实验室生物安全和职业暴露简介

1、实验室生物安全简介周刚主要内容n一、实验室生物安全概论n二、实验室生物安全法律法规和标准n三、实验室生物安全管理n四、艾滋病职业暴露预防和处理一、实验室生物安全概论与致病微生物打交道就存在安全问题n1976年英国某医学实验室的工作人员体检时发现结核菌感染者比其他人员高5倍n1978年英国报告一个商业洗衣房因清洗来自一Q热实验室的内衣裤及外衣时发生6例雇员和1例参观者感染Q热n1974年丹麦某医院临床生化检验室的工作人员肝炎发病率比普通人群高出 7倍n1992年美国报告因工作感染爱滋病的人员13例，其中有1例是实验室工作者，12例是临床医生或护士n1993年国内某医院报告225名医院工作人员HB

2、V检测结果，医生护士、食堂工作人员、检验人员、其中检验人员感染率最高，阳性率为81.2%。多为主观估计错误及操作失误引发什么是实验室生物安全什么是实验室生物安全n是指当实验室工作人员所处理的实验对是指当实验室工作人员所处理的实验对象含有象含有致病的微生物及其毒素致病的微生物及其毒素时，通过时，通过在实验室设计建造、使用个体防护装置、在实验室设计建造、使用个体防护装置、严格遵从标准化的工作及操作程序和规严格遵从标准化的工作及操作程序和规程等方面采取程等方面采取综合措施综合措施，确保，确保实验室工实验室工作人员作人员不受实验对象侵染，确保不受实验对象侵染，确保周围环周围环境境不受其污染。不受其污染

3、。实验室生物安全防护目的n保护操作者n保护环境n保护被操作对象生物安全实验室n生物安全实验室 biosafety laboratory ：通过防护屏障和配套管理措施配套管理措施，达到生物安全要求的生物实验室和动物实验室 。包括主实验室及其辅助用房。 防护屏障是通过规范的实验室设计、建造，实验室设备、个人防护装备等实现的。管理措施是建立实验室生物安全体系，严格遵从标准化的操作程序和管理制度等 实验室生物安全的重点任务是实验室感染的控制，对周围环境影响的控制以及对感染性材料的管理控制。生物安全实验室的构成n硬件： 一级防护屏障 二级防护屏障n软件： 管理机构 规章制度 标准操作程序 良好的行为习惯

4、生物安全实验室一级防护屏障一级防护屏障 primary barrier 是通过个人防护装备、生物安全柜、负压罩等实现的操作者和被操作对象之间的隔离。n一级防护包括两方面内容：一级防护包括两方面内容：n（1）生物安全柜）生物安全柜 (biological safety cabinet, BSC)和类似的设备等和类似的设备等n（2）个人防护装备）个人防护装备 (personal生物安全柜生物安全柜 biosafety cabinet 防止操作过程中含有危害性或未知生物防止操作过程中含有危害性或未知生物气溶胶散逸的空气净化安全装置。气溶胶散逸的空气净化安全装置。核心是：高效滤器（核心是：高效滤器（H

5、EPA)和风机和风机 生物安全柜的作用n主要的保护屏障，防止生物有害气溶胶主要的保护屏障，防止生物有害气溶胶逃逸逃逸. .n保护操作人员保护操作人员- -负压负压n保护周边环境保护周边环境-HEPA -HEPA n可以保护样品可以保护样品- -层流层流生物安全柜分级生物安全柜分级nI级生物安全柜 -保护工作人员和环境nII级生物安全柜 -保护工作人员、环境和试样（产品）nIII级生物安全柜 -采用手套箱更严格地保护工作人员、环境和试样（产品）Class II Class II 生物安全柜的分类生物安全柜的分类n A型型生物安全柜生物安全柜II级级n1. A1型型生物安全柜生物安全柜n 70%柜

6、内循环，30%空气排出，工作窗口流速为0.38m/sn2.A2型型生物安全柜生物安全柜n 70%柜内循环，30%空气排至室外，工作窗口流速为0.51m/snB B型型生物安全柜生物安全柜3.3.IIII级级B1B1型型生物安全柜生物安全柜 30%柜内循环，70%空气排出,工作窗口流速为0.51m/s4.4.IIII级级B2B2型型生物安全柜生物安全柜 100%空气排出,工作窗口流速为0.51m/s安全柜的选择安全柜的选择nA类:用于不涉及有害化学品的日常的微生物实验nB类:适用于操作放射性核素和挥发性化学品n选选A类类还是还是B类类生物安全柜的生物安全柜的关键关键：不是不是生物因素，而是操作人

7、员是否会用到挥生物因素，而是操作人员是否会用到挥发性的有害物质或放射性物质发性的有害物质或放射性物质II级生物安全柜内的准备工作 n在开始工作之前，准备一张特别的活动所需的材料检查清单，在生物安全柜内的放置必要的材料。因为安全柜的气幕防护屏障是很脆弱的，做好充分的准备是为了在正式工作时减少手臂穿越气幕的运动次数。n操作者手臂横向快速地进出安全柜会干扰气幕，并损害安全柜所提供的局部防护屏障。手臂垂直于安全柜的操作口，进出时缓慢的移动，将减少这种危险。n房间其他人员的活动（例如，迅速运动，开、关房间门等）也同样可以干扰安全柜的空气保护屏障。n在开始工作之前，操作者应该调整凳子高度，使自己的脸在前操

