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1、DOC格式论文,方便您的复制修改删减中药天年饮对衰老大鼠肝功能的保护作用(作者:单位:邮编:)作者:杨振军谢红林李皓岩薛景凤【摘要】目的观察中药天年饮对衰老大鼠肝功能的保护作用。方法 40只SD大鼠随机分为4组:正常组、衰老模型组、天年饮用药组 和阴性对照组,每组10只;D-半乳糖连续腹腔注射(200 mg kg-1 d-1,连续40 d)制作亚急性衰老的大鼠模型,并给予天年 饮灌胃(30 d)。分别采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法检测大 鼠血清SOD活性和MDA含量,IFCC连续监测法检测大鼠血清 ALT,AST,ALP和yGT等各项肝功能指标。结果天年饮可明显提 高衰老大鼠血清的SOD活

2、性、降低MDA含量,天年饮用药组与衰 老模型组比较差异显著(P V 0.05或P V 0.01 );天年饮可明显降低 衰老大鼠血清ALT、AST、ALP和yGT含量,天年饮用药组与衰老 模型组比较差异显著(P V 0.05或P V 0.01 )。结论天年饮可提高衰 老机体的抗氧化能力,改善肝细胞脂质代谢、保护肝细胞的功能,具 有一定延缓衰老的作用。【关键词】 天年饮 衰老 肝功能 大鼠衰老是一种在遗传和环境等多种因素作用下的正常生理过程。许多 实验证实,机体的衰老与自由基生成过多有关, 过多的自由基可导致 生物膜功能障碍,弓I起肝、脑、肾等重要器官的功能障碍1。天年 饮由何首乌、肉苁蓉、丹参等

3、中药制成,具有补肝肾、益精血、延年 益寿等功效。我们的研究已经发现天年饮可改善衰老大鼠的学习记忆 功能,延缓性腺衰老23,本研究继续观察了天年饮对衰老大鼠 肝功能的保护作用。1材料和方法1.1药品与试剂D-半乳糖由北京化学试剂公司生产(批号:020402 ),用生理盐水配制成25%的溶液,按200 mg kg-1 d-1给药。天年饮由何首乌、肉苁蓉、丹参、淫羊藿、怀牛膝、茯苓6味中药组成,经熬制后每毫升含生药1.5 g灌胃。检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的试剂盒由南京建成生物工程 研究所提供;检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的试

4、剂盒购自北京首都医科大学临床医疗科技中心。1.2动物的选择及分组 成年雌性SD大鼠40只,体重180 250 g,由河北医科大学实验动物学部提供。将 40只大鼠随机分为4 组:正常组、模型组、天年饮用药组和阴性对照组,每组均为10只。其中模型组、用药组、阴性对照组大鼠均采用D-半乳糖连续腹腔注射(1次/d,共40 d)制作亚急性衰老的大鼠模型,模型组大鼠造模 成功后不再做任何处理;天年饮用药组大鼠于造模成功后每天用天年 饮灌胃,共30 d ;阴性对照组于造模成功后每天用同等剂量的生理 盐水灌胃,时间同用药组大鼠。1.3指标检测 大鼠经内眦取血,2 000 r/min离心10 min,取 上清液

5、,-20 C冰箱保存待测。1.3.1 SOD活性及MDA含量分别采用黄嘌呤氧化酶法和硫代 巴比妥酸法检测大鼠血清 SOD活性和MDA含量。132肝功能应用HITACHI 717全自动生化分析仪、IFCC连 续监测法检测大鼠血清中的 ALP和AST。1.4统计学处理 采用SPSS11.0统计软件以方差分析进行统 计分析,PV 0.05为差异显著性的标准。2结果2.1大鼠血清SOD活性和MDA含量 见表1。与正常组大鼠比较,模型组大鼠血清 SOD活性明显降低(PV0.05)、MDA含量明显升高(PV0.01 );与模型组大鼠比较天 年饮用药组大鼠血清 SOD活性明显升高(PV 0.05 )、MDA

