【校本课程】校本课程——化学与生活2

1、校本课程化学与生活2实验一 探究二氧化碳的温室效应实验原理：二氧化碳吸收红外辐射，阻止热量反射回环境中，形成温室效应，引起 体系温度升高实验目的：通过探究二氧化碳的温室效应，了解二氧化碳对大气环境的影响。使学 生认识到环境保护的重要性。增强学生环境保护的意识。实验用品：两个锥形瓶、两个单孔塞、两支温度计、两张黑色硬纸板、功率100W 灯泡、二氧化碳气体实验步骤：1、 取两只250mL的锥形瓶，一只充入二氧化碳气体，另一只内是空气，用带温度计的 单孔橡皮塞塞住瓶口。2、将两只锥形瓶并排放在实验桌上，底部各垫一张黑色硬纸板。3、在锥形瓶上方用功率为100W的灯泡均匀照射，观察并记录两根温度计读数的

2、变化。实验现象：充入二氧化碳的锥形瓶中的温度计读数变化较快。实验结论：二氧化碳是温度气体，能引起体系温度较为快速和明显的变化。实验改进：实验仪器：两个相同的塑料瓶，两根相同直径的玻璃管，两个橡皮塞。实验药品：红墨水，二氧化碳气体。 实验步骤：拿两个塑料瓶,一个充满CO2,另一个充满空气 将红墨水装到玻璃管里(一小段水柱-玻璃管越细,实验现象越明 显),将其安放入两个瓶子里(注意保持气密性) 将两塑料瓶放在太阳下,下面垫两张同样大小的黑纸,放置四个小时，观 察并记录现象。 实验现象：玻璃管中的红墨水柱会上升，且充有二氧化碳的瓶子的红墨水上升的距离比空气的多实验结论：证明CO2吸收了相同的热量以后

3、温度升高得比一般空气多，CO2是温室气体。实验二 测定水体的pH 实验原理：自然界中的水由于溶解各种物质，往往显出一定的酸碱性。可以使用pH 试纸测定其酸碱性实验目的: 1、掌握pH试纸测定pH的正确方法。 2、了解自然界水质检测的一般过程。 3、了解水体污染所带来的严重后果，增强保护水资源的意识。实验用品：试管、胶头滴管、表面皿、不同水体水样3份、广范pH试纸、精密pH 试纸实验过程：1、 对三份不同水体水样进行编号。1号七一水库、2号江滨公园污水段、3号林 辋溪。2、 用胶头滴管从1号瓶中吸取待测样品滴于放在表面皿中的广范pH试纸上。观察颜色 变化，与比色卡对比读出其pH。同法测定其余两份

4、试样pH。3、选择与所测得的pH最相近的精密pH试纸，再次测定三份试样pH，记录具体数值。4、依据水样的pH，判断它们是否适合水生生物生长。实验现象：三份不同水体的pH分别为6.7 5.3 6.4实验结论：自然界中的水由于溶解各种物质，往往显出一定的酸碱性。污染较为严重的水体显出较强的酸性或碱性，都是不利于水生生物的正常生长的。甚至还会导致水生生物的死亡。从实验结果来看，七一水库水体较为正常。江滨公园污水段水体污染较为严重，不适合水生生物的存活。而林辋溪早期的污染经过这些年的治理，取水样水段的水质已经有明显的改善。 实验三 废弃塑料的裂解实验原理：塑料是由不饱和烃在一定条件下通过加聚反应得到的

5、高分子化合物。在适当温度和催化剂的作用下可以发生裂解，得到相对分子质量较小的有机化合物。实验目的：通过实验了解塑料的裂解。了解废弃塑料的回收利用方法。实验用品：圆底烧瓶、集气瓶、试管、酒精灯、单孔塞、双孔塞、铁架台、石棉网、 导管、废弃塑料（透明三角板、牙刷柄等）、碎玻璃渣、Al2O3、无水AlCl3、 酸性高锰酸钾、溴水实验过程：1、 取废弃聚苯乙烯塑料制品碎片2030g，放入圆底烧瓶中，加入10g碎玻璃渣和适 量Al2O3或无水AlCl3作催化剂。2、 按P24图130安装好实验装置。B瓶收集液态产物，试管C中盛放稀的酸性高锰 酸钾溶液或溴水。加热烧瓶，观察发生的现象。实验现象：集气瓶B中