8、作口之上。n在手臂放进安全柜内大约一分钟之后，才能进行实验操作。这样可以使安全柜稳定，并且能让气流“清扫”掉手和臂表面的微生物污染物。n当操作者的胳膊横放在前面的格栅上的时候，房间空气可能直接流动到安全柜的工作区域，而不是通过前面的格栅进风。轻微地提高胳膊会缓和这个问题。n前面的格栅绝对不能让研究记录、废弃的塑料包装和吸液装置等阻挡。n所有的操作应该在距离前面的格栅4英寸里面的工作面上进行。 工作前的净化n在开始工作之前要让安全柜的风机至少运行3-5分钟使安全柜内的空气进行净化。n安全柜的工作台面、内壁（不包括送风滤器扩散板）和观察窗的内表面用消毒剂擦拭。n再用无菌蒸馏水进行擦拭以清除残余的消

9、毒剂。 n放到安全柜的容器和材料的表面应该以70%的乙醇擦拭，以减少将环境的杂菌带到安全柜内。n定期的对孵箱和冰箱进行消毒生物安全柜内部材料的放置n在安全柜的工作台面上可以放一块塑料衬底的能吸水的毛巾。n所有的材料应该放在离安全柜前面的格栅和后面工作台面的边缘尽可能远的位置。n容易产生气溶胶的设备（例如，旋转搅拌器，台式离心机）应该靠近安全柜的后部放置。n操作时的动作应该从工作台面的清洁区到污染区。安全柜内材料的放置洁净培养物（左边）可以进行接种（中心）；用过的污染吸管放在浅的平底盘里，而其它污染的材料可以放在生物危害包（右边）中。这安排对于习惯于左手操作的人要颠倒过来。 洁净污染II级生物安

10、全柜内的操作 n在生物安全柜内所进行的许多普通过程可能产生喷溅或气溶胶。应该始终采用良好的微生物学技术，减少喷溅和气溶胶产生。nII级生物安全柜的设计可以使水平方向喷出的孢子在14英寸的传播距离以内被安全柜向下流动的气流所俘获。 因此，保持干净的材料离开产生气溶胶的活动至少1英尺以外将会减少交叉污染的可能性。个人防护装备 (Personal Protective Equipment, PPE) 定义：定义： 是指用于防止工作人员受到物理、化学和生物等是指用于防止工作人员受到物理、化学和生物等 有害因子伤害的器材和用品。有害因子伤害的器材和用品。 用途：用途： 在生物安全实验室中，这些器材和用品

11、主要是保在生物安全实验室中，这些器材和用品主要是保 护实验人员免于暴露于生物危害物质（气溶胶、护实验人员免于暴露于生物危害物质（气溶胶、 喷濺物以及意外接种等）危险的一种物理屏障。喷濺物以及意外接种等）危险的一种物理屏障。 个人防护装备防护部位防护部位 ： 1 1、眼睛、眼睛、 2 2、头面部、头面部、 3 3、呼吸道、呼吸道 4 4、躯体、躯体、 5 5、手、足、手、足 6 6、耳（听力）、耳（听力） 个人防护装备装备包括：装备包括： 1 1、眼镜安全镜、护目镜、紧急洗眼装置）、眼镜安全镜、护目镜、紧急洗眼装置） 2 2、口罩、面罩、防毒面具、口罩、面罩、防毒面具 3 3、帽子、帽子 4 4

12、、防护衣、防护衣( (实验服、隔离衣、连体衣、实验服、隔离衣、连体衣、围裙围裙) ) 5 5、手套、手套 6 6、鞋套等。、鞋套等。、听力保护器、听力保护器 n二级防护屏障 secondary barrier ：是生物安全实验室和外部环境的隔离，也称二级隔离 生物安全实验室二级防护屏障n实验室的设施结构n通风空调系统 n给水排水n电气和控制系统n二级隔离的防护能力取决于实验室分区和定向气流 n一般按照实验因子污染的概率把实验室分为洁净、半污染和污染三个区 实验室分区的概念n清洁区：是指在正常情况下不可能有实验因子清洁区：是指在正常情况下不可能有实验因子的污染的区域。的污染的区域。n半污染区：是

13、指在正常情况下只有轻微污染可半污染区：是指在正常情况下只有轻微污染可能的区域。此区的功能是大量的准备工作能的区域。此区的功能是大量的准备工作, 例例如培养基、细胞、制剂的配制、低温冰箱的放如培养基、细胞、制剂的配制、低温冰箱的放置等。在此工作的人员要做好个人防护置等。在此工作的人员要做好个人防护, 如穿如穿上一层防护服、戴口罩和手套等。上一层防护服、戴口罩和手套等。n污染区：是指操作实验因子的地方污染区：是指操作实验因子的地方 (BSL-3中中心实验室心实验室), 在操作过程中一定会有污染的区域在操作过程中一定会有污染的区域, 有潜在严重污染的可能。有潜在严重污染的可能。微生物危害等级分类n中

14、国医学微生物菌种保藏管理办法（1985年，卫生部批准实施）n实验室生物安全通用要求n病原微生物实验室生物安全管理条例 n与国外危害等级排序相反微生物危害等级(GB 19489GB 19489)nGB 19489-2004GB 19489-2004实验室实验室 生物安全通用要求生物安全通用要求 （20042004年年1010月月1 1日实施）日实施）n分级依据n微生物的致病性；传播方式和宿主范围；具有的有效预防措施；具有的有效治疗措施n分级n危害等级危害等级I （低个体危害，低群体危害）n危害等级危害等级 (中等个体危害，有限群体危害)n危害等级危害等级 III （高个体危害，低群体危害）n危害

15、等级危害等级 (高个体危害，高群体危害)微生物危害程度分级n危险等级危险等级I （低个体危害，低群体危害） ：不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子 。n危险等级危险等级 (中等个体危害，有限群体危害) ：能引起人或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限 。微生物危害程度分级n危险等级危险等级 III （高个体危害，低群体危害）：能引起人类或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播，或能使用抗生素、抗寄生虫药治疗的病原体。 n危险等级危

