ABO亚型鉴定及案例分析PPT学习教案

1、会计学1ABO亚型鉴定及案例分析亚型鉴定及案例分析根据血型血清学试验所表现的抗原性强弱程度的分级量化等血清学特征，可鉴别出各种ABO亚型 nA A抗原亚型较多：抗原亚型较多：主要是主要是A1A1（占（占80%80%）和）和A2A2亚型亚型（占（占20%20%） ，其它的，其它的A A亚型（亚型（A3A3、AmAm、AxAx、AintAint、AelAel、AyAy等）较少见或罕见等）较少见或罕见 nB B抗原的亚型比抗原的亚型比A A亚型少，较常见的有亚型少，较常见的有B1B1、B3B3、BmBm、BxBx、BelBel等亚型等亚型 nO O型血型中，常把孟买型、类孟买型和一些型血型中，常把孟

2、买型、类孟买型和一些H H缺失缺失型、型、HmHm表型等归类为表型等归类为H H抗原的亚型抗原的亚型第1页/共63页11第2页/共63页第3页/共63页A1型红细胞A2型红细胞与抗A血清反应4+4+与抗A1血清反应4+抗原位点数目 成人1000000250000脐血310000140000-乙酰-D-半乳糖胺转移酶在PH6时最多、活性较强在PH7时最多、活性较弱含不同抗原红细胞区别第4页/共63页第5页/共63页第6页/共63页第7页/共63页第8页/共63页第9页/共63页AB），以防将Ax型误定为O型。第10页/共63页第11页/共63页第12页/共63页第13页/共63页血型血型正定型试

3、验正定型试验血型血型物质物质抗原数细胞抗原数细胞（103103）血清中抗血清中抗A1A1抗抗A A抗抗ABAB抗抗H H抗抗A1A1A A1 14+4+4+4+w+w+4+4+A,HA,H81011708101170无无A A2 24+4+4+4+2+2+0 0A,HA,H240290240290少少A A3 32+mf2+mf2+mf2+mf3+3+0 0A,HA,H3535很少很少AendAendWkmfWkmfwkmfwkmf3+3+0 0H H200(200(只有只有10%10%细细胞产生凝集胞产生凝集) )无无AxAx0/w+0/w+12+12+4+4+0 0H H4 4几乎全部几乎

4、全部AmAm0 00 04+4+0 0A,HA,H0.21.90.21.9无无AelAel0 00 04+4+0 0H H0.11.40.11.4经常经常第14页/共63页第15页/共63页n献血者,男, 23岁。在献血时检测血型发现正反定型不一致,即送本院血型室鉴定。第16页/共63页第17页/共63页nH物质测定用抗H与献血者红细胞反应并同时采用其他正常成人新鲜Bc、Oc做平行对照。各红细胞与抗H凝集强度为Oc 献血者红细胞Bc。抗H呈增强反应。第18页/共63页n吸收放散试验：取献血者红细胞与效价为256的人源抗-A血清混合冷吸收后进行放散,释放液与A型试剂红细胞反应出现凝集,说明其红细

5、胞上确有A抗原存在。第19页/共63页n唾液中血型物质测定：唾液中未检出血型物质,该献血者为非分泌型。n抗AB反应强度试验：用抗AB效价为4和抗B效价为16血清分别与献血者红细胞反应,抗AB、抗B凝集强度分别为3 +、2 + ,由上可得出抗AB增强。第20页/共63页第21页/共63页第22页/共63页第23页/共63页第24页/共63页第25页/共63页第26页/共63页第27页/共63页1. 在室温及4 ,被检者红细胞与抗A、抗A1 、抗B 均不凝集,与抗AB 微弱凝集,与抗H 均明显凝集;2. 血浆与标准A 型红细胞及O 型筛检红细胞均不凝集,与标准B 型红细胞强凝集;3. 红细胞吸收人

6、源抗A血清后的放散液与A型红细胞有明显凝集;4. 唾液中检出H 及A 血型物质,未检出B 血型物质第28页/共63页第29页/共63页第30页/共63页第31页/共63页第32页/共63页第33页/共63页第34页/共63页第35页/共63页第36页/共63页正定型反定型抗A抗B抗H抗A1抗AB ABO4+2+mf 2+4+W+当反定型的反应条件在37时,A细胞侧凝集消失,证明是冷凝集素所致,而B细胞侧仍存在弱凝集。第37页/共63页n唾液物质测定唾液中只分泌H 物质。用最佳稀释度的抗-A、抗-B 血清对唾液进行测定,没有发现A、B 物质。第38页/共63页第39页/共63页第40页/共63页

7、家系血型遗传图家系血型遗传图第41页/共63页n家族中其它cisAB 型者大部分为非分泌型,即使是分泌型也仅分泌H 物质。仅发现1 名(先证者之父) 分泌A 及H 物质第42页/共63页第43页/共63页PCRPCRSSPSSP方法用于方法用于ABOABO疑难血型检定疑难血型检定n样品来源：2001年7月-2002年6月河南各地血站及省血液中心血清学方法检测ABO血型正反定型不符的血样共30份。选出本实验室再次血清学检测仍正反定型不符或仍存在疑问的9例作ABO基因检测；另挑选A、B、O、AB型正常样品各2例抽提DNA扩增ABO基因作为对照。第44页/共63页n标本的基本情况1、2、5、7、8号

8、为健康无偿献血者(2号检测出存在抗M)，3号为急性单核细胞白血病(AML)M5患者，4号为1名持续发烧原因待查的患者，6号为自身免疫性溶血性贫血、乙型肝炎、Goombs试验呈阳性，9号为肝癌患者；第45页/共63页第46页/共63页n提取DNAn扩增引物nPCR扩增nPCR扩增产物的检测 取扩增后标本在含05gg的溴化乙锭(EB)的2琼脂糖凝胶中电泳15-20min，观察结果；根据是否产生扩增片段以及片段的长度确定ABO基因型(同时扩增出6和7特异性片段确定A2基因)。第47页/共63页第48页/共63页 根据血清反应格局，1(有冷抗体影响)、2、5、7号判断为亚型，其中5、7号未能检测出B抗原，检出的基因型证实了相应基因的存在并最终确定血型；3号是由于疾病使血型抗原减弱，4号可能因疾病使抗体减弱，6号产生自身抗体使血型判断困难，8号因血清中有较强的冷抗体影响了反定型，9号可能是抗B减弱，此5例均通过AB0基因的检测确定了血型。患者经基因检测确定血型，给予同型血输注治疗均取得满意的效果。第49页/共63页第50页/共63页第51页/共63页第52页/共63页第53页/共63页,ABm1,Bend1;型1例、CisAB型2例。第54页/共63页为29.9 % 0. 520 % = 0. 156 %11. 0 % 4. 03 % = 0. 443 %。第55页/共63页22