粒/m3；oCi某一采样点的粒子浓度（i=1,2,n），粒/m3；on某一采样点上的采样次数，次。nCAn1ii上海市食品药品

12、包装材料测试所平均值的均值M oM平均值的均值，即洁净室（区）的平均粒子浓度，粒/m3；oAi某一采样点的平均粒子浓度（i=1,2,L），粒/m3；oL某一洁净室（区）内的总采样点数，个。LAML1ii上海市食品药品包装材料测试所 标准差SE oSE平均值均值的标准误差，粒/m3。 ) 1()()()(22221LLMAMAMASEL上海市食品药品包装材料测试所 95%置信上限（UCL） o式中： UCL平均值均值的95置信上限，粒/m3；ot 95置性上限的t分布系数，见表3。o 表3 95置信上限的t分布系数： SEtMUCL上海市食品药品包装材料测试所UCL计算范例o 0.5umo 第一

13、点 134 156o 第二点 169 123o 第三点 189 241o 第四点 190 184上海市食品药品包装材料测试所UCL计算范例o 第一步：计算各点的平均值o 我们得到：o 0.5umo 第一点 145o 第二点 146o 第三点 215o 第四点 187o 并且我们得到四个点的总的平均值是173.25上海市食品药品包装材料测试所UCL计算范例o 第二步：计算标准差SEo SE=SQRT(173.25-145)2+(173.25-146)2+(173.25-215)2+(173.25-187)2/（4*3）=17.01上海市食品药品包装材料测试所UCL计算范例o 第三步，计算UCLo

14、 UCL=M+SE*t=173.25+17.01*2.35o =213上海市食品药品包装材料测试所结果评定 o 判断悬浮粒子的洁净度级别应同时满足以下两个条件：o a：每个采样点的平均悬浮粒子浓度必须不大于规定的级别界限，即Ai级别界限o b：全部采样点的悬浮粒子浓度平均值均值的95置信上限必须不大于规定的级别界限，即UCL级别界限上海市食品药品包装材料测试所测试报告 o从每一个洁净室（区）得来的测试结果应当被记录，计相一致或不一致的报告也要提交。o测试报告应包括以下内容：oa）测试区域的名称和地址，测试日期；ob）测试依据；oc）被测洁净室（区）的物理地点的明确证明（必要时包括参考的邻近区域

15、）；od）悬浮粒子的粒径；oe）有关测试仪器及其方法的描述：包括测试环境条件，采样点数目以及布置图，测试次数，采样流量，或可能存在的测试方法的变更，测试仪器的检定证书等；若为动态测试，则还应记录现场操作人员数量及位置。of）测试结果；包括所有统计计算资料。上海市食品药品包装材料测试所沉降菌检测（GB 16294-2010）上海市食品药品包装材料测试所仪器 o a) 培养皿（55mmX15mm, 90mmX 15mm 两种规格）o b) 培养基（见本标准附录B）o c) 恒温培养箱上海市食品药品包装材料测试所注意事项 o 测试用具要作灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。o 采取一切措施防止人为

16、对样本的污染。o 对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。o 由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察o 不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。 o 采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。上海市食品药品包装材料测试所测试条件 o 在测试之前，要对洁净室（区）相关参数进行预先测试，这类测试将会提供测试悬浮粒子的环境条件，例如：这种预先测试或可包括：o a）温度和相对湿度的测试。洁净室（区）的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应（无特殊要求时，温度在1826，相对湿度在45%65%为

17、宜），同时应满足测试仪器的使用范围。o b）室内送风量或风速的测试，或压差的测试。o c）高效过滤器的泄漏测试上海市食品药品包装材料测试所最少采样点教目 o 沉降菌测试的最少采样点数目可参照悬浮粒子的测试方法。 上海市食品药品包装材料测试所采样点的位置 o a)工作区采样点位置离地0.8m-1.5m左右(略高于工作面)。o b)可在关键设备或关健工作活动范围处增加测点。o 采样点布置的规则见附录B(标准的附录)。上海市食品药品包装材料测试所最少培养皿数 上海市食品药品包装材料测试所采样注意事项 o对于单向流洁净室（区）或送风口，采样器采样口朝向应正对气流方向;对于非单向流洁净室（区），采样口向