6、含量明 显降低(P V 0.01 ),差异显著。表1大鼠血清SOD活性和MDA含量(略)与正常组比较,#P V 0.05,*P V 0.01 ;与模型组比较,#P V0.05,*P V 0.01 ; n=102.2各组大鼠的肝功能见表2 衰老模型组大鼠各项肝功能指标均明显高于正常组大鼠(PV 0.01 );天年饮可明显降低模型组大鼠各项肝功能指标,与模型组比较差异显著(P V 0.05或P V 0.01 )。表2各组大鼠的肝功能(略)与正常组比较,*P V 0.01 ;与模型组比较,*P V 0.05 , # P V0.01 ; n=103讨论灵枢天年中详细描述了人衰老过程中五脏功能衰退的 时

7、间顺序:“五十岁,肝气始衰,肝叶始薄,胆汁始灭,目始不明。六 十岁,气始衰,苦忧悲,血气懈惰,故好卧。七十岁,脾气虚皮肤枯 ” 其中肝在五脏中最先出现衰老征象。天年饮方由刘河间宣明论方 何首乌丸加味而成,何首乌丸本由何首乌、肉苁蓉、怀牛膝组成,能 填精补髓、乌发延年;于此基础上加淫羊藿补肾壮阳以强筋骨,丹参 活血化淤以通心脉,茯苓健脾利湿以宁心神。诸药相配通调心脾肝肾 四脏,而以肾为主,气机条达,血脉流通,衰从何由。衰老是生命过程中正常的生理现象,自1956年英国学者Haman提出自由基学说以来,大量实验表明自由基及其引起的脂质 过氧化反应是引起生物衰老的主要原因。 在正常情况下机体内存在包

8、括SOD、谷胱甘肽过氧化物酶等在内的抗氧化物质,使体内活性氧(ROS)的产生与消除处于平衡状态。有研究表明,SOD活性下降与衰老密切相关,它的活性降低被认为是衰老的一项重要指标4;MDA是自由基损伤不饱和脂肪酸生成的脂类过氧化分解产物,其含 量升高可间接证明自由基水平增高和反应机体活性氧损伤效应5 o随着年龄的增长,机体抗氧化防御体系活性降低,清除自由基能力下 降,ROS产生过多,过量的ROS可以攻击位于线粒体内膜上的脂类、 蛋白质和mtDNA,影响线粒体的功能,导致细胞受损、衰老和疾病 的发生6。本研究发现,中药天年饮可明显提高衰老大鼠血清 SOD 活性、降低MDA含量,表明天年饮可提高衰老

9、机体的抗氧化能力, 有效清除衰老机体内过多的氧自由基,减轻自由基造成的过氧化损 伤。由于细胞膜富含不饱和脂肪酸,使得细胞膜成为自由基攻 击的主要靶位7o衰老时过多的氧自由基攻击细胞膜, 诱发膜上不 饱和脂肪酸过氧化反应,引起膜脂质间或膜脂质与膜蛋白间的交联, 导致膜的结构和功能发生改变,从而改变肝细胞膜的通透性,影响细 胞内环境的稳定,导致肝细胞凋亡增加,使肝细胞内的转氨酶漏入血 液中,引起外周血液循环中的酶学变化8。另外,衰老机体内过多 的氧自由基不但可导致线粒体和微粒体的过氧化损伤,还可诱导核酸的过氧化损伤,导致肝细胞核的破坏而使肝细胞发生坏死 9。ALT 与AST迄今仍被认为是肝细胞损害

10、的“金标准” 10 。其中ALT存在 于肝、肾、胰、脾、肺、红细胞和血清中,以肝脏含量最高,主要存 在肝细胞浆中,在肝细胞膜的通透性增加时即使无坏死, 肝细胞内转 氨酶也可由此明显的浓度梯度差而漏入血中11 。AST也是反应肝 细胞线粒体功能、肝细胞坏死的重要指标12。ALP和y-GT均由 肝细胞合成和分泌,自胆管排泄,是肝胆疾病的敏感指标,在慢性肝 脏疾病时往往升高13。本研究发现,中药天年饮可显著降低衰老 大鼠血清ALT,AST,vGT和ALP的含量,表明中药天年饮具有明 显改善肝细胞脂质代谢、保护肝细胞的功能,其作用机制有待于进一 步的深入研究。【参考文献】1 Ma nda K, Bha

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