毛细管电泳和超临界流体色谱法PPT学习教案

1、会计学1 毛细管电泳和超临界流体色谱法毛细管电泳和超临界流体色谱法 第1页/共26页 第2页/共26页 第一节 毛细管电泳 HPECHPEC高效毛细管电泳高效毛细管电泳 第3页/共26页 第一节 毛细管电泳 四色荧光标记毛细管电泳四色荧光标记毛细管电泳DNADNA测序测序 第4页/共26页 第5页/共26页 名称缩写管内填充物说明 毛细管区带电泳CZE pH缓冲的自由电解质溶液， 可含有一定功能的添加剂。 属自由溶液电泳型，但可通 过加添加剂引入色谱机理。 胶束电动毛细管 色谱 MECC CZE载体带电荷的胶束CZE扩展的色谱型 微乳液电动毛细 管色谱 MEEC C 由缓冲液、不溶于水的有机

2、溶剂和乳化剂构成的微乳液。 CZE扩展的色谱型 毛细管凝胶电泳CGE 各种电泳用凝胶或其他筛分 介质。 属非自由溶液电泳，含有 “分子筛”效应。 毛细管等电聚焦CIEF 建立pH梯度的两性电解质按等电点分离，属电泳型， 要求完全抑制电渗流动。 毛细管电动色谱CEC CEZ载体液相色谱固定相属非自由溶液色谱型 非水毛细管电泳NACE 含有电解质的非水体系属自由溶液电泳型 第6页/共26页 Eu epep 4 i ep 第7页/共26页 Euuu osefosefap )( EEu os osos 第8页/共26页 p p p ap p spp k k kE u nnk 11 1 ,/ 第9页/共

3、26页 n L H)(54. 5 d 2 5 . 0 ， W t n R R d Dt u DL cEd 2 2 1500)( 2 3/1 4、分离效率与谱带展宽 柱效和塔板高度，Ld为进样口到检测器的距离。 毛细管电泳只有纵向扩散项，时电驱动的扁平流型系统 自 热： 扩散与吸附： E为电场强度，kV/m；c为介质浓度，mol/l；d为管径，mm。 D EL n D uL ， u D H dap d 2 , 2 n 2 第10页/共26页 5、分离度： 将淌度相近的组分分开的能力。与外加电压V；有效柱长 与总长度之比（Ld/L）；电泳有效淌度差（mef）；电渗 淌度（mos）有关。 2/1 1

4、2 21 22 )( 24 1 );( 4 );( 4 ; 4 )(2 osef d ef ef ef rrrr DL VL R n R u un R tt WW tt R 第11页/共26页 三、毛细管电泳仪器设备 1、高压电源 2、毛细管柱 3、进样（电动/压力/扩散） 4、检测器 四、应用 蛋白质 第12页/共26页 第13页/共26页 第14页/共26页 SFCSFCGCGCLCLC 流动相选择性流动相选择性 流动相和固定相的函数固定相的函数流动相的函数 总柱效总柱效 最高，毛细管SFC为106最低其次 分析时间分析时间 分析时间短分析时间较长分析时间短 工作温度工作温度室温至200 精确的高温室温 检测器检测器 可接各种类型只接FID,ECD,FPD, TID,PID,TCD等 不能用FID，不 能直接接入MS 第15页/共26页 c r c r cc r T T T V V Vr P P P ; V a 第16页/共26页 uCuC u B H Sm 第17页/共26页 第18页/共26页 第19页/共26页 第20页/共26页 第21页/共26页 Skk 0 lg