18、上。o布置采样点时，至少应离开尘粒较集中的回风口1m以上。o采样时，测试人员应站在采样口的下风侧，并尽量少走动。o应采取一切措施防止采样过程的污染和其它可能对样本的污染。o培养皿在用于检测时，宜同时进行空白试验校正，避免培养皿运输或搬动过程造成的影响。每次或每个区域取1个对照皿，然后与采样后的培养皿（TSA或SDA）一起放入培养箱内培养，结果应应无细菌生长；上海市食品药品包装材料测试所记录 o 测试报告应包含以下内容：o a）测试区域的名称和地址，测试日期；o b）测试依据；o c）被测洁净室（区）的物理地点的明确证明（必要时包括参考的邻近区域）；o 的）有关测试仪器及其测试方法的描述：包括测

19、试环境条件，采样点数目以及布置图，测试次数，采样流量，或可能存在的测试方法的变更，测试仪器的检定证书等；若为动态测试，则还应记录现场操作人员数量及位置。o d）测试结果；包括所有统计计算资料。上海市食品药品包装材料测试所结果计算 o 对于一个房间（区域）计算每个培养皿的平均菌落数。上海市食品药品包装材料测试所不合格数据 o 在静态测试时，若某测点的浮游菌平均浓度超过评定标准，则必须对此区域先行消毒，然后重新采样两次，两次测试结果必须均合格才能判为符合。上海市食品药品包装材料测试所浮游菌检测(GB16293-2010)上海市食品药品包装材料测试所仪器、辅助设备和培养基 o 选择合适的浮游菌采样器

20、，包括采用无油的抽气泵，较低的气流流速和较大的采样流量，以保证培养基表面的水分不被吹干。o a) 浮游菌采样器o b) 培养皿o c) 培养基（见本标准附录B）o d) 恒温培养箱o e) 蒸汽灭菌器上海市食品药品包装材料测试所测试要点 o必须按照测试仪器的检定周期，定期对仪器作检定。使用校验合格，且在使用有效期内的仪器。o测试仪器在未进入被测区域时，若必需，则先清洁表面，或在相应的洁净室内准备和存放（用保护罩或其它适当地外罩保护仪器）。o在100级洁净室内用纸时，上面应蒙上一张透明不沾尘的覆盖物，在100级洁净室内不能用铅笔和橡皮。o使用测试仪器时应严格按照仪器说明书操作。o仪器开机，预热至

21、稳定后，方可按仪器说明书的规定对仪器进行校正，同时检查采样流量，并根据采样量设定采样时间。o采样口必须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造。o采样管严禁渗漏，内壁应光滑。o采样管的长度应根据测点的高度定，尽量减少弯曲。上海市食品药品包装材料测试所培养皿 o 一般采用55mmX15mm, 90mmX15mm, 65mmX15mm三种规格的培养皿。可根据所选用采样器选择合适的培养皿。 上海市食品药品包装材料测试所测试条件 o 在测试之前，要对洁净室（区）相关参数进行预先测试，这类测试将会提供测试悬浮粒子的环境条件，例如：这种预先测试或可包括：o a）温度和相对湿度的测试。洁净室（区）的温度和相对湿度

22、应与其生产及工艺要求相适应（无特殊要求时，温度在1826，相对湿度在45%65%为宜），同时应满足测试仪器的使用范围。o b）室内送风量或风速的测试，或压差的测试。o c）高效过滤器的泄漏测试上海市食品药品包装材料测试所最少采样点教目 o 浮游菌测试的最少采样点数目可参照悬浮粒子的测试方法 上海市食品药品包装材料测试所采样点的位置 o 浮游菌的采样点位置可参照悬浮粒子的测试方法。 o a)工作区测点位置离地0.8m-1.5m左右(略高于工作面)。o b)送风口测点位置离开送风面30cm左右。o c)可在关键设备或关健工作活动范围处增加测点。o 。上海市食品药品包装材料测试所最小采样量 上海市食