16、险等级 (高个体危害，高群体危害)：能引起人类或动物非常严重的疾病，一般不能治愈，容易直接或间接或因偶然接触在人与人，或动物与人，或人与动物，或动物与动物间传播的病原体。微生物危害等级(国务院条例国务院条例)n病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例 n分级依据n病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度n将病原微生物分为四类n一类是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物n二类是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物 微生物危害等级(国务院条例国务院条例)n三

17、类是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物n四类是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物n第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物 n各种病原微生物的危害等级分类参见卫生部病原微生物名录 生物安全分级n根据所操作的生物因子的危害程度根据所操作的生物因子的危害程度和采取的防护措施，将生物安全防和采取的防护措施，将生物安全防护水平护水平(biosafety(biosafety level level，BSL)BSL)分分为为4 4级，级，级防护水平最低，级防护水平最低，

18、级防级防护水平最高。护水平最高。以以BSL-1BSL-1、BSL-2BSL-2、BSL-3BSL-3、BSL-4BSL-4表示实验室的相应生表示实验室的相应生物安全防护水平。物安全防护水平。 生物安全实验室的分级生物安全实验室的分级实验室实验室分级分级处理对象处理对象危险等危险等级级BSL-1对人体和环境危害较低，不会引发健康成人疾病 级四类BSL-2对人体和环境有中等危害或具有潜在危险的致病因子级三类BSL-3主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致命疾病的致病因子。通常有预防治疗措施 级二类BSL-4对人体有高度危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明的微生物。尚无预防治疗措施 级一类BS

19、L-1实验室n实验室的门应有可视窗并可锁闭，门锁实验室的门应有可视窗并可锁闭，门锁及门的开启方向应不妨碍室内人员逃生。及门的开启方向应不妨碍室内人员逃生。n应设洗手池，宜设置在靠近实验室的出应设洗手池，宜设置在靠近实验室的出口处。口处。n在实验室门口处应设置挂衣装置，可将在实验室门口处应设置挂衣装置，可将个人服装与实验室工作服分开放置。个人服装与实验室工作服分开放置。n实验室的墙壁、天花板和地面易清洁、实验室的墙壁、天花板和地面易清洁、不渗水、耐化学品和消毒剂的腐蚀。地不渗水、耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面应防滑，不得铺设地毯。面应防滑，不得铺设地毯。BSL-1实验室n实验室台柜和座椅应稳固，边

20、角应圆滑。实验室台柜和座椅应稳固，边角应圆滑。n实验室台柜等和摆放应便于清洁，实验室台面实验室台柜等和摆放应便于清洁，实验室台面应防水，耐腐蚀、耐热和坚固。应防水，耐腐蚀、耐热和坚固。n实验室应有足够的空间和台柜等摆放实验室设实验室应有足够的空间和台柜等摆放实验室设备和物品。备和物品。n应根据工作性质和流程合理摆放实验室设备、应根据工作性质和流程合理摆放实验室设备、台柜、物品等，避免相互干扰、交叉污染，并台柜、物品等，避免相互干扰、交叉污染，并不妨碍逃生和急救。不妨碍逃生和急救。n实验室可以利用自然通风。如果利用机械通风，实验室可以利用自然通风。如果利用机械通风，应避免交叉污染。应避免交叉污染

21、。BSL-1实验室n如果有可开启的窗户，应安装可防蚊虫如果有可开启的窗户，应安装可防蚊虫的纱窗。的纱窗。n实验室内应避免不必要的反光和强光。实验室内应避免不必要的反光和强光。n若操作刺激或腐蚀性物质，应在若操作刺激或腐蚀性物质，应在30内设内设洗眼装置，必要时应设紧急喷淋装置。洗眼装置，必要时应设紧急喷淋装置。n若操作有毒、刺激、放射性挥发物质，若操作有毒、刺激、放射性挥发物质，应在风险评估的基础上，配备适当的负应在风险评估的基础上，配备适当的负压排风柜。压排风柜。BSL-1实验室n若使用高毒性、放射性物质，应配备相若使用高毒性、放射性物质，应配备相应的安全设施、设备和个体防护装备，应的安全设

22、施、设备和个体防护装备，应符合国家、地方的相关规定和要求。应符合国家、地方的相关规定和要求。n若使用高压气体和可燃气体，应有安全若使用高压气体和可燃气体，应有安全措施，应符合国家、地方的相关规定和措施，应符合国家、地方的相关规定和要求。要求。n应设应急照明装置。应设应急照明装置。n应有足够的电力供应。应有足够的电力供应。BSL-1实验室n应有足够的固定电源插座，避免多台设备使用应有足够的固定电源插座，避免多台设备使用共同的电源插座。应有可靠的接地系统，应在共同的电源插座。应有可靠的接地系统，应在关键接点安装漏电保护装置或监测报警装置。关键接点安装漏电保护装置或监测报警装置。n供水和排水管道系统

23、应不漏水，下水应设防回供水和排水管道系统应不漏水，下水应设防回流设计。流设计。n应配备适用的应急器材，如消防器材、意外事应配备适用的应急器材，如消防器材、意外事故处理器材、急救器材等。故处理器材、急救器材等。n应配备使用的通讯设备。应配备使用的通讯设备。n必要时应配备适当的消毒灭菌设备。必要时应配备适当的消毒灭菌设备。BSL-2实验室nBSL-2实验室除满足实验室除满足BSL1实验室的要求外；实验室的要求外；应具备以下要求：应具备以下要求：n实验室主入口的门、放置生物安全柜实验间的门实验室主入口的门、放置生物安全柜实验间的门应可自动关闭；实验室主入口的门应有进入控制应可自动关闭；实验室主入口的

