凝胶净化浓缩仪--培训

1、郭泰郭泰上海磐和电子科技有限公司上海磐和电子科技有限公司Tel:ax:PC.SPE原理介绍原理介绍Freestyle仪器硬件介绍仪器硬件介绍操作规程，日常维护及常见故障判操作规程，日常维护及常见故障判断处理断处理工作站操作培训工作站操作培训经过经过GPC净化净化未经过未经过 GPC净化净化目前在对各类中药类样品、环境样品和食品样品中的农药目前在对各类中药类样品、环境样品和食品样品中的农药残留物分析时，一般样品的萃取物中含有大量的高分子物残留物分析时，一般样品的萃取物中含有大量的高分子物质质,比如色素、油脂、糖等，这些高分子聚集在比如色素、油

2、脂、糖等，这些高分子聚集在GC的进样的进样口和分析柱上，造成色谱分离效率降低。因此，这类样品口和分析柱上，造成色谱分离效率降低。因此，这类样品必须进行有效的净化。必须进行有效的净化。凝胶渗透色谱（凝胶渗透色谱（GPC）作为样品净化的手段之一，已被证）作为样品净化的手段之一，已被证明是一种使用最为方便的样品净化技术。这种净化技术在明是一种使用最为方便的样品净化技术。这种净化技术在国外已经得到较为广泛的应用国外已经得到较为广泛的应用,它已成为美国环保局它已成为美国环保局（EPA）,食品药物管理（食品药物管理（FDA）,美国分析化学协会美国分析化学协会（AOAC）及欧州）及欧州(EN)法定方法法定方

3、法 。流向流向高分子量废弃物高分子量废弃物收集被分析物收集被分析物 Bio-Beads先流出物先流出物主要流出物主要流出物tt SPE是一种吸附剂萃取，样品通过填充吸附剂的一次性萃取柱，分析是一种吸附剂萃取，样品通过填充吸附剂的一次性萃取柱，分析物和杂质被保留在柱上，然后分别用选择性溶剂去除杂质，洗脱出分析物和杂质被保留在柱上，然后分别用选择性溶剂去除杂质，洗脱出分析物，从而达到分离的目的。物，从而达到分离的目的。 SPE的分离模式主要取决于填充剂的类型和溶剂的性质的分离模式主要取决于填充剂的类型和溶剂的性质. SPE也是一个柱色谱分离过程，分离机理、固定相和溶剂的选择等方也是一个柱色谱分离过

4、程，分离机理、固定相和溶剂的选择等方面与高效液相色谱（面与高效液相色谱（HPLC）有许多相似之处。）有许多相似之处。 但是但是SPE柱的填料粒径（柱的填料粒径（40m）要比）要比HPLC填料（填料（310m）大。）大。由于短的柱床和大的粒径，由于短的柱床和大的粒径，SPE柱效比柱效比HPLC色谱柱低得多。因此，用色谱柱低得多。因此，用SPE只能分开保留性质有很大差别的化合物。只能分开保留性质有很大差别的化合物。 与与HPLC的另一个差别是的另一个差别是SPE柱是一次性使用柱是一次性使用简单、快速和简化了样品预处理操作步骤简单、快速和简化了样品预处理操作步骤 ,缩缩短了预处理时间。短了预处理时间

5、。处理过的样品易于贮藏、运输处理过的样品易于贮藏、运输 ,便于实验室间便于实验室间进行质控。进行质控。可选择不同类型的吸附剂和有机溶剂用以处理可选择不同类型的吸附剂和有机溶剂用以处理各种不同类的有机污染物。各种不同类的有机污染物。不出现乳化现象不出现乳化现象 ,提高了分离效率。提高了分离效率。仅用少量的有机溶剂仅用少量的有机溶剂 ,降低了成本。降低了成本。易于与其他仪器联用易于与其他仪器联用 ,实现自动化在线分析实现自动化在线分析。常见固相萃取小柱的构造常见固相萃取小柱的构造真空浓缩腔真空浓缩腔高效冷凝柱高效冷凝柱SPE模块模块进样泵进样泵GPC泵泵GPC柱柱定量环定量环GPC进样针进样针SP

6、E进样针进样针注射器注射器缓冲管缓冲管溶剂切换十通阀溶剂切换十通阀液相泵密封塞液相泵密封塞主机电源主机电源浓缩系统电源浓缩系统电源电源开关：关闭电源后，再打开中间要间隔电源开关：关闭电源后，再打开中间要间隔1分钟。分钟。低温恒温水槽低温恒温水槽低温水槽：低温水槽： 提供冷凝塔的冷凝水，冷凝水温度提供冷凝塔的冷凝水，冷凝水温度2-6 可选配：可选配：1、254或或280nm固定波长紫外检测器固定波长紫外检测器2、195800nm可变波长紫外检测器可变波长紫外检测器紫外检测器在前处理仪器中的作用：紫外检测器在前处理仪器中的作用：1、验证柱效的一个辅助手段、验证柱效的一个辅助手段2、针对某些对紫外有