6、收集到无色油状液体，试管C中的酸性高锰酸钾溶液或溴水 褪为无色。实验结论：塑料在适当温度和催化剂的作用下可以发生裂解，得到相对分子质量较 小的不饱和有机化合物。实验四 加碘盐中碘含量的测定实验原理：碘在加碘盐中以IO3-的形式存在，已知IO3-在酸性条件下能和I-发生如下 反应： IO3-+5I-+6H+=3 I2+3H2O I22S2O322IS4O62实验目的：1、通过化学实验，检测加碘盐中的碘含量是否符合国家规定标准。2、通过实验了解碘含量的测定方法。3、通过实验掌握滴定的正确操作方法。实验用品：天平、烧杯、50mL量筒、锥形瓶、酸式滴定管、碱式滴定管、滴定管夹、 铁架台、胶头滴管、玻璃

7、棒、加碘盐、 1mol/LKI溶液、 0.1mol/L盐酸、 淀粉溶液、0.001mol/LNa2S2O3溶液实验过程：1、称取10g加碘盐，加水溶解于干净烧杯中配制50mL食盐水。2、将50mL食盐水加入锥形瓶中。向锥形瓶中滴加1mol/LKI溶液约1mL，再滴加几滴 稀盐酸及少量淀粉溶液，观察现象。3、向碱式滴定管中加入0.001mol/LNa2S2O3溶液，调整液面，记下液面读数。4、向锥形瓶中滴加Na2S2O3溶液，边滴加边振荡锥形瓶，待锥形瓶中蓝色正好全部褪去 时停止滴定，半分钟后不恢复原来的蓝色，记录滴定管内液面的读数。5、重复以上实验三次。根据实验，计算该加碘盐中碘的含量。实验现

8、象：滴加稀盐酸后，溶液从无色变为浅棕褐色，加入淀粉溶液后显蓝色。再 滴入最后一滴Na2S2O3溶液后，溶液褪为无色，且半分钟不恢复原来的蓝 色。三次实验的读数分别为19.84mL、19.86 mL、19.82 mL实验结论： 国家从1994年起推出全民食用加碘盐工程，规定每千克加碘盐中含碘 量为2050mg。通过实验数据，计算可得该加碘盐中碘含量约为 42mg/kg，是符合国家规定的加碘盐含碘量的，是合格产品。实验五 淀粉的水解实验原理：多糖可以在一定条件下水解成葡萄糖。葡萄糖含有醛基，可以和新制的 碱性氢氧化铜悬浊液为主要成分的菲林试剂发生反应。 CH2OH-(CHOH)4-CHO+2Cu(

9、OH)2 CH2OH-(CHOH)4-COOH+Cu2O+2H2O 此类反应的颜色变化显著，可用来检验有机物中是否含有醛基。实验目的：1、通过实验了解糖类的水解反应。2、通过实验掌握有机物中醛基的检验方法。实验仪器：试管、酒精灯、试管夹、胶头滴管、淀粉、20硫酸、氢氧化钠溶液、 硫酸铜溶液实验过程：1、 向一支洁净的试管中加入约0.5g淀粉，再加入5mL20%硫酸溶液，将试管在酒精灯 上加热5min，然后滴加适量氢氧化钠溶液使溶液呈碱性。2、 另取一支洁净的试管，先加入2mL0.1moL/L的NaOH，在滴入几滴0.1moL/L的CuSO4 溶液，配制碱性氢氧化铜悬浊液。3、将步骤2所得的悬浊

10、液加到步骤1的试管中，加热煮沸，观察发生的现象。实验现象：加热煮沸后可以看到溶液中有红色沉淀生成。实验结论：淀粉在酸性条件下水解生成含有醛基的葡萄糖。与菲林试剂反应生成红 色Cu2O沉淀。实验六 用纸层析法分析色素实验原理：食品中的着色剂往往是几种色素的混合物。用纸层析法可以将它们分离。 纸层析法是用滤纸作载体，利用不同物质的被吸附能力不同，使用某种 有机溶剂分离混合物中各组分的一种实验操作方法。实验目的：1、了解食品着色剂是多种色素的混合物，了解食品着色的方法。2、通过实验了解纸层析法分离混合物的操作过程。3、初步学会运用纸层析法进行简单的色素分离。实验用品：大试管、滤纸、铅笔、毛细管、回形