24、门应有进入控制措施。措施。n实验室工作区域外应有存放备用物品的条件。实验室工作区域外应有存放备用物品的条件。n应在实验室工作区配备洗眼装置。应在实验室工作区配备洗眼装置。n应在实验室或其所在的建筑物内配备高压蒸汽灭应在实验室或其所在的建筑物内配备高压蒸汽灭菌器或其它适当的消毒设备，所配备的消毒设备菌器或其它适当的消毒设备，所配备的消毒设备应以风险评估为依据。应以风险评估为依据。BSL-2实验室n应在操作病原微生物的实验间内配备生物安全应在操作病原微生物的实验间内配备生物安全柜。柜。n应按产品设计要求安装和使用生物安全柜。如应按产品设计要求安装和使用生物安全柜。如果生物安全柜的排风在室内循环，室

25、内应具备果生物安全柜的排风在室内循环，室内应具备通风换气的条件；如果使用需要管道排风的生通风换气的条件；如果使用需要管道排风的生物安全柜，应通过独立于建筑物其他公共通风物安全柜，应通过独立于建筑物其他公共通风系统的管道排出。系统的管道排出。n应有可靠的电力供应。必要时，重要设备（如：应有可靠的电力供应。必要时，重要设备（如：培养箱、生物安全柜、冰箱等）应配置备用电培养箱、生物安全柜、冰箱等）应配置备用电源。源。污 染 区半 污 染 区血 清 库清 洁 区污染区样品受理区或采血区清洁区缓冲区标准标准【艾滋病筛查实验室】平面图BSL-2入口标识生物安全实验室建设的基本原生物安全实验室建设的基本原则

26、则n一、科学合理的原则一、科学合理的原则n二、安全首位的原则二、安全首位的原则n安全是修造实验室的直接目的，建造中安全是修造实验室的直接目的，建造中一切不利安全的设计都应取缔一切不利安全的设计都应取缔, 一切与生一切与生物安全有冲突的参数设计都应服从安全物安全有冲突的参数设计都应服从安全的要求。例如的要求。例如: 净化要求要服从安全，使净化要求要服从安全，使用方便服从安全，节约服从安全，人性用方便服从安全，节约服从安全，人性化服从安全。化服从安全。三、软件在先的原则三、软件在先的原则n修造实验室前做好对拟从事的病原微生修造实验室前做好对拟从事的病原微生物和研究内容的危险评估物和研究内容的危险评

27、估, 一定要有科一定要有科学、合理的总体的设计和概念设计。在学、合理的总体的设计和概念设计。在此基础上要根据操作过程的梗概进行平此基础上要根据操作过程的梗概进行平面布局工艺设计面布局工艺设计, 然后再进行空调通风然后再进行空调通风和电控等的具体设计。和电控等的具体设计。四、管理严格的原则四、管理严格的原则n一定要按照国务院发布的一定要按照国务院发布的病原微生物病原微生物实验室生物安全管理条例实验室生物安全管理条例进行管理。进行管理。这个条例对致病微生物的管理原则是：这个条例对致病微生物的管理原则是：n病原微生物是分类管理。病原微生物是分类管理。 n实验室是分级管理。实验室是分级管理。n高致病微

28、生物实验室实验活动审批制度。高致病微生物实验室实验活动审批制度。n领导、单位、专家三结合领导、单位、专家三结合 五、远离病原的原则五、远离病原的原则n修建实验室是为了研究致病微生物和高修建实验室是为了研究致病微生物和高致病微生物致病微生物, 必要的实验必须在实验室必要的实验必须在实验室内进行。但是内进行。但是, 非必要的时候尽可能少非必要的时候尽可能少接触病原体或少进实验室。接触病原体或少进实验室。n例如，能在半污染区做的不进污染区；例如，能在半污染区做的不进污染区；能在清洁区做的不进半污染区能在清洁区做的不进半污染区; 进实验进实验室室2 人能完成不用人能完成不用3人人; 无关人员不进实无关

29、人员不进实验室。验室。六、预防为主的原则六、预防为主的原则n从事病原微生物实验活动从事病原微生物实验活动, 对实验室感染应采对实验室感染应采取预防为主的原则，要把握三个环节取预防为主的原则，要把握三个环节, 即即:n1实验室要经过对安全柜、排风过滤器和高实验室要经过对安全柜、排风过滤器和高压蒸汽灭菌器的生物和物理的检测压蒸汽灭菌器的生物和物理的检测, 确保达到确保达到零泄漏。零泄漏。n2. 通过对实验过程的安全监测通过对实验过程的安全监测, 发现问题要及发现问题要及时采取预防和改进措施。时采取预防和改进措施。n3. 发现有实验室感染的征兆，要及时采取隔发现有实验室感染的征兆，要及时采取隔离治疗

30、措施离治疗措施, 以防止出现二代病例。以防止出现二代病例。七、使用方便的原则七、使用方便的原则n实验室建造在保证安全的前提下，应考实验室建造在保证安全的前提下，应考虑工作过程中活动合理方便的问题。所虑工作过程中活动合理方便的问题。所以在制定方案时应该征求使用人的意见。以在制定方案时应该征求使用人的意见。二、实验室生物安全法律法规和标准我国病原微生物实验室生物安全我国病原微生物实验室生物安全相关法规和标准相关法规和标准n中国的生物安全相关标中国的生物安全相关标准准lGB19489实验室实验室生物安全通用要求生物安全通用要求，2008年年12月月26日，日，第二版，第二版，2009年年7月月1日施