23、品药品包装材料测试所采样注意事项 o对于单向流洁净室（区）或送风口，采样器采样口朝向应正对气流方向;对于非单向流洁净室（区），采样口向上。o布置采样点时，至少应离开尘粒较集中的回风口1m以上。o采样时，测试人员应站在采样口的下风侧，并尽量少走动。o应采取一切措施防止采样过程的污染和其它可能对样本的污染。o在保证最小采样量的情况下，宜采用较低流速进行采样。o培养皿在用于检测时，宜同时进行空白试验校正，避免培养皿运输或搬动过程造成的影响。每次或每个区域取1个对照皿，然后与采样后的培养皿（TSA或SDA）一起放入培养箱内培养，结果应应无细菌生长；上海市食品药品包装材料测试所记录 o 测试报告应包含以

24、下内容：o a）测试区域的名称和地址，测试日期；o b）测试依据；o c）被测洁净室（区）的物理地点的明确证明（必要时包括参考的邻近区域）；o d）有关测试仪器及其测试方法的描述：包括测试环境条件，采样点数目以及布置图，测试次数，采样流量，或可能存在的测试方法的变更，测试仪器的检定证书等；若为动态测试，则还应记录现场操作人员数量及位置。o e）测试结果；包括所有统计计算资料。上海市食品药品包装材料测试所结果计算 o 对于一个房间（区域）计算每个培养皿的平均菌落数。上海市食品药品包装材料测试所不合格数据 o 在静态测试时，若某测点的浮游菌平均浓度超过评定标准，则必须对此区域先行消毒，然后重新采样

25、两次，两次测试结果必须均合格才能判为符合。上海市食品药品包装材料测试所验证oYY0033-2000 附录E中提到：上海市食品药品包装材料测试所验证o 建议对空气净化系统进行有效验证，包括：o 1.高效过滤器完整性o 2.气流流型模拟o 3.送风量、回风量、排风量、风速o 4.压差o 5.温湿度o 6.悬浮粒子o 7.微生物o 8.照度o 9.噪声上海市食品药品包装材料测试所验证o 验证工作的步骤1.起草验证方案起草验证方案3.验证的实施验证的实施4.偏差处理偏差处理5.完成验证报告完成验证报告2.验证计划验证计划上海市食品药品包装材料测试所验证方案/报告o 1.验证目的o 2.验证范围o 3.

26、系统介绍o 4.可接受标准o 5.检测数据结果o 6.偏差o 7.结论上海市食品药品包装材料测试所高效过滤器完整性测试的目的高效过滤器完整性测试的目的o 检查高效过滤器的过滤器面是否都达到规定的过滤效率。o 检查高效过滤器的安装是否符合要求。上海市食品药品包装材料测试所检测方法oA： 用气溶胶发生器对高效过滤器（HEPA）上游发烟，以达到发出稳定数量和粒径的悬浮粒子，然后用一个扫描仪在高效过滤器（HEPA）下游进行扫描检漏；oB： 将规定的液体气溶胶介质（PAO或其他介质）倒入气溶胶发生器内的存液容o器内，并连接压缩空气气源到气溶胶发生器的气体接口；oC： 调节压力调节阀使气体的压力达到规定要

27、求，并在测试过程中保持这个压力，o以保证气溶胶的分散系统达到均匀；气溶胶发生器开始放出气溶胶；oD： 通过吸入口将气溶胶分别引入生物安全柜，使稳定、均匀的气流到达o高效过滤器（HEPA）上游；oE： 打开气溶胶扫描仪并且按规定调节机器；oF： 采集高效过滤器（HEPA）上游的气溶胶浓度，确保气溶胶的光散射浓度不小o于10g/L；并调节仪器建立100%基准；oG： 气溶胶扫描仪的采样探头距高效过滤器（HEPA）表面约1.0in(2.5cm)左右。扫描整个高效过滤器（HEPA）下游，以及它的整个边框；缓慢而且交迭的来回移动扫描探头，移动速度不超过2 in/s (5cm/s)；分别扫描过滤器四周、以