11、针、小刀、橡胶塞、苹果味碳酸饮 料、甘油实验过程：1、向一支大试管中加入2mL水和1mL甘油，振荡，使之混合均匀、2、剪一条约2cm宽的长条滤纸，用铅笔在距滤纸一端约1cm处画一道线。用毛细管在 线的正中点一滴苹果味碳酸饮料，晾干后再点，重复三次。要求留下斑点的直径保 持在0.5cm以内。用回形针夹住滤纸另一端。3、用小刀在橡胶塞底部切开一条缝，将夹有滤纸的回形针插入缝中固定。4、将橡胶塞塞入试管口，使滤纸底部恰好浸入溶剂中。注意不要使斑点处接触溶剂， 且纸边不要贴在试管壁上。塞上塞子，以防溶剂挥发。5、观察并记录实验现象。实验现象：一段时间后，饮料中的色素随着溶剂的扩展逐渐分开，形成两条不同

12、的 色带。实验结论：苹果味碳酸饮料中含有柠檬黄和亮蓝，它们都是结构复杂的有机物，以 甘油作溶剂，用纸层析法可以分离它们。实验七 金属铝的性质探究实验原理：铝是一种比较活泼的金属，除了具有金属的共同性质处，还有其自身的 特点，能与酸、碱溶液发生反应。实验目的：1、通过实验探究铝的重要化学性质。2、了解氧化铝保护膜的作用。实验用品：烧杯、试管、坩埚钳、酒精灯、胶头滴管、铝片、0.5moL/LCuSO4溶液、 2moL/LCH3COOH溶液、2moL/LNaOH溶液、浓硝酸实验过程：1、 用坩埚钳夹持一块薄铝片，在酒精灯上加热一段时间，轻轻晃动，仔细观察实验现 象。2、 向一只小烧杯里加入20mL0

13、.5moL/LCuSO4溶液，把一小块铝片浸入溶液，12min后 观察铝片表面的现象。3、 取一支试管，加入10mL2moL/LCH3COOH溶液。将一块铝片浸入CH3COOH溶液几分钟， 观察并记录铝片表面的现象。4、 取一支试管，加入10mL2moL/LNaOH溶液。将一块铝片入入NaOH溶液里，片刻后取 出，用蒸馏水冲洗后浸入CuSO4溶液里。12min后，将铝片取出。观察并记录铝片 表面发生变化。5、 取一支试管，加入10mL浓硝酸。将一块铝片放入浓硝酸里，片刻后取出，用蒸馏水 冲洗后浸入CuSO4溶液里。12min后，将铝片取出。观察并记录铝片表面发生变化。实验现象：1、 可以看到薄

14、铝片受热后软化，内部熔化成流动性的液体。2、 铝片表面没有明显变化。3、开始时铝片表面无明显变化，一段时间后开始有气泡生成，且速度越来越快。4、在NaOH溶液中开始时无明显现象，但很快有气泡生成。取出洗净后放入CuSO4溶液中，一段时间后可以看到表面有红色固体析出。 5、放入浓硝酸中无明显现象，取出洗净后放入CuSO4溶液中表面也无明显变化。实验结论：铝是一种活泼金属，表面因和空气中的氧气反应形成一层致密的氧化膜， 阻止了铝与氧气的进一步反应，使铝具有一定的抗腐蚀能力。铝、氧化 铝都能与酸碱溶液反应。铝常温下遇浓硝酸会钝化。实验八 塑料制品的修补与黏结实验原理：聚乙烯和聚氯乙烯树脂是线型高分子

15、，由它们制成的塑料是热塑性塑料， 加热时可以软化、熔化，冷却后又变成固体。酚醛树脂是体型高分子，制 成的塑料是热固性的，受热不软化。实验目的：1、通过实验了解热塑性塑料和热固性塑料的区别。2、通过实验探究塑料黏结的最佳温度和操作方法。3、通过实验了解不同塑料制品的回收利用方法。实验用品：酒精灯、剪刀、小刀片、镊子、注射器、聚乙烯塑料薄膜、旧塑料凉鞋、 有机玻璃、氯仿实验过程：1、取一些聚乙烯塑料薄膜，卷成细长条后，用热黏结法把它们黏结起来。2、用剪刀剪取两片旧塑料凉鞋上的碎片，用在酒精灯上烧红的小刀片将它们黏结在一 起。3、取几小片有机玻璃，用注射器吸取氯仿作黏结剂，制作有机玻璃小饰品。实验现