31、行。日施行。l国家卫生部的国家卫生部的微生微生物和生物医学实验室物和生物医学实验室生物安全通用准生物安全通用准则则，2003年年8月月1日，日，第一版第一版n国家的法律法规国家的法律法规l中华人民共和国传染病防治法中华人民共和国传染病防治法（20042004年年8 8月月2828日日 修订版）修订版）n第二十二条、第二十六条、第六章第二十二条、第二十六条、第六章 监监督管理督管理n国务院国务院424号令号令l病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例（2004年年11月月5日）日）n医疗废物管理条例医疗废物管理条例（2003年6月4日国务院第十次常务会议通过，二三年六月十

32、六日公布实行） n生物安全实验室建设技术规范生物安全实验室建设技术规范（GB 503462011） n人间传染的病原微生物名录人间传染的病原微生物名录原国家卫生部原国家卫生部2006年年1月月11日颁布并实施日颁布并实施n可感染人类的致病性病原微生物菌（毒）种可感染人类的致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定或样本运输管理规定原卫生部第原卫生部第45号令号令中华人民共和国传染病防治中华人民共和国传染病防治法法n在第二十二条中，对与病原微生物有关的疾病预防控制机构、医疗机构的实验室和从事病原微生物实验的单位的生物安全管理作了规定，要求这些单位应有符合国家规定的条件和技术标准，建立严格的监督

33、管理制度，对传染病病原体样本按照规定的措施实行严格监督管理，严防传染病病原体的实验室感染和病原微生物的扩散。 中华人民共和国传染病防治中华人民共和国传染病防治法法n在第二十六条中规定了对病原微生物菌（毒）种的管理，要求国家建立传染病菌种、毒种库。对传染病菌种、毒种和传染病检测样本的采集、保藏、携带、运输和使用实行分类管理，建立健全严格的管理制度。对可能导致甲类传染病传播的以及国务院卫生行政部门规定的菌种、毒种和传染病检测样本，确需采集、保藏、携带、运输和使用的，须经省级以上人民政府卫生行政部门批准。具体办法由国务院制定。 中华人民共和国传染病防治中华人民共和国传染病防治法法n在第五十三条中对与

34、生物安全有关卫生监督作了明确规定，包括监督管理者的职责和管理范围。其中，县级以上人民政府卫生行政部门对传染病防治工作监督检查，检查监督涉及与生物安全有关的有对疾病预防控制机构和医疗机构的传染病防治工作进行监督检查，对传染病菌种、毒种和传染病检测样本的采集、保藏、携带、运输、使用进行监督检查。省级以上人民政府卫生行政部门负责组织对传染病防治重大事项的处理。中华人民共和国传染病防治中华人民共和国传染病防治法法n在第五十四条规定中明确了监督检查的权力。县级以上人民政府卫生行政部门在履行监督检查职责时，有权进入被检查单位和传染病疫情发生现场调查取证，查阅或者复制有关的资料和采集样本。被检查单位应当予以

35、配合，不得拒绝、阻挠。 病原微生物实验室生物安全病原微生物实验室生物安全管理条例管理条例第一章总则对条例的编制目的、适用对象、实验室和病原微生物的定义、管理者作规定。第二章规定了病原微生物的分类和管理的要求，对病原微生物的危害程度进行了分类，对病原微生物的采集、运输、包装、保藏等管理作了明确的规定。 其中对病原微生物的危害程度的分类规定第一类为危害程度最高，第四类为危害程度最低，且把第一类和第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物，这一点与WHO、欧盟、美国、加拿大等不一致，应引起注意。 病原微生物实验室生物安全病原微生物实验室生物安全管理条例管理条例M第三章规定了实验室的设立和管理，规定了病

36、原微生物实验室的生物安全等级，规定了条 新建、改建、扩建三级、四级实验室或者生产、进口移动式三级、四级实验室应当遵守规定，规定三级、四级实验室的认可和不同生物安全等级实验室的活动范围和活动条件，规定了不同生物安全等级实验室的管理职责和权限以及责任人，规定了实验室的三废处理和生物安全专家委员会的组成等。 病原微生物实验室生物安全病原微生物实验室生物安全管理条例管理条例M第四章规定了实验室感染控制，规定了对实验室活动的管理要求，实验室工作人员的医学监督，发生实验室泄漏和感染事故时的报告、处置和控制等。M第五章对监督管理的职责、范围和权力作了规定，明确了县、省和国家各级卫生主管部门、兽医主管部门、环

37、境保护主管部门对病原微生物实验室监督、检查和处理的职责，同时也接受社会和公民的监督。 病原微生物实验室生物安全病原微生物实验室生物安全管理条例管理条例M第六章是法律责任，对违反本条例的各种病原微生物实验室生物安全管理的单位和当事人的行为应追究其责任，造成严重后果的还追究其刑事责任；对各级卫生主管部门、兽医主管部门、环境保护主管部门的监督管理不到位，应承担相应的责任，并接受相应的处理，造成严重后果的还追究其刑事责任。 病原微生物实验室生物安全管理条例n该条例的实施是n国家立法第一次，世界上也是少有的n规定国家对病原微生物按危害严重程度分类管理 n根据不同的生物安全水平要求对实验室分级管理 n明确

38、各部门职责n卫生部、农业部、质检总局病原微生物实验室生物安全管理条例n加大了对实验室负责人的责任n撤职、刑事责任n有关工作以国家标准为依据强制认可n国家认可委管理机关及其职责n1. 国务院卫生主管部门国务院卫生主管部门 主管与人体健康有关的实验室及其实验活动的生物安全监督工作，n2. 国务院兽医主管部门国务院兽医主管部门 主管与动物有关的实验室及其实验活动的生物安全监督工作，n3. 国务院其他有关部门国务院其他有关部门 在各自职责范围内负责实验室及其实验室活动的生物安全管理工作，n4. 县级以上地方人民政府县级以上地方人民政府 及其有关部门在各自职责范围内负责实验室及其实验室活动的生物安全管理