7、响应的样品进行方法研发时的辅助作用、针对某些对紫外有响应的样品进行方法研发时的辅助作用电源开关：主机电源，浓缩系统电源，开关机时间间电源开关：主机电源，浓缩系统电源，开关机时间间隔隔1 1分钟以上。分钟以上。 进样针：进样针：GPCGPC进样针，进样针，SPESPE进样针。进样针。GPCGPC柱子：柱子： 柱子规格，装填填料的克数，装填高度，柱子规格，装填填料的克数，装填高度，柱子带有金属保护外壳可重复使用。柱子带有金属保护外壳可重复使用。注射器，多通阀：抽取清洗溶剂。注射器，多通阀：抽取清洗溶剂。 样品盘：规格，用于何种模式。样品盘：规格，用于何种模式。浓缩系统：浓缩腔采用水浴和加热片加热模

8、式；可以浓缩系统：浓缩腔采用水浴和加热片加热模式；可以使用减压蒸馏和氮吹模式进行浓缩；清洗采用喷雾式，使用减压蒸馏和氮吹模式进行浓缩；清洗采用喷雾式，使用很少的溶剂就可以清洗干净；激光定容，定容体使用很少的溶剂就可以清洗干净；激光定容，定容体积从积从0.5-5ml0.5-5ml。冷凝系统：冷凝塔将浓缩后的气态溶剂冷凝到液态，冷凝系统：冷凝塔将浓缩后的气态溶剂冷凝到液态，以保证对实验环境的保护。以保证对实验环境的保护。低温水槽：低温水槽： 提供冷凝塔的冷凝水，冷凝水温度提供冷凝塔的冷凝水，冷凝水温度2-6C。先打开低温水槽制冷，在打开电源，再电源打开至少先打开低温水槽制冷，在打开电源，再电源打开

9、至少1min1min后才可以打开工作站。后才可以打开工作站。 在进样针移动的过程中，不要碰到针，以免造成运行在进样针移动的过程中，不要碰到针，以免造成运行样品的终止。样品的终止。确认样品架的位置刻度和工作站的样品架位置一致。确认样品架的位置刻度和工作站的样品架位置一致。运行样品前，确认溶剂瓶内的溶剂是否足够，废液瓶运行样品前，确认溶剂瓶内的溶剂是否足够，废液瓶内的空间是否足够。内的空间是否足够。 仪器的维护：至少仪器的维护：至少2周冲一次柱子。具体操作，开机周冲一次柱子。具体操作，开机自检完成后，直接点击自检完成后，直接点击“start pump”，运行，运行15-30min后，点击后，点击“

10、stop pump”，退出工作站，关，退出工作站，关闭电源。闭电源。上样样品的要求：样品体系必须和柱子的体系一致；上样样品的要求：样品体系必须和柱子的体系一致；脱水；去除可见杂质；油脂的上样量控制在脱水；去除可见杂质；油脂的上样量控制在1g1g以下以下（标准柱）。（标准柱）。常见故障的判断和处理：常见故障的判断和处理： 1. 1.低压报警：由于泵头里有空气造成溶剂抽不上。低压报警：由于泵头里有空气造成溶剂抽不上。 解决方案：打开液相泵的密封塞，在工作站上解决方案：打开液相泵的密封塞，在工作站上将流速调制将流速调制20ml/min20ml/min，运行，运行“start pump”“start

11、pump”，待有连，待有连续溶剂流出，续溶剂流出，”stop”stop”并关闭密封塞，将并关闭密封塞，将流速流速调回至调回至5ml/min5ml/min。再次冲柱子，压力上升至正常值，问题解决。再次冲柱子，压力上升至正常值，问题解决。 2. 2.高压报警：由于管路里有堵塞。高压报警：由于管路里有堵塞。 解决方案：将柱子倒过来用，反冲，如果压力解决方案：将柱子倒过来用，反冲，如果压力下降，可以继续使用；如果压力仍然偏高，建议更换下降，可以继续使用；如果压力仍然偏高，建议更换柱内过滤膜。同时也可将反压阀拆下来，用丙酮超声。柱内过滤膜。同时也可将反压阀拆下来，用丙酮超声。 液相泵的压力范围液相泵的压

12、力范围流速流速流动相流动相进样速度进样速度进样方式进样方式标准模式充满定量环标准模式充满定量环定量转移（小于定量定量转移（小于定量环体积）环体积）定量转移（大于定量定量转移（大于定量环体积一个小瓶）环体积一个小瓶）定量转移（大于定量定量转移（大于定量环体积多个小瓶环体积多个小瓶 分段收集时间分段收集时间紫外检测器紫外检测器废液瓶废液瓶GPC柱子柱子选择和参选择和参数编辑数编辑样品收集模样品收集模式选择式选择建立新方法建立新方法分段收集模式分段收集模式online联机模式联机模式收集瓶的选择收集瓶的选择建立新方法建立新方法样品加样品加入浓缩入浓缩腔腔水浴温度水浴温度加热套温度加热套温度浓缩腔真空