16、象：1、 聚乙烯薄膜在火上灼烧后卷曲软化成油状液滴，可着火，但不冒烟，滴落后很快固 化。软化后的两团聚乙烯塑料可以黏结在一起。2、 烧红的小刀片接触到凉鞋碎片后有大量黑烟冒出，抽出小刀片时有拉丝现象。冷却 后两个碎片被黏结在一起。3、将两片涂上氯仿的有机玻璃按合在一起，晾干后黏结在一起。实验结论：热塑性塑料制品可以用加热的方法黏结，在塑料刚刚软化还没有熔化成 油状液体前具有较好的黏结性。塑料也可以回收后重新软化加工。有些 热塑性塑料可以溶解于某些有机溶剂中。实验九 淀粉的测定(戊糖的测定)实验原理：淀粉在淀粉酶作用下或在一定酸度下被分解为单糖然后用测总糖的方法 测定共含量,再乘上换算参数0.9

17、即为淀粉重量。实验目的： 通过实验了解不同食物中淀粉的不同测定方法。实验用品：小麦、米汤等、乙醚、乙醇、稀盐酸、醋酸铅、硫酸钠、硫酸、氢氧化 钠、铝浆、三角瓶、烧杯、锥形瓶、容量瓶、漏斗、铁架台、高压汽蒸锅实验过程：(一).含多量淀粉样品的测定方法:本法适用于含淀粉量多的样品如:小麦糖、米糖、山芋干、藕糖、子蹄糖、糖丝、糕干糖、代乳糖等称干燥样2-3克乙醚洗涤4-5次.每次10毫升 用10%的乙醇150毫升分次洗涤，以除去1克液 将残留液用200毫升水流入三角瓶加稀盐酸(2:1)20毫升至沸水浴溶解2.5HR冷却用20%NaOH中和加铝浆10毫升加入500毫升容量瓶 稀释至刻度过滤取滤液按总糖

18、测定法测定葡萄糖含量所得葡萄糖量乘以0.9即为淀粉含量注意:A.用乙醚提取少量的脂肪,若样品中仅含微量脂肪,乙醚洗涤可以省略. B.用10%乙醇洗涤,以除去可溶性糖类(包括糊精)等物质.(二)含少量淀粉样品的测定法.此法适用于含淀粉量少的植物性样品.如蔬菜以及某些果品等.称5-10克于250毫升三角瓶加1N硫酸100毫升入高压蒸汽锅15秒冷却用20%NaOH中和加入20%醋酸铅20毫升使蛋白质全部沉淀再加入硫酸钠11.5毫升沉淀除铅锥形瓶全部倒入250毫升容量瓶加水至刻度静置过滤取滤液按测定总糖量的方法测定葡萄糖含量另取一分样品按总糖量的测定方法进行转换并测定转化糖量(以葡萄糖计)二者之差为葡

19、萄糖量即为1克淀粉水解而得.（三）熟肉制品中淀粉含量的测定法 在熟肉制品中有的加入相当多的淀粉，有的几乎不加。它们的差别是很大的，在测定这类食品时，根据情况决定取样量的多少。测定方法有重量法、容量法、比色法。a.制品在加热过程中加NaOH和乙醇溶液，破坏其组织和皂化脂肪。b.加醋酸酸化，用C2H5OH使淀粉，沉淀并分离。c.将沉淀滤出称重，或者溶解后加酸水解。d.按总糖的测定方法测葡萄糖并换称成淀粉量(一)容量法：称样5g于500ml磨口锥型瓶中加100ml水和7ml浓盐酸加热回流1h冷却用30%NaOH中和破坏组织、皂化脂肪用滤纸滤入500ml容量瓶（加5ml2%醋酸锌+5ml6%亚铁氰化甲

20、）加水至刻度摇匀按Lane-Eynm Method测定转化糖量（同时做空白试验）计算：淀粉%=500/W100/50（A-b）0.9/V100/1000注：W：样品重量100/50：取50ml样液进行转化后定容至100mlA：样品中淀粉相当于还原糖的重量，（以葡萄糖计）mgB：试剂空白相当还原糖重量，（以葡萄糖计）mgV：取Vml经转化后的样液测定还原糖，ml0.9：还原糖（以葡萄糖计）换称为淀粉的回数1000：将毫克换算成克100：在100克中含淀粉良500：样品溶于500毫升之中（二）比色法称样5g于250ml离心管中加水40ml摇匀（加3ml2%醋酸锌+3ml6%亚铁氰化甲）于1500转