39、工作，n5. 实验室的设立单位实验室的设立单位 及其主管部门负责实验室日常活动的管理，承担建立健全管理制度，检查、维护检查、维护医疗废物管理条例医疗废物管理条例n第一章总则中明确表述了医疗废物的定义，医疗废物是指医疗卫生机构在医疗、预防、保健以及其他相关活动中产生的具有直接或者间接感染性、毒性以及其他危害性的废物。另外，明确了各级人民政府卫生行政主管部门和环境保护行政主管部门在医疗废物过程中的职责。 实验室实验室 生物安全通用要求生物安全通用要求实验室实验室 生物安全通用要求生物安全通用要求 GB19489-2004 LaboratoriesGeneral requirements for b

40、iosafety （2004.4.5 国家质量监督检验检疫总局、国家标准化管理委员会国家质量监督检验检疫总局、国家标准化管理委员会发布发布， 2004.10.1实施）实施）实验室实验室 生物安全通用要求生物安全通用要求GB19489-2008（2008.12.26 国家质量监督检验检疫总局、国家标准化管理委员会国家质量监督检验检疫总局、国家标准化管理委员会发布发布， 2009.7.1实施）实施） 主要参考主要参考 病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例、实验室生物实验室生物安全手册安全手册 第三版第三版,2004,2004 强制性强制性 国家标准国家标准实验室实验室

41、生物安全通用要求生物安全通用要求u该通用准则是在参考了WHO、美国、加拿大和卫生部的行业标准的基础上，结合我国的实际情况编写而成的，内容主要包括：实验室生物安全防护屏障和水平分级、生物安全实验室的设施、生物安全动物实验室的设施、生物安全实验室的个人防护、生物安全动物实验室的个人防护、管理要求、事故处理、感染性样品的标志和运输、废物处理、生物安全柜的性能、分类、选择和使用、化学品安全、放射品安全、实验室生物安全标准操作规程等。 实验室实验室 生物安全通用要求生物安全通用要求主要内容主要内容 1.范围范围 2.术语和定义术语和定义 3.风险评估及风险控制风险评估及风险控制 4.实验室生物安全防护水

42、平分级实验室生物安全防护水平分级 5. 实验室设计原则及基本要求实验室设计原则及基本要求 6.实验室设施和设备要求实验室设施和设备要求 7.管理要求（含管理要求（含23项）项）实验室实验室 生物安全通用要求生物安全通用要求n主要变化主要变化n删除删除n部份术语和定义部份术语和定义n危害程度分级危害程度分级n2004版第版第3、12、13、14、15、17章章n增加增加n新的术语和定义新的术语和定义n设施的自动化设施的自动化n从事无脊椎动物操作实验室的要求从事无脊椎动物操作实验室的要求n管理要求管理要求n附录附录A、B、C实验室实验室 生物安全通用要求生物安全通用要求n条款的强制性：n除3.1.

43、10（风险控制）、 6.3.1.5（BSL-3实验室布局）、 6.3.10.4、 6.3.10.5（温湿度）、 6.5.1.4和 6.5.1.9 （动物实验室）外， 其余均为强制性条款均为强制性条款。生物安全实验室建筑技术规范生物安全实验室建筑技术规范n建设部2004年8月3日批准被确立为强制性国家标准，自2004年9月1日起开始实施，并于2011年进行了修订.n规定了生物安全实验室建筑平面、装修和结构的技术要求；实验室的的基本技术指标要求；对作为规范核心内容的空气调节与空气净化部分则详尽地规定了气流组织、系统构成及系统部件和材料的选择方案、构造和设计要求；还规定了生物安全实验室的给水排水、气

44、体供应、配电、自动控制和消防设施配置的原则；最后对施工、检测和验收的原则、方法做了必要的规定。 三、三、实验室生物安全管理实验室生物安全管理病原微生物实验室的内部管理病原微生物实验室的内部管理n指实验室设立单位建立的为保障实验室指实验室设立单位建立的为保障实验室生物安全的管理体系。生物安全的管理体系。n组织机构建设：成立生物安全委员会，设立组织机构建设：成立生物安全委员会，设立管理办公室，建立安全监督员队伍；管理办公室，建立安全监督员队伍；n制定管理体系文件：用于控制实验活动的各制定管理体系文件：用于控制实验活动的各个环节，保证安全的要求；个环节，保证安全的要求；n生物安全管理：监督、培训、关

45、键点的控制、生物安全管理：监督、培训、关键点的控制、个人防护、健康监护个人防护、健康监护 组织机构组织机构 n我国实验室生物安全管理实行法人负责我国实验室生物安全管理实行法人负责制及实验室主任和项目负责人责任制制及实验室主任和项目负责人责任制n设立生物安全实验室单位的最高管理者设立生物安全实验室单位的最高管理者组织成立生物安全委员会，负责实验室组织成立生物安全委员会，负责实验室生物安全的管理工作生物安全的管理工作n明确一名生物安全负责人明确一名生物安全负责人n任命实验室主任任命实验室主任n实验室设置专职或兼职安全监督员。实验室设置专职或兼职安全监督员。 最高管理者（法定代表人）最高管理者（法定