13、度浓缩腔真空度浓缩时体积浓缩时体积样品瓶选择样品瓶选择收集瓶选择收集瓶选择样品全部转移到浓缩腔样品全部转移到浓缩腔样品部分转移到浓缩腔样品部分转移到浓缩腔SPE或或GPC在线联机在线联机浓缩浓缩参数参数设定设定浓缩真空浓缩真空度设定度设定停止浓缩时体积停止浓缩时体积清洗溶剂体积清洗溶剂体积清洗溶剂选择清洗溶剂选择清洗次数清洗次数最大浓缩时间最大浓缩时间浓缩浓缩定容定容参数参数样品瓶型号选择样品瓶型号选择样品瓶分瓶设定样品瓶分瓶设定每瓶分样每瓶分样体积体积收集瓶设收集瓶设定定定容溶剂选择定容溶剂选择清洗溶剂选择清洗溶剂选择清洗溶剂体积设定清洗溶剂体积设定清洗次数设定清洗次数设定定容体积设定定容体

14、积设定浓缩浓缩清洗清洗参数参数设定设定清洗清洗溶剂溶剂选择选择清洗清洗溶剂溶剂选择选择第一次清洗体积第一次清洗体积清洗次数清洗次数第二次清洗体积第二次清洗体积清洗次数清洗次数方法名称方法名称建立新方法建立新方法调用的方法名调用的方法名称称调用的方法调用的方法的及参数的及参数样品瓶规格及样品瓶规格及数量数量收集瓶规格及数量收集瓶规格及数量清洗体积清洗体积重复次数重复次数吸取注入的吸取注入的等待时间等待时间该步后的该步后的等待时间等待时间该步骤溶剂的该步骤溶剂的流出位置流出位置该步该步骤运骤运行时行时间间吸溶剂速度吸溶剂速度使用溶剂使用溶剂注入溶剂速注入溶剂速度度抽气体体积抽气体体积重复次数重复次

15、数该步骤结该步骤结束后的等束后的等待时间待时间该步该步骤运骤运行时行时间间吸取注入吸取注入空气速度空气速度吸取注入吸取注入等待时间等待时间样品瓶类型样品瓶类型取样体积取样体积样品上柱样品上柱速度速度吸取样品吸取样品速度速度取样方式取样方式样品收集位样品收集位置置该步骤结该步骤结束后等待束后等待时间时间取样注入取样注入间隔时间间隔时间清洗体积清洗体积重复次数重复次数注入速度注入速度该步骤结该步骤结束后的等束后的等待时间待时间该步骤溶剂的该步骤溶剂的流出位置流出位置该步该步骤运骤运行时行时间间吸取溶剂吸取溶剂速度速度使用溶剂使用溶剂吸取注入间吸取注入间隔时间隔时间收集收集瓶类瓶类型及型及数量数量吹

16、干方式吹干方式空气吹干空气吹干空气体积空气体积该步骤溶剂的该步骤溶剂的流出位置流出位置该步该步骤运骤运行时行时间间注入空气流注入空气流速速洗脱体积洗脱体积重复次数重复次数注入速度注入速度该步骤结该步骤结束后的等束后的等待时间待时间该步骤溶剂的该步骤溶剂的流出位置流出位置该步该步骤运骤运行时行时间间吸取溶剂吸取溶剂速度速度使用溶剂使用溶剂吸取注入间吸取注入间隔时间隔时间收集收集瓶类瓶类型及型及数量数量样品盘类型，必须样品盘类型，必须和实际放置的盘类和实际放置的盘类型一致，刻度一致型一致，刻度一致选择方法选择方法选择样品选择样品盘类型盘类型样品名称样品名称运行模式运行模式方法名称方法名称标准柱标准

17、柱GPC10010（500*25mm），称），称取取50g填料（填料（Bio-Beads SX3），加入），加入200ml环己烷乙酸乙酯溶剂（体积比环己烷乙酸乙酯溶剂（体积比1：1的混合溶剂）或二氯甲烷的混合溶剂）或二氯甲烷迷你柱迷你柱GPC20010(500*10mm)，10g填料，填料，100ml混合溶液混合溶液高效快速柱高效快速柱GPC40010(500*10mm)，25g填料，填料，150ml混合溶液；混合溶液；EPA标准柱子标准柱子GPC50010(500*10mm)，70g填料，填料，300ml混合溶液；混合溶液； 填料的称取填料的称取称取相应重量填料称取相应重量填料加入适量环己烷、乙加入适量环己烷、乙酸乙酯混合溶剂（体酸乙酯混合溶剂（体积比积比1：1）或二氯甲）或二氯甲烷烷搅匀，用一次性橡胶搅匀，用一次性橡胶手套封口，放于避光手套封口，放于避光处浸泡处浸泡12h以上再装以上再装填填。1.装柱之前，将空柱长装柱之前，将空柱长 塞向上的固定在铁塞向上的固定在铁架架 台上，拔去长塞。台上，拔去长塞。短短 塞处连接一小段管塞处连接一小段管子。子。2.将浸泡好的填料搅匀将浸泡好的填料搅匀 后，从上端倒入柱后，从上端倒入柱内内 3. 待填料都倒入后，等待待填料都倒入后，等待柱内的溶剂尽