28、及在过滤器与设备之间的密封材料、边框、粘合材料。上海市食品药品包装材料测试所检测范例o 高效过滤器完整性测试录像上海市食品药品包装材料测试所气流流型模拟试验的目的o 通过可视化的气雾或烟雾来论证在核心区域内，在模拟生产状态下，查看气流是否有利于污染物的排出以及阻挡污染进入最关键区域。上海市食品药品包装材料测试所范例o 气流流型模拟试验录像上海市食品药品包装材料测试所湿热灭菌原理简述湿热灭菌原理简述上海市食品药品包装材料测试所物料上海市食品药品包装材料测试所人员上海市食品药品包装材料测试所设备的表面上海市食品药品包装材料测试所清洗液上海市食品药品包装材料测试所接种的纸质载体上海市食品药品包装材料

29、测试所接种的金属载体上海市食品药品包装材料测试所接种的聚合物载体上海市食品药品包装材料测试所106105104103102101100灭菌剂量灭菌剂量 (时间时间)对数表示对数表示1 x 103 = 10001 x 101 = 10微生微生物数物数杀灭微生物无菌保证水平无菌保证水平达到达到 10-6上海市食品药品包装材料测试所10610510410310210110010-110-210-310-410-510-6微生物数微生物数以恒定的以恒定的速率下降速率下降 (D value)我们想提高灭菌的我们想提高灭菌的“概率概率”提高无菌信心的安全限度提高无菌信心的安全限度无菌保证的水平要优于百万分

30、之一无菌保证的水平要优于百万分之一!杀灭微生物灭菌时间灭菌时间继续灭菌继续灭菌以提高无以提高无菌保证的菌保证的水平水平上海市食品药品包装材料测试所10610510410310210110010-110-210-310-410-510-6我们可以检验微生物数的下降情况我们可以检验微生物数的下降情况杀灭微生物微生物数微生物数以恒定的以恒定的速率下降速率下降 (D value)继续灭菌继续灭菌以提高无以提高无菌保证的菌保证的水平水平灭菌时间灭菌时间我们可计算可信度增加我们可计算可信度增加的程度的程度/无菌保证水平无菌保证水平无菌保证水平无菌保证水平达到达到 10-6上海市食品药品包装材料测试所过热过

31、热潜热潜热 显热显热100oC0oC热热 (能量能量)温度温度蒸汽上海市食品药品包装材料测试所压力的测试表表压压绝绝对对压压力力最高最高真空真空大气压大气压（约（约1巴绝压值，表压为巴绝压值，表压为0）最佳真空最佳真空（0 巴绝压值）巴绝压值）绝压值绝压值=表压值表压值+1个大气压个大气压通常的通常的压差值压差值bar a = 绝压值绝压值g = gage的缩写，的缩写，bar g=表压值，表压值，绝压值与表压绝压值与表压值相差值相差1个大气压个大气压上海市食品药品包装材料测试所压力沸点表Gauge pressureBar(g)Absolute pressureBar(a)Boiling po

32、intoC 0.0217.5 0.0324.1 0.0429.0 0.0532.901.099.60.11.1102.30.21.2104.80.31.3107.10.41.4109.30.51.5111.40.61.6113.30.71.7115.20.81.8116.90.91.9118.61.02.0120.21.12.1121.81.22.2123.31.32.3124.7Gauge pressureBar(g)Absolute pressureBar(a)Boiling pointoC1.42.4126.11.52.5127.41.62.6128.71.72.7130.01.82.8