46、代表人）生物安全委员会生物安全委员会实验室主任实验室主任( (生物安全生物安全负责人负责人) )项目负责人项目负责人生生 物物 安安 全全 防防 护护 实实 验验 室室相关职能科室相关职能科室相关业务科室相关业务科室后勤保障部门后勤保障部门安全监督员安全监督员安全管理体系组织结构安全管理体系组织结构框图框图 组织机构组织机构n最高管理者：最高管理者：n为单位法定代表人，对实验室生物安为单位法定代表人，对实验室生物安全负总责全负总责n负责建立生物安全实验室管理体系负责建立生物安全实验室管理体系n组织并授权生物安全委员会负责实验组织并授权生物安全委员会负责实验室生物安全的管理工作室生物安全的管理工

47、作n批准和发布生物安全管理手册。批准和发布生物安全管理手册。 组织机构组织机构n生物安全委员会生物安全委员会 n由各方面专家组成，人员构成中应包由各方面专家组成，人员构成中应包括外单位的专家。一般设置一个办公括外单位的专家。一般设置一个办公室负责具体运作。室负责具体运作。n是实验室生物安全的决策机构是实验室生物安全的决策机构n职责一般包括：组织管理体系的建立；职责一般包括：组织管理体系的建立；组织危害评估；批准实验活动的开展；组织危害评估；批准实验活动的开展；组织安全检查等组织安全检查等组织机构组织机构 n生物安全负责人生物安全负责人 n单位法人（或授权）单位法人（或授权）n一般应由具有副高级

48、以上技术职称，熟悉实验室生一般应由具有副高级以上技术职称，熟悉实验室生物安全防护知识和有关法规、制度、规程的人员担物安全防护知识和有关法规、制度、规程的人员担任任n负责实验室的日常管理、实验技术和生物安全工作；负责实验室的日常管理、实验技术和生物安全工作；组织生物安全防护知识和有关法规、制度、规程的组织生物安全防护知识和有关法规、制度、规程的宣贯宣贯n决定进入实验室的工作人员，任命实验室负责人决定进入实验室的工作人员，任命实验室负责人（实验室主任、项目负责人、安全员等）（实验室主任、项目负责人、安全员等） 实验室负责人实验室负责人 安全责任人安全责任人组织机构组织机构n监督有关法规和操作规程的

49、执行，纠正出现的违规活监督有关法规和操作规程的执行，纠正出现的违规活动并有权停止实验动并有权停止实验n定期组织对实验室设备各项技术参数的检查和实验室定期组织对实验室设备各项技术参数的检查和实验室装备的维护保养装备的维护保养n负责实验室紧急情况及事故的处置并向生物安全委员负责实验室紧急情况及事故的处置并向生物安全委员会报告会报告组织机构组织机构 n项目负责人项目负责人（实验室专管共用）（实验室专管共用） n项目负责人是某个具体检测或研究项项目负责人是某个具体检测或研究项目的总负责人目的总负责人n负责向生物安全委员会提交所开展项负责向生物安全委员会提交所开展项目的目的“危害评估报告危害评估报告”和

50、和“操作规操作规程程”，在获准后，负责项目的实施，在获准后，负责项目的实施n在实验室实行开放共享时必须实行项在实验室实行开放共享时必须实行项目负责人制度目负责人制度组织机构组织机构 n安全监督员安全监督员 n可以专职或兼职，必须有足够的权力可以专职或兼职，必须有足够的权力监督实验室制度、操作规程的实施监督实验室制度、操作规程的实施n发现不符合规定的行为或安全隐患有发现不符合规定的行为或安全隐患有权要求有关人员进行纠正权要求有关人员进行纠正n对于发现的严重问题及时向实验室主对于发现的严重问题及时向实验室主任报告或直接向生物安全委员会报告任报告或直接向生物安全委员会报告n可以参照质量管理体系中实验

51、室质量可以参照质量管理体系中实验室质量监督员的工作模式开展工作监督员的工作模式开展工作生物安全管理体系文件生物安全管理体系文件 n是保证实验室生物安全的管理和技术满是保证实验室生物安全的管理和技术满足要求文件足要求文件n实验室生物安全管理体系文件形成后，实验室生物安全管理体系文件形成后，应通过有效文件或在正式场合宣布生效，应通过有效文件或在正式场合宣布生效，有效的宣贯并要求本单位涉及生物安全有效的宣贯并要求本单位涉及生物安全的所有部门和人员遵照执行。的所有部门和人员遵照执行。 生物安全管理体系文件生物安全管理体系文件生物安全管理手册程序文件风险评估安全手册作业指导书安全数据单安全、技术记录生物

52、安全管理体系文件生物安全管理体系文件n第一层：生物安全管理手册第一层：生物安全管理手册n第二层：程序文件第二层：程序文件n第三层：作业指导书，安全手册，危害第三层：作业指导书，安全手册，危害评估报告，方法标准评估报告，方法标准n第四层：安全数据单，第四层：安全数据单，安全安全、技术记录、技术记录 生物安全管理手册生物安全管理手册 符合符合GB 19489GB 19489和和病原微生物实验室病原微生物实验室生物生物安全管理条例安全管理条例的要求；是对生物安全管理体的要求；是对生物安全管理体系的总体描述；是指导本单位生物安全各项活系的总体描述；是指导本单位生物安全各项活动的依据。动的依据。n实验室

53、概况；规定生物安全质量方针、目标；实验室概况；规定生物安全质量方针、目标；编制生物安全管理手册的目的、编制依据、适编制生物安全管理手册的目的、编制依据、适用范围并对手册的发布、修订和更新做出规定；用范围并对手册的发布、修订和更新做出规定；遵守国家法规、标准的承诺。遵守国家法规、标准的承诺。生物安全管理手册生物安全管理手册n管理要求：包括管理体系及组织结构；管理要求：包括管理体系及组织结构；人员和部门职责；安全检查制度；预防、人员和部门职责；安全检查制度；预防、纠正、改进措施；环境控制；事故报告纠正、改进措施；环境控制；事故报告的规定等的规定等n技术要求：包括危害评估、健康监护、技术要求：包括危

