三体综合征产前诊断ppt课件

1、21三体综合征产前诊断临床定向1班付霈文2021101301012 案例1： 张某，女，31岁，商场收银员，怀孕15周，担忧所孕胎儿不正常前来进展遗传咨询。经讯问得知，张某的一表姐曾生育一智力低下儿子，经某医院诊断为先天愚型，但详细核型不详。张某孕前检查各项优生目的均正常，孕期无感冒服药史，无有毒有害物质接触史。张某的丈夫，32岁，司机，有烟酒嗜好，在妻子怀孕前半年已戒酒，减少吸烟量。两人核型检查正常，家族中无其他特殊疾病患者。根据张某的情况，作中孕期唐氏筛查，结果张某血清的AFP,hCG和uE3检查结果阳性，再行B超检查胎儿情况，证明胎儿胎龄正确，发育正常。根据上述资料，张某所孕胎儿具有21

2、三体的高风险，建议进展产前诊断。实验原理羊水中有一定数量胎儿零落细胞，经过羊膜穿刺获取羊水中胎儿细胞，经体外培育后经过G显带实验进展核型分析，判别染色体能否畸形，诊断能否畸形，诊断能否患有21三体综合征。 G显带技术：指以Giemsa染料染色后，使染色体显带的技术。Giemsa染料是有噻嗪和曙红组成的，着色时DNA先于2个噻嗪分子结合，然后再与一个曙红分子结合，构成沉淀物，而DNA的某些部位对染料不敏感，由此构成明暗相间的条带。 实验资料，试剂及器材 1器材:离心管，离心机，天平，37温箱，载玻片，盖玻片，恒温水浴锅，光学显微镜，标本板，玻璃铅笔，定时钟，染色缸，直柄虹膜镊，滴管。 2药品：p

3、H6.8PBS,Giemsa,0.025%胰蛋白酶取0.9%氯化钠100ml，加0.25%胰蛋白酶1ml. 实验步骤 取材 体外细胞培育 制片 显带 核型分析 取材 1 腹部备皮，排光膀胱，平卧位常规消毒后铺无菌洞巾。 2 麻醉，普通不用需求，精神紧张者或可用普鲁卡因或利多卡因麻醉。 取材 3 选择穿刺部位，经B超胎盘定位后避开胎盘。 中期妊娠时，普通选择在耻骨结合上3横指相当于子宫下段处，于腹中线或左右侧旁，扪及囊样感的部位做穿刺。 晚期妊娠时，先扪清胎先露，然后上推先露部，在先露部下方穿刺；也可在胎儿颈背部空隙处或胎儿肢体侧空隙处穿刺。 确定穿刺部位后，以2021号腰椎穿刺针垂直刺入腹壁，

4、经过腹壁及宫壁两侧阻力，当有落空感时即进入羊膜腔，抽出芯针，见羊水溢出，接上注射器，顺利抽的清亮羊水，再次证明在羊膜腔内后，可注射药物。如欲做羊水检查，那么抽取羊水20ml立刻送检。 5 穿刺终了后拔出穿刺针，部分压迫5分钟，穿刺部位敷以无菌纱布，胶布固定。 细胞体外培育 无菌超净台上将羊水注入50ml无菌离心管内，1500r/min，常温离心10min,移去上清，留约0。5ml上清液，枪尖混匀，分装汲取至3个60mm培育皿，每皿添加4ml羊水完全培育基，37摄氏度5%CO2培育箱中培育6-7d 制片 培育6-7d后，倒置显微镜下察看细胞生长情况，有假设干梭形型细胞克隆生长，每个克隆细胞形状较

5、好且构成细胞岛，改换新颖培育液，每天察看，2-3d后，每个细胞岛已长成一个个较大克隆且细胞交融度达70%-80%，并出现数目不等的较多圆形，类圆形透亮细胞时，可进展细胞收获，收货前一天或当天改换培育液，参与秋水仙素，至浓度为0.1微克每毫升，作用4-4.5h镜下察看有大量鱼眼样，透明细胞出现时，即可收获。汲取培育上清至一新离心管参与0.25%胰酶，37摄氏度消化2min,1000r/min离心10min,弃上清，参与0.075mol/LKCL低渗液，37摄氏度12-13min用3:1甲醇、冰醋酸预固定和固定后，滴片，常规G显带。 显带 将只好的染色体标本，置72摄氏度-75摄氏度烤箱中烤片3h

6、。 放入预温至37摄氏度的0.025%胰酶溶液中pH=7.27.4消化1min左右，每次的作用时间并不完全一样，颗先试一张片子，再根据如今效果调整胰酶的作用时间 在Giemsa染液中染色10min,自来水冲洗干净，晾干后，即可阅片 镜检;在显微镜高倍目镜下检查显带标本，在染色体上假设出现明晰的深浅相间的带型，即可取标本，可供摄像分析 规范型 占患者总数的92.5%，患儿体细胞染色体有47条，有一条额外的21号染色体，核型为47，XXXY，+21。其机制为亲代多为母亲的生殖细胞在减数分裂是染色体不分别 此外还有嵌合型，核型为46，XX(XY)/47，XX(XY),+21，患儿的智商较其他两型高，临床并发症的发生率液相对较少 易位型 最常见为D/G易位，D组中以14号染色体为主，核型为46，XXX