21、/分离心机中离心5分钟倒出上清液加25ml水重复上面操作两次（每次加1ml12%醋酸锌+1ml6%亚铁氰化钾）残渣移入滤纸上然后把残渣移入250ml锥型瓶用50ml0.1N Hcl将残渣清洗入瓶内于68-70C水浴上转化搅拌保持1.5h加12%盐酸（V/V）10ml移入100ml容量瓶加20%磷酸15ml加水至刻度（不算脂肪层）静置30min过滤取滤液1ml于试管中加5ml苯酚钠（溶解8g2，4-二硝基苯酸钠和2.5g苯酚于200ml5%NaOH中；另外溶解100g酒石酸钾钠于700ml蒸馏水中，两者混合并稀释至1升）塞紧波动塞沸水浴6min冷却3min移入100ml容量瓶稀释到刻度静置25m

22、in于540nm下测E空白：以0.2g干燥纯葡萄糖加0.17N Hcl至100ml进行标准空白测定计算：还原糖%=E1/E2bE1：样品的光密度E2：标准空白的光密度B：稀释的浓度实验十 食醋总酸含量的测定实验原理：食醋中含醋酸（CH3COOH）35%（质量/体积），此外还有少量乳酸等有 机酸弱酸。用NaOH溶液滴定时，实际测出的是总酸量，即食品中所有酸 性成分的总量。它包括未离解的酸和已离解的酸，而分析结果通常用含 量最多的醋酸来表示。它们与NaOH溶液的反应为： CH3COOH+NaOH = CH3COONa + H2O HnA（有机酸）+nNaOH = NanA + nH2O由于是强碱滴

23、定弱酸，滴定的pH突变在碱性范围内，理论上滴定终点的pH在8.7左右。通常用酚酞作指示剂，滴至溶液呈粉红色且30s内不褪色，表明达到滴定终点。实验目的：1认识用NaOH溶液滴定醋酸的反应原理。2练习移液管、滴定管、容量瓶的使用方法，初步掌握中和滴定的基本技能。3能通过实验收集有关数据，并正确地加以处理。4应用中和滴定法测定食醋的含酸量，体验用化学定量分析方法解决实际问题的过程。5培养学生实事求是的科学态度和创新精神。实验用品：杭州香醋（白米醋）、移液管、容量瓶、碱式滴定管、酸式滴定管、锥 形瓶、铁架台、滴定管夹、洗耳球、玻璃棒、浓度约为0.100moLL-1NaOH 标准溶液、0.1%酚酞溶液

24、,蒸馏水。实验过程：1配制待测食醋溶液 用25mL移液管吸取市售食醋25mL，置于250mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀即得 待测食醋溶液。2用酸式滴定管或移液管量取待测食醋样品25mL于锥形瓶中3把标准NaOH溶液装入碱式滴定管4用NaOH标准溶液滴定待测食醋溶液5数据记录与处理注意事项（1）碱标准溶液常用NaOH来配制，KOH一般并不优于NaOH，而且价格较高，仅在个别特殊情况下使用。（2）由于NaOH固体易吸收空气中的CO2和水分，不能直接配制碱标准溶液，而必须用标定法。（3）白醋和米醋可以直接滴定，一般的食醋由于颜色较深不利于滴定终点的判断，可稀释后用中性活性炭脱色后再行滴定（脱色比

25、较麻烦且效果也不甚理想）。（4）为消除CO2对实验的影响，减少实验误差，配制NaOH溶液和稀释食醋的蒸馏水在实验前应加热煮沸23分钟，以尽可能除去溶解的CO2，并快速冷却至室温。实验十一 脂溶性维生素的测定一、维生素A目前维生素A都是合成的，来源：（1）从动物肝脏中得到；（2）从维生素前体而得到（维生素前体：主要指类胡萝卜素，主要是-胡萝卜素）维生素A的测定常用的方法有三氯化锑比色法、紫外分光光度法、荧光分析法、液相色谱法。对于三氯化锑比色法适用于样品中含VA高的样品，方法简便、快速、结果准确，但是对维生素A含量低的样品，如每克样品中含510g维生素A时，这时样品由于受其脂溶性物质的干扰，不应