54、害评估、健康监护、人员培训、安全工作行为、各种应急预人员培训、安全工作行为、各种应急预案、样本运送、废弃物处置等案、样本运送、废弃物处置等程序文件程序文件n程序文件是程序文件是手册手册的支持性文件，是的支持性文件，是为了进行或完成某项活动所规定的途径为了进行或完成某项活动所规定的途径（或方法）。（或方法）。程序文件程序文件责任、权力和相互关责任、权力和相互关系系文件控制程序文件控制程序计算机文件和数据控计算机文件和数据控制程序制程序管理评审程序管理评审程序管理体系改进程序管理体系改进程序采购服务与供给程序采购服务与供给程序内部审核程序内部审核程序预防措施程序预防措施程序纠正措施程序纠正措施程序

55、记录控制程序记录控制程序人员培训管理程序人员培训管理程序程序文件程序文件n采样控制程序采样控制程序n设施与环境条件控制程设施与环境条件控制程序序n实验室安全和内务管理实验室安全和内务管理程序程序n员工健康监护程序员工健康监护程序n危害评估程序危害评估程序n生物安全检查程序生物安全检查程序n项目生物安全审核程序项目生物安全审核程序n应急程序应急程序n实验室消毒灭菌程序实验室消毒灭菌程序n实验室实验室个人防护装备的个人防护装备的选择、使用和维护程序选择、使用和维护程序n生物安全实验室人员准生物安全实验室人员准入程序入程序n操作有害材料的安全行操作有害材料的安全行为的程序为的程序n菌（毒）种管理程序

56、菌（毒）种管理程序n样品管理程序样品管理程序n废弃物处理程序废弃物处理程序n设备管理程序设备管理程序n实验活动审批程序实验活动审批程序作业指导书作业指导书n作业指导书是具体作业的指导文件，由作业指导书是具体作业的指导文件，由具体评估执行人员使用。具体评估执行人员使用。n生物安全实验室一般包括下列几类：生物安全实验室一般包括下列几类： 危害评估报告危害评估报告 安全手册安全手册 操作规程（设备、方法）操作规程（设备、方法） 技术标准技术标准危害评估报告危害评估报告一、概论一、概论n生物因子的种类（已知的、未知的、基因修饰的或未生物因子的种类（已知的、未知的、基因修饰的或未知传染性的生物材料）、来

57、源、传染性、致病性、传知传染性的生物材料）、来源、传染性、致病性、传播途径、在环境中的稳定性、感染剂量、浓度、动物播途径、在环境中的稳定性、感染剂量、浓度、动物实验数据、预防和治疗？实验数据、预防和治疗？二、个论二、个论n具体实验活动（病原分离、培养、生化鉴定，免疫学具体实验活动（病原分离、培养、生化鉴定，免疫学实验，分子生物学实验，动物实验等）存在的风险实验，分子生物学实验，动物实验等）存在的风险n针对风险采取的防范措施（设施、设备、针对风险采取的防范措施（设施、设备、PPEPPE等）等）n意外事故处理措施意外事故处理措施三、参考资料（来源、量化）三、参考资料（来源、量化）安全手册安全手册

58、n实验室主任负责至少每年对安全手册评审和更实验室主任负责至少每年对安全手册评审和更新。新。 n实验室安全手册应在工作区随时可用。实验室安全手册应在工作区随时可用。n手册应针对实验室的需要，主要包括但不限于手册应针对实验室的需要，主要包括但不限于以下几方面：以下几方面：n生物危险生物危险 n消防、电气、化学品、辐射安全消防、电气、化学品、辐射安全n危险废物处理和处置危险废物处理和处置n紧急情况从工作区撤离和事件处理规程的详细说明紧急情况从工作区撤离和事件处理规程的详细说明记录记录 n包括安全记录和技术记录包括安全记录和技术记录n一般根据需要和使用的方便设计成表格一般根据需要和使用的方便设计成表格

59、形式形式（高致病实验室要求无人值守、自动记录）（高致病实验室要求无人值守、自动记录）n是管理体系运行满足要求的是管理体系运行满足要求的证据证据 生物安全实验室的管理生物安全实验室的管理n管理原则管理原则 科学合理科学合理 安全首位安全首位 软件在先软件在先 管理严格管理严格 远离病原远离病原 预防为主预防为主 使用方便使用方便 厉行节约厉行节约 n传染性和致病性再强的病原微生物传染性和致病性再强的病原微生物, , 只只要它不和人体接触，感染就不会发生；要它不和人体接触，感染就不会发生；n隔离、过滤、消毒灭菌和采用个人方式隔离、过滤、消毒灭菌和采用个人方式措施均是有效生物安全防护手段；措施均是有

60、效生物安全防护手段；n在实验前对设施、设备进行常规检测，在实验前对设施、设备进行常规检测，在实验过程中进行安全监测，在实验后在实验过程中进行安全监测，在实验后对人员实施健康检测、对环境进行泄漏对人员实施健康检测、对环境进行泄漏检测和消毒效果监测。检测和消毒效果监测。 生物安全实验室的管理生物安全实验室的管理n要点要点n生物危害性评估生物危害性评估 n准入管理准入管理n设施设备监测、检测和维护设施设备监测、检测和维护n健康监护健康监护n生物安全工作检查生物安全工作检查n实验室资料档案管理实验室资料档案管理n实验室人员培训实验室人员培训n菌毒种及阳性标本管理菌毒种及阳性标本管理n消毒灭菌与废弃物处