33、131.21.92.9132.42.03.0133.52.13.1134.72.23.2135.82.33.3136.82.43.4137.92.53.5138.92.63.6139.92.73.7140.82.83.8141.82.93.9142.73.04.0143.63.24.2145.4表压表压绝压值绝压值沸点沸点表压表压绝压值绝压值沸点沸点上海市食品药品包装材料测试所o 对灭菌柜及SIP而言n Dryness/干度 潜热的量n Superheat/过热 超过的温度 n NCG/不凝气体 不凝气体的 %n Condensate Quality 冷凝水质量o 对密封容器中的液体而言n 冷

34、凝水质量 (根据风险分析确定)蒸汽的质量上海市食品药品包装材料测试所蒸汽干度o 蒸汽干度是蒸汽中潜热的量度o 最理想是100%潜热，有最大的能量来加热装载o 限度标准n一般多孔性装载：0.90 (90%)n金属装载：0.95 (95%)上海市食品药品包装材料测试所过热过热 潜热潜热 显热显热 100oC0oC热热 (能量能量)温度温度蒸汽干度蒸汽干度干度为干度为 0.9 = 90% 的潜热的潜热干度为干度为 1.0 = 100% 的潜热的潜热蒸汽的特性上海市食品药品包装材料测试所湿热灭菌基础微生物杀灭的数学模式o 残存曲线可用如下的一级方程式来描述： nLog NF = Log No -F(T

35、,z)/DT NF挑战微生物灭菌挑战微生物灭菌F分钟后的残存数分钟后的残存数No灭菌前微生物的数量灭菌前微生物的数量DT微生物在微生物在T和和Z值下的耐热参数。注意，值下的耐热参数。注意，DT中的温度中的温度T需和需和FT中的温度相一致。中的温度相一致。F(T,z)在温度在温度T和温度系数和温度系数Z值条件下，经计值条件下，经计算获得的湿热灭菌程序的杀灭力，以算获得的湿热灭菌程序的杀灭力，以T下的时间（分钟）表示下的时间（分钟）表示上海市食品药品包装材料测试所湿热灭菌基础微生物杀灭的数学模式10N99.999999.99999.9999.99099%-6-510-3-41010-1-21010

36、0110104523101010106103D4D5D6D1D2D3D4D5D6D1D2D0每一单元的残存数残存概率区杀灭的 %T度下的等效灭菌时间（F 值）T,z123456789101112D=1上海市食品药品包装材料测试所湿热灭菌基础微生物杀灭的数学模式o 残存曲线的半对数模式必须满足二个先决条件：n 挑战菌应是均一的（没有其它杂类芽孢）n 挑战菌的灭菌条件相同，或能折算成相同的灭菌条件，例如，折算标准灭菌时间上海市食品药品包装材料测试所D VALUED值o在基础温度下减少一个在基础温度下减少一个Log菌数所需的时间。就是在一定温度下，菌数所需的时间。就是在一定温度下，将微生物杀灭将微生

37、物杀灭90（即下降一个对数单位）所需的时间。（即下降一个对数单位）所需的时间。6543210-1-2-3-4-5-61 2 3 4 5 6 7 8 9 10Log # ofSurvivors残存物残存物Log数数Minutes at 121.1 oC 在在121.1 oC 时的分时的分钟钟D value = 1D值值 = 1Thermal death curve热杀死曲线热杀死曲线上海市食品药品包装材料测试所验证试验应在验证试验应在10.5分和分和15分钟之间分钟之间数量数量BI数量是数量是106 ( D为为1.5分钟）分钟）因此，因此，存活时间存活时间= (6-2) D= (6-2) 1.5

38、= 6.0 分钟分钟而杀灭时间而杀灭时间= (6+4) D= (6 + 4) 1.5= 15分钟分钟存活及杀灭时间-2上海市食品药品包装材料测试所10610510410310210110010-110-210-310-410-510-6无菌保证水平无菌保证水平达到达到10-6灭菌时间灭菌时间可测试部分可测试部分计算部分计算部分无菌保证水平活微生物以活微生物以恒定速度恒定速度/D下降数下降数继续灭菌继续灭菌以提高无以提高无菌保证水平菌保证水平上海市食品药品包装材料测试所Z VALUEZ值oZ值是指使某一种微生物的D值下降一个对数单位时，灭菌温度应升高的度数。 Z Z值对于比较不同灭菌过程温度的标

