临床标本收集及保存Word编辑

1、传播优秀Word版文档 ，希望对您有帮助，可双击去除！临床样本的收集与保存样本类型采集方法处理方法保存方法血液样 本l 根据研究需要采集治疗前，治疗中及治疗后的空腹外周静脉血。l 采集时尽量选择与其他常规检验同时进行l 分别采集抗凝血（依据研究目的选择抗凝剂）和非抗凝（干燥或促凝）血液样本l 肿瘤血液样本采集英确保放/化疗前有进行l 血浆样本分离应进行两次离心l 依据科研需求确定样本份数。l 分离提取血浆、血清、白细胞层、血凝块进行分装，每例样本不少于3份。l 血清/血浆：分装3管，0.5ml/管。l 血凝块:分装2管，1cm3/管。l EDTA抗凝：用于DNA提取、淋巴母细胞系建立和蛋白组学

2、研究。分装3管、0.5ml/管l 血清：室温血凝后30min内进行分离、分装；4，24h内进行分离、分装。l 血浆：4，24h内进行分离、分装。l 全血/血清/血浆/血凝块-80长期保存。外周血单个核细胞样 本l 血液样本用EDTA抗凝采集l 全血样本采集后应尽快用淋巴细胞分离液分离单个核细胞l 分离后的单个核细胞应加入细胞冻存液，并利用程序降温仪或程序降温盒进行梯度降温。l 冻存液配置为90%FCS+10%DMSOl 依据科研需求确定样本份数。l 水平室温离心分离PBMC，4低温洗涤。l 分离后单个核细胞加入细胞冻存液，混匀后进行分装，每管0.5ml。l 单个核细胞：4，24h内进行分离、分

3、装。l 分装后-150液氮中保存。组织样 本l 样本采集严禁影响临床病理诊断。肿瘤直径1cm3不建议采集或在病理医生指导下采集，采集部位应与用于石蜡切片相一致。l 样本采集应在离体后30min内完成采集，采集时应避免坏死区及纤维化区，肿瘤细胞应50%。l 依据科研需求确定样本份数。l 肿瘤、瘤旁及非瘤（正常）组织各2-3份。l 石蜡/OCT样本1份或5张组织切片，用于形态学对照。l 需留取质控样本（）留取份数依据科研目的而定）l 每份样本应0.5cm3或300mg或1*107细胞。l 样本置于液氮内转运。l 石蜡样本置于中性福尔马林中常温转运，尽快制成蜡块。l RNA later样本常温转运（

4、24h），-20保存。l OCT样本-20保存。l 新鲜组织样本置于液氮中保存。传播优秀Word版文档 ，希望对您有帮助，可双击去除！l 样本采集时应在洁净环境中操作，保存RNA时应尽量在无菌环境下进行；采集不同样本时应更换采集器材、防止交叉污染。l 4.采集顺序：标明“远癌-近癌-癌灶”顺序，正常组织（距癌灶边缘3cm或最远端）癌旁组织（距离癌灶边缘3cm）癌组织l 采集后样本置于液态液氮中应使用内旋式冻存管，置于气相液氮或-80冰箱中可使用外旋式冻存管。l 每份肿瘤样本应有配对的血液样本。l 石蜡样本不小于0.5*0.5*0.2cm。l 样本/福尔马林液比例应1/5。培养细胞样 本l 采集

5、容器应无菌、干燥、洁净、具有防漏瓶盖。l 吸出培养皿培养液，用PBS冲洗2次，加入胰蛋白酶37消化1min。l 除去胰蛋白酶，加入5ml培养液混匀后取出细胞液进行离心。l 除去上清液后加入细胞保护剂0.5ml，胎牛血清0.5ml及DMSO 0.1-0.2ml混匀放入内旋式冻存管内，进行程序降温。l 干细胞保存加入特定细胞培养液及高浓度胎牛血清。l 依据科研需求确定样本份数。l 每皿细胞对应1个冻存管保存。l 传代细胞建议取处于指数生长期、较大瓶皿培养的80%-90%汇合单层细胞。l 收集培养液时，1000g/min离心5-10min。l 加入胰蛋白酶后需放入恒温箱37恒温1min。l 样本置于

6、液氮内转运。l -150长期保存。尿液样 本l 采集容器应无菌、干燥、洁净、具有防漏瓶盖。l 进行毒理分析时应使用高密度聚丙烯类容器。l 依据科研需求确定样本份数。l 尿液样本100ml。l 分装5管，1ml/管。l 常温保存：4hl 0-424h。l 全尿-80长期保存.传播优秀Word版文档 ，希望对您有帮助，可双击去除！l 检测特殊分析物时应在分管前加入EDTA或焦亚硫酸钠等防腐剂。l 避免经血、白带、精液、前列腺液、粪便污染。l 特殊样本应避光保存l 建议采集首次晨尿。l 尿液样本含有细胞碎片等杂质，应进行离心。l 尿液内细胞采集/分离方法同血液样本。l 不同时段尿样研究方向：首次晨尿

7、：白细胞、红细胞和激素浓度较高；随机尿样：适合常规筛查和细胞学检测；分级尿样：适用于分析物浓度；定时尿样：可用于比较生物分子排泄模式。l 尿液样本可处理为：全尿。l 细胞-150长期保存。粪便样 本l 粪便应取新鲜标本，盛器应洁净，不得混有尿液，不可有消毒剂及污水。l 采集标本时应用干净的竹签选取含有粘液、脓血等病变成分的粪便；外观无异常的粪便需从表面、深处及粪端多处取材，其量至少指头大小。l 冷冻采集后的样本l 依据科研需求确定样本份数。l 采集量30g。l 分装3管，10g/管。l 冷冻干燥保存。l 2-80长期保存.胆汁样 本l 采集容器应无菌、干燥、洁净、具有防漏瓶盖。l 采集清晨胆汁

8、、采集时尽量选择与其他常规检验同时进行。l 依据科研需求确定样本份数。l 采集量10ml。胆汁/RPMI1640比例为：1/25。l 分装5管，2ml/管。l 采集后4保存，时间12h内进行分装。l -150长期保存。传播优秀Word版文档 ，希望对您有帮助，可双击去除！l 胆汁保存应加入细胞培养液(RPMI1640)l 胆汁内细胞采集分离方法同血液样本。脑脊液l 样本采集后应转入含有EDTA和氯化钠混合液中。2.如果含有红细胞或颗粒物时应低温离心。3.采集细胞应使用专业采集方法。4.脑脊液保存应加入保护剂（DMSO）并使用程序降温仪进行梯度降温。l 依据科研需求确定样本份数。2.采集量3ml。3.分装3管，0.5-1ml/管。l 样本置于液氮内转运。2.