26、用比色法测定。对于紫外分光光度法不必加显色剂显色，可直接测定维生素A的含量，对样品中含VA低的也可以测出可信结果，操作简便、快速。1、维生素A的性质因有许多不饱和链，故见光易分解；在缺氧情况下，对热较稳定，对光特别敏感。如测强化奶粉时，速度要快，一般要求测定时间长短，因为时间长，见光时间长，见光分解，故测出的比出厂的含量要少；对碱稳定；实验过程：样品用有机溶剂萃取脂类样品可以根据脂肪的测定处理脂肪，即索氏抽提法，采用乙醚作提取剂，也可用热苯回流方法提取脂类。如果样品中含蛋白质和淀粉多的情况下可采用乙醚提取法。脂类的皂化脂类有维生素和脂肪这两部分通过皂化（50%KOH、无水C2H3OH、热回流）

27、把它们分开，得到一部分皂化物和一部分不皂化物。皂化条件：（1）C2H3OH脂类= 81；（2）KOH量=脂量皂化价（mg）2.5；（3）皂化温度与时间：70、30分钟在皂化时可以加入抗氧剂连苯二酚和对苯二酚，防止氧化。提取：不皂化物和皂化物经水、苯、乙醚萃取可得到不皂化物。柱层析分离干扰物质采用柱层析分离干扰物质，如果柱层析把-胡萝卜素也洗脱下来，那么这时维生素A与-胡萝卜素就是一个混合物，还要将它们分离开。如果样品中只有维生素A而不含-胡萝卜素时，这时可直接定容。维生素A与-胡萝卜素分离：吸附剂：8分中性Al2O3和2分碱性Al2O3混合，装柱分离方法：a.用2%丙酮石油醚洗-胡萝卜素； b

28、.用乙醚洗VA。测定方法：SbCl3比色法维生素ACHCl3SbCl3CHCl3形成兰色物质在620nm有最大吸光峰这种兰色物质不稳定，很快褪色或变成其它物质，所以在分析时最好在暗室中进行，并且做标准曲线。计算：每百克样品含VA的量= C（V1/V2）（100/W）C：从标准曲线上查得VA的量V1：CHCl3定容的量V2：测定所取样液体积紫外分光光度法a.原理：VA为脂溶性的，测定VA时必须先将样品中的脂肪抽提出来进行皂化，萃取不皂化部分，在经柱层析除去杂质等干扰物质，在紫外328nm下测定，求出含量。b.方法1）提取及皂化称样10.00g于烧杯中加40ml水搅匀移250ml分液漏斗中加氨水5

29、ml加乙醇35ml摇匀用乙醚抽提（每次40ml抽提三次）收集乙醚层用10ml水洗乙醚层三次水层再用30ml乙醚抽提一次合并所用乙醚用索氏法除乙醚待瓶中乙醚除尽后加30ml80%的KOH40mlC2H5OH加0.8g焦性没食子酸83水浴30分钟（皂化脂肪）冷却后移入250ml分液漏斗中加60ml水用40ml乙醚抽提三次合并乙醚抽提液用水洗至中性用索氏法除乙醚除去后用5ml石油醚溶解瓶中内容物然后移入刻度试管中2）层析在层析柱内装8cm高度中性氧化铝2cm高度碱性氧化铝及1cm无水硫酸钠以石油醚浸透装皂化后的样液慢慢于柱内用12ml石油醚洗试管洗液倒入柱内，活塞打开以每分钟为35滴左右的速度打开，

30、当液面降到接近硫酸钠时加5ml石油醚随后用5ml洗脱液逐次洗涤。层析柱上第一个黄色层析层，一般是-胡萝卜素，此带在12%洗脱液前后洗去，收集于10ml容量瓶中直到流出物不呈黄色为止，此层可测-胡萝卜素用，而VA一般在50%洗脱液洗出，用2ml刻度吸管收集1ml。吸约0.2ml于小试管中加0.3ml25%三氯化锑溶液如呈兰色表明有VA存在，故0.5ml用石油醚定容10ml。3）样液测定以石油醚为空白4）计算VA(I.100G)=(E1062)/(1830100W)(1000/0.3)0.3：每0.3g VA相当于1 I.E：消光值 W：样品重量（g）1830：石油醚中其消光值1%cm为1830（

31、I.）：一个国际单位，维生素A相当于0.6g-胡萝卜素。4、试剂50%KOH； 无水硫酸钠； 乙醚（不含过氧化氢）； 石油醚； 苯；45%C2H5OH（应不含醛类物质）酒精中含醛类的检查方法：首先配银氨溶液，在50%硝酸银溶液中加入浓氨水，直到氧化银沉淀又重新溶解为止，在小试管中加2ml银氨溶液，加35滴酒精，摇匀，加10%NaOH 1滴加热，若有银镜反应，表示乙醇中含有醛。脱醛处理：取乙醇2000ml加AgNO32g振摇溶解加NaOH 4g振摇溶解过滤上清液蒸馏即可2025% SbCl3的CHCl3先量取100mlCHCl3于广口瓶中，用减差法称取一定量的干燥SbCl3，SbCl3易吸水，所