39、准灭菌时间值对于比较不同灭菌过程温度的标准灭菌时间F F0 0值值计算是必须的计算是必须的 10121.1111.1131.110.1Log ofD ValueD值的值的Log数数Z Value = 10 oCZ 值值 = 10 oCTemperature oC 温度温度上海市食品药品包装材料测试所Z VALUEZ值 o嗜热芽胞杆菌在不同溶液中的Z值o溶液 Z值（）o5葡萄糖水溶液 10.3o注射用水 8.4o5葡萄糖乳酸液 11.3oPH7磷酸盐缓冲液 7.6o 平均平均 9.4上海市食品药品包装材料测试所灭菌方法的开发和选定o 过度杀灭法。n假设：nN0106nD1211分钟nZ10n将数

40、据代入公式，得L=1，再按计算，达到微生物残存概率为一百万分之一所需的物理及生物杀灭力如下：o 物理杀灭力FPHY为12分钟，o 生物杀灭力 FBIO D121（LogN0Log NF）12分钟上海市食品药品包装材料测试所灭菌方法的开发和选定o 残存概率法n假设产品的生物负荷测试中：nN0102nD1211分钟nZ10n经灭菌后，微生物残存概率NF小于10-6n利用上面的数值，可以计算出微生物残存概率小于10-6所需的FPHY和FBIO如下：nF0FPHYFBIOD121（LogN0Log NF）8分钟上海市食品药品包装材料测试所湿热灭菌湿热比干热快湿热比干热快.与干热灭菌相比，与干热灭菌相比

41、，湿热灭菌杀灭微湿热灭菌杀灭微生物的速度要快生物的速度要快五倍五倍热力杀灭热力杀灭.70时，大多时，大多数微生物会死亡数微生物会死亡上海市食品药品包装材料测试所液体灭菌上海市食品药品包装材料测试所最终灭菌的目标o 无菌保证水平优于百万分之一o 将每个接触面加热并使其及药液升至121，保持20分钟o 产品不能损坏.上海市食品药品包装材料测试所蒸汽引入蒸汽引入TP温度 .液体装载的灭菌上海市食品药品包装材料测试所你的待灭菌装载o 要考虑哪些问题?n 蒸汽能否穿透?n高密度包装的装载n 滞留冷凝水?n这是否影响灭菌?n 塑料 / 软包装容器n是否因灭菌损坏?n 如何对灭菌周期监控?n怎么知道蒸汽已穿

42、透到所有部位？上海市食品药品包装材料测试所可靠的装置有利运可靠的装置有利运行行(更长时间更长时间)可安装在层之间可安装在层之间插入的长度可调节，插入的长度可调节，以适用不同的瓶子以适用不同的瓶子测试区域在几测试区域在几何中心或升温何中心或升温缓慢的位置缓慢的位置探头安装示例上海市食品药品包装材料测试所温度探头测试点应在温度探头测试点应在升温慢的位置升温慢的位置通过比较大的瓶子通过比较大的瓶子进行试验确定升温进行试验确定升温缓慢点的位置缓慢点的位置类似的瓶子取其几何类似的瓶子取其几何中心中心插入长度不能根据视线插入长度不能根据视线来定来定探头插入的深度上海市食品药品包装材料测试所温度监测点o 腔室温度 (空载) o 装载产品的温度o 寻找一致性n 与经验证的相同n 设备性能具备重现性上海市食品药品包装材料测试所哪些因素会影响杀灭效果？o 蒸汽的压力/能力n一次同时运行数个灭菌柜所遵循的规则?n低蒸汽压有报警吗?o 产品的起始温度n直接取自冰箱吗?o 冷却的有效性n冷却水的能力？n冷却水的温度?上海市食品药品包装材料测试所121oC121oCFor 20 分钟分钟升温