动物细胞工程—

1、动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞培养动物细胞培养、 动物细胞核移植、动物细胞核移植、动物细胞融合、动物细胞融合、 单克隆抗体单克隆抗体提问：提问：v植物细胞工程常用的技术手段有哪些？植物细胞工程常用的技术手段有哪些？植物组织培养植物组织培养, 植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物组织细胞间隙中含动物组织细胞间隙中含有一定量的有一定量的弹性纤维等弹性纤维等蛋白质蛋白质， 动物细胞培养适宜动物细胞培养适宜的的PH为为7.27.4，此环境下胃蛋白酶此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，）没有活性，而胰蛋白酶而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。的活性较高。细胞细胞悬浮悬浮

2、液液1010代代细胞细胞5050代代细胞细胞无限无限传代传代原代培养原代培养传代培养传代培养细胞株细胞株细胞系细胞系3 3. .如何界定如何界定原代培养原代培养和和传代培养传代培养；细胞株和细胞系？；细胞株和细胞系？多数组织细胞固定在表面多数组织细胞固定在表面生长和分裂。生长和分裂。随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖遗传物质改变遗传物质改变接触抑制接触抑制4. 4. 动物细胞培养条件动物细胞培养条件1、无菌、无毒的环境、无菌、无毒的环境 （添加一定量的（添加一定量的抗生素抗生素，定期更换定期更换培养液）培养液）2、营养、营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、葡萄糖

3、、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清动物血清等。等。）3、温度和、温度和PH 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.44、气体环境：、气体环境： O2和和CO2（95%空气和空气和5% CO2 ）保证细胞顺利的保证细胞顺利的生长增殖生长增殖与植物培养基相比其特点是：与植物培养基相比其特点是：（1 1）液体培养基）液体培养基（2 2）含有动物血清）含有动物血清动物体细胞大都生动物体细胞大都生活在活在液体液体的环境的环境5. 5. 植物细胞和动物细胞培养的比较植物细胞和动物细胞培养的比较细胞的全能性细胞的全能性细胞株、细胞系细胞株、细胞系植物体植物体培养结果培养结果获得细胞获得细胞或或细胞产物细胞

4、产物快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株等无病毒植株等培养目的培养目的葡萄糖、动葡萄糖、动物血清物血清蔗糖、植物蔗糖、植物激素激素培养基特有成分培养基特有成分液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目6. 6. 动物细胞培养技术的应用动物细胞培养技术的应用1、获得细胞产物，如蛋白质生物制品、获得细胞产物，如蛋白质生物制品病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等等2、获得烧伤病人、获得烧伤病人植皮植皮所需的细胞所需的细胞3、获得细胞用于检测有、获得细胞用于检测有毒物质毒物

5、质卵细胞卵细胞母绵羊母绵羊母绵羊母绵羊乳腺细胞乳腺细胞细胞质细胞质细胞核细胞核细胞核移植细胞核移植早期胚胎早期胚胎卵裂卵裂C母绵羊子宫母绵羊子宫胚胎移植胚胎移植多莉羊多莉羊分娩分娩妊娠妊娠多莉羊的培育过程多莉羊的培育过程融合后的卵细胞融合后的卵细胞 将动物的一个细胞的将动物的一个细胞的，移入一个，移入一个已经已经中，使其重组并中，使其重组并发育成一个发育成一个新的胚胎新的胚胎，这个新的胚胎最终发，这个新的胚胎最终发育成动物个体。育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物用核移植的方法得到的动物称为克隆动物称为克隆动物2.3.单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备 医院一般怎样检测人体内是否存在乙肝病毒

6、？医院一般怎样检测人体内是否存在乙肝病毒？ 抗体抗体 抗体抗体 抗原抗原 应答应答 抗体的不纯性抗体的不纯性 动物细胞受到抗原刺激动物细胞受到抗原刺激, ,引起免疫反应产生的球蛋白引起免疫反应产生的球蛋白. .不是自己的而又能引起免疫应答反应的物质就是抗原不是自己的而又能引起免疫应答反应的物质就是抗原. .一种抗原有多种不同的决定簇一种抗原有多种不同的决定簇, ,刺激的是多种刺激的是多种B B细胞细胞, ,作用于作用于不同的不同的B B细胞后细胞后, ,会产生多种抗体会产生多种抗体, , 这是多克隆的这是多克隆的, , 故不纯故不纯! ! 抗原抗原 B B细胞细胞浆细胞浆细胞 抗体抗体 刺激刺

7、激 怎么才能得到纯的抗体怎么才能得到纯的抗体? ? 光纯还不行光纯还不行, ,还要大量还要大量. .怎么办怎么办? ? 但，有但，有问题问题: : 找，什么细胞能无限繁殖呢找，什么细胞能无限繁殖呢? ? 思路就出来了思路就出来了: :要想获单一的纯抗体要想获单一的纯抗体, ,就必须从一个就必须从一个B B细胞出发细胞出发. .让让B B细胞大量繁殖细胞大量繁殖( (克隆克隆) )就可以产生大量抗体了就可以产生大量抗体了. .B B细胞是不能无限繁殖的细胞是不能无限繁殖的. .怎么办怎么办? ?癌癌! ! 只有癌细胞只有癌细胞. . 但它不能产生抗体但它不能产生抗体. .癌细胞能无限繁殖癌细胞能无限繁殖, ,但不能产生抗体但不能产生抗体.B.B细胞能产生抗体细胞能产生抗体, ,但不能大但不能大量繁殖量繁殖. .融合呀融合呀! !只要将两个细胞融合即可互补只要将两个细胞融合即可互补. . 细胞两两融合后，有哪细胞两两融合后，有哪些类型？些类型？ 图中图中B为为_过程，