32、以必需蒸馏重结晶后使用，一般用沙浴上加热。二、维生素D维生素D在鱼肝油和鸡蛋黄等食品中含量较多，一般成人不会缺VD，而婴儿容易缺乏。实验过程：提取样品（奶粉）水混匀在NH4OH的作用下酪蛋白Ca盐溶解加入乙醇使脂肪球分离乙醚、石油醚萃取得到脂质（其它样品可用索氏提取得到脂质）皂化在奶粉中脂溶性物质有VD、-胡萝卜素、VA、VE、甾醇、脂肪。目前皂化有三种情况：低温（室温）中温（702）高温（10015min）低碱低碱低碱回收率不完全回收率46%回收率70%低碱=脂肪KOH为12.5的关系另外在皂化时加抗氧化剂与不加抗氧化剂回收率不一样，加抗氧化剂的回收率高于不加抗氧化剂的回收率。有人将上面的皂

33、化条件互补，采用中温-高碱并加抗氧化剂，这样的回收率为96.8%，效果较好。故皂化条件：702高碱+抗氧化剂萃取除甾醇甾醇在食品中含量较多，主要是通过柱子，这个柱子就是毛地黄皂甙。甾醇+毛地黄皂甙沉淀洗脱液用乙醚己烷= 15配制而成甾醇毛地黄皂甙 = 114用量皂土柱层析当VD与VA共存时，须用皂土柱层析除VA及VA的分解产物。测定方法有两种：比色法：维生素ACHCl3SbCl3CHCl3乙酰氮形成橙黄色物质500nm下测定紫外分光光度法VD乙醇265nm下测定实验十二 几种常用的蛋白鉴定方法传统的蛋白鉴定方法，如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一

34、个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力，不适合高流通量的筛选。 目前，所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。1 图象分析技术（Image analysis）“满天星”式的2-DE图谱分析不能依靠本能的直觉，每一个图象上斑点的上调、下调及出现、消失，都可能在生理和病理状态下产生，必须依靠计算机为基础的数据处理，进行定量分析。 在一系列高质量的2-DE凝胶产生（低背景染色，高度的重复性）的前提下，图象分析包括斑点检测、背景消减、斑点配比和数据库构建。 首先，采集图象通常所用的系统是电荷耦合CCD（charge couple

35、d device）照相机；激光密度仪（laser densitometers）和Phospho或Fluoroimagers，对图象进行数字化。 并成为以象素（pixels）为基础的空间和网格。 其次，在图象灰度水平上过滤和变形，进行图象加工，以进行斑点检测。 利用Laplacian，Gaussian，DOG（difference of Gaussians） opreator使有意义的区域与背景分离，精确限定斑点的强度、面积、周长和方向。图象分析检测的斑点须与肉眼观测的斑点一致。 在这一原则下，多数系统以控制斑点的重心或最高峰来分析，边缘检测的软件可精确描述斑点外观，并进行边缘检测和邻近分析，以

36、增加精确度。 通过阈值分析、边缘检测、销蚀和扩大斑点检测的基本工具还可恢复共迁移的斑点边界。 以PC机为基础的软件Phoretix-2D正挑战古老的Unix为基础的2-D分析软件包。 第三，一旦2-DE图象上的斑点被检测，许多图象需要分析比较、增加、消减或均值化。 由于在2-DE中出现100%的重复性是很困难的，由此凝胶间的蛋白质的配比对于图象分析系统是一个挑战。 IPG技术的出现已使斑点配比变得容易。 因此，较大程度的相似性可通过斑点配比向量算法在长度和平行度观测。 用来配比的著名软件系统包括Quest，Lips，Hermes，Gemini等，计算机方法如相似性、聚类分析、等级分类和主要因素

