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文档简介

1、会计学1 PCR原理及其操作原理及其操作PPT课件课件 第1页/共39页 , DNA聚合酶使聚合酶使引物沿着单引物沿着单 链模板延伸为双链链模板延伸为双链DNA。 第2页/共39页 第3页/共39页 第4页/共39页 (7072,3060s) 第5页/共39页 12345 22 55 72 94 时间(min) 温度 () 低温退火 2 高温变性 1 适温延伸 3 重复13步 2530轮 目的DNA片段 扩增100万倍以上 DNA双螺旋 DNA变性 形成2条单 链 DNA单链 与引物复性 子链延伸 DNA加倍 第6页/共39页 第7页/共39页 第8页/共39页 第9页/共39页 第10页/共

2、39页 第11页/共39页 第12页/共39页 第13页/共39页 第14页/共39页 第15页/共39页 第16页/共39页 第17页/共39页 第18页/共39页 第19页/共39页 第20页/共39页 第21页/共39页 扩增倍数一般可达扩增倍数一般可达106107。 u以上以上“变性、退火、延伸变性、退火、延伸” 三部曲为三部曲为PCR一轮循环。一轮循环。 第22页/共39页 第23页/共39页 第24页/共39页 第25页/共39页 第26页/共39页 第27页/共39页 第28页/共39页 第29页/共39页 第30页/共39页 聚合酶的活性,使反应产聚合酶的活性,使反应产 物减少。物减少。 第31页/共39页 第32页/共39页 第33页/共39页 第34页/共39页 第35页/共39页 引物的复性温度 通过以下公式帮助选择合

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