37、分析已被采用，而神经网络、子波变换和实用分析在未来可被采用。 配比通常由一个人操作，其手工设定大约50个突出的斑点作为“路标”，进行交叉配比。 之后，扩展至整个胶。例如：精确的PI和MW（分子量）的估计通过参考图上20个或更多的已知蛋白所组成的标准曲线来计算未知蛋白的PI和MW。 在凝胶图象分析系统依据已知蛋白质的pI值产生PI网络，使得凝胶上其它蛋白的PI按此分配。 所估计的精确度大大依赖于所建网格的结构及标本的类型。 已知的未被修饰的大蛋白应该作为标志，变性的修饰的蛋白的PI估计约在0。25个单位。 同理，已知蛋白的理论分子量可以从数据库中计算，利用产生的表观分子量的网格来估计蛋白的分子量

38、。 未被修饰的小蛋白的错误率大约30%，而翻译后蛋白的出入更大。 故需联合其他的技术完成鉴定。2 微量测序（microsequencing）蛋白质的微量测序已成为蛋白质分析和鉴定的基石，可以提供足够的信息。 尽管氨基酸组分分析和肽质指纹谱（PMF）可鉴定由2-DE分离的蛋白，但最普通的N-末端Edman降解仍然是进行鉴定的主要技术。 目前已实现蛋白质微量测序的自动化。 首先使经凝胶分离的蛋白质直接印迹在PVDF膜或玻璃纤维膜上，染色、切割，然后直接置于测序仪中，可用于subpicomole水平的蛋白质的鉴定。 但有几点需注意：Edman降解很缓慢，序列以每40 min 1个氨基酸的速率产生；与

39、质谱相比，Edman降解消耗大；试剂昂贵，每个氨基酸花费34$。 这都说明泛化的Edman降解蛋白质不适合分析成百上千的蛋白质。 然而，如果在一个凝胶上仅有几个有意义的蛋白质，或者如果其他技术无法测定而克隆其基因是必需的，则需要进行泛化的Edman降解测序。近来，应用自动化的Edman降解可产生短的N-末端序列标签，这是将质谱的序列标签概念用于Edman降解，业已成为一种强有力的蛋白质鉴定。 当对Edman的硬件进行简单改进，以迅速产生N-末端序列标签达1020个/d，序列检签将适于在较小的蛋白质组中进行鉴定。若联合其他的蛋白质属性，如氨基酸组分分析、肽质质量、表现蛋白质分子量、等电点，可以更

40、加可信地鉴定蛋白质。 选择BLAST程序，可与数据库相配比。 目前，采用一种Tagldent的检索程序，还可以进行种间比较鉴定，又提高了其在蛋白质组研究中的作用。3 与质谱（mass spectrometry）相关的技术质谱已成为连接蛋白质与基因的重要技术，开启了大规模自动化的蛋白质鉴定之门。 用来分析蛋白质或多肽的质谱有两个主要的部分，1）样品入机的离子源，2）测量被介入离子的分子量的装置。 首先是基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱（MALDI-TOF）为一脉冲式的离子化技术。 它从固相标本中产生离子，并在飞行管中测其分子量。 其次是电喷雾质谱（ESI-MS），是一连续离子化的方法，从液相中

41、产生离子，联合四极质谱或在飞行时间检测器中测其分子量。 近年来，质谱的装置和技术有了长足的进展。在MALDI-TOF中，最重要的进步是离子反射器（ion reflectron）和延迟提取（delayed ion extraction），可达相当精确的分子量。 在ESI-MS中，纳米级电雾源（nano-electrospray source）的出现使得微升级的样品在3040 min内分析成为可能。将反相液相色谱和串联质谱（tandem MS）联用，可在数十个picomole的水平检测；若利用毛细管色谱与串联质谱联用，则可在低picomole到高femtomole水平检测；当利用毛细管电泳与串联质

42、谱连用时，可在小于femtomole的水平检测。 甚至可在attomole水平进行。 目前多为酶解、液相色谱分离、串联质谱及计算机算法的联合应用鉴定蛋白质。 下面以肽质指纹术和肽片段的测序来说明怎样通过质谱来鉴定蛋白质。(1)肽质指纹术（peptide mass fingerprint， PMF）由Henzel等人于1993年提出。 用酶（最常用的是胰酶）对由2-DE分离的蛋白在胶上或在膜上于精氨酸或赖氨酸的C-末端处进行断裂，断裂所产生的精确的分子量通过质谱来测量（MALDI-TOF-MS，或为ESI-MS），这一技术能够完成的肽质量可精确到0。1个分子量单位。 所有的肽质量最后与数据库中理论肽质量相配比（理论肽是由实验所用的酶来“断裂”蛋白所产生的）。 配比的结果是按照数据库中肽片段与未知蛋白共有的肽片段数目作一排行榜，“冠