复方姜黄双蓟胶囊保肝功能的动物实验研究

1、 复方姜黄双蓟胶囊保肝功能的动物实验研究 摘 要：目的：研究复方姜黄双蓟胶囊对酒精导致急性肝损伤小鼠的保护功能。方法：60只小鼠被随机均分为5组，分别为空白对照组、乙醇模型组、实验低剂量组、中剂量组、高剂量组。每日经口灌胃给予受试样品，空白对照组和模型对照组给予蒸馏水。给予受试样品32天后，将乙醇模型组及各实验剂量组一次灌胃给予50%乙醇，空白对照组给蒸馏水。检测小鼠肝脏匀浆液的丙二醛（mda）、谷胱甘肽（gsh）、甘油三酯（tg）及进行肝脏病理学组织检查。结果：与空白对照组比较，模型对照组小鼠肝脏匀浆液的丙二醛（mda）、甘油三酯（tg）及肝脏病理评分显著升高（p0.01），谷胱甘肽（gsh

2、）显著降低（p0.01）,表明模型成立。与乙醇模型组比较，各实验剂量组肝匀浆液中 mda和tg水平均显著降低（p0.05，p0.01），中、高剂量组小鼠gsh显著升高（p0.05，p0.01）。结论：姜黄双蓟胶囊对酒精导致急性肝损伤小鼠具有保护作用。关键词：姜黄提取物；水飞蓟提取物；朝鲜蓟提取物；小鼠；肝损伤姜黄（curcuma）为姜黄属植物，其根茎可入药，主产于日本、美国、非洲、中国等地。联合国世界卫生组织/食品药品管理局批准姜黄为天然食品添加剂。姜黄素是姜黄中最重要的活性成分，具有护肝、抗氧化、清除自由基、抗炎症、抑菌、抗肿瘤等多重生物学作用1。研究表明，2姜黄提取物可改善ccl4诱导的小

3、鼠肝纤维化，与模型组相比，经姜黄提取物给药干预后，小鼠血清中alt、ast、tnf-、il-6均有显著差异。水飞蓟为菊科植物水飞蓟的干燥成熟果实，原产于南欧、北非，在欧洲作为治疗肝胆疾病的民间用药已有2000多年历史。水飞蓟的果实具有清热解毒、疏肝利胆之功效，用于肝胆湿热、胁痛、黄疸等症。现代药理研究表明，水飞蓟素及水飞蓟宾等单体成分具有广泛的药理活性，如抗氧化、保肝、抗炎、降血脂、抗癌以及神经保护等作用3。其发挥主要活性作用的是水飞蓟宾及水飞蓟素的复合物（包括水飞蓟宾、水飞蓟宁、水飞蓟亭等化合物）。水飞蓟素对于药物引起的急性或者慢性肝炎的保护作用已经在大鼠和小鼠等动物实验模型上得到证实。腹腔

4、或者静脉注射水飞蓟素可以对多种肝毒性物质（比如四氯化碳、乙醇、半乳糖胺、酒精等）造成的肝损伤有保护作用4。朝鲜蓟（artichoke），学名cynara scolymus l.，又称洋蓟、菜蓟、球蓟、菊蓟、法国百合，为菊科菜蓟属多年生草本植物。原产于欧洲地中海沿岸，是古老的药食两用植物朝鲜蓟内含多酚类、黄酮类、萜类、菊糖及天门冬酰胺等物质，是一种高营养的保健蔬菜，具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗微生物、降压、补肾功效。此外，常食可保护肝肾，增强肝脏排毒功能5。本实验观察以姜黄提取物、水飞蓟提取物和朝鲜蓟提取物制成的复方姜黄双蓟胶囊，对酒精导致急性肝损伤小鼠的保护作用。1材料1.1实验动物 icr

5、级小鼠（60只，体质量1822g，雄性），由浙江省中医药大学动物中心培育1.2受试物 复方姜黄双蓟胶囊实验室自主研发，规格0.35g/粒，每粒含120mg姜黄提取物、40mg水飞蓟提取物、50mg朝鲜蓟提取物及微晶纤维素等辅料若干。成人推荐服用每天3次，每次1粒。1.3 主要仪器 低温高速离心机、bio-rad 680酶标仪、7020型全自动生化分析仪等。2 方法 采用保健食品检验与评价技术规范（2003 版） 中“对化学性肝损伤有辅助保护作用检验方法” 方案二的酒精肝损伤模型方法。将60只成年小鼠随机分为5组，分别为对照组、模型组、实验低剂量组（87.5mg/kg bw）、中剂量组（175.

6、0mg/kg bw）和高剂量组（525.0mg/kg bw）。实验剂量组每日经口灌胃给予对应剂量受试样品，空白对照组和模型对照组给予蒸馏水。给予受试样品32天后，将乙醇模型组及各实验剂量组一次灌胃给予50%乙醇，空白对照组给蒸馏水。检测小鼠肝脏匀浆液的丙二醛（mda）、谷胱甘肽（gsh）、甘油三酯（tg）及肝脏病理学组织检查。统计学处理采用spss 16.0统计软件进行分析，结果用 meansd表示。3 结果3.1 受试物对小鼠体重的影响 由表1可见，模型对照组、各实验剂量组小鼠初始体重、中期体重、末期体重与空白对照组比较，均无显著性差异（p0.05)。表1. 对小鼠体重的影响组别动物，只初始

7、体重，g中期体重，g末期体重，g空白对照组1220.21.234.52.838.32.6模型对照组1220.41.134.02.038.52.487.5mg/kg1220.11.034.12.237.82.2175.0mg/kg1221.01.334.41.838.42.3525.0mg/kg1220.21.234.62.338.02.73.2 对小鼠肝脏功能指标的影响 与空白对照组比较，模型对照组小鼠肝脏匀浆中的丙二醛（mda）、甘油三酯（tg）显著升高（p0.01），谷胱甘肽（gsh）显著降低（p0.01），表明模型成立。与乙醇模型组比较，各实验剂量组肝匀浆中 mda和tg水平均显著降低（

8、p0.05，p0.01），中、高剂量组小鼠gsh显著升高（p0.05，p0.01），低剂量组小鼠肝匀浆中的gsh则无明显变化（p0.05）。表2. 对小鼠肝脏功能指标的影响组别动物，只mda，umol/100gtg，mmol/100ggsh，umol/100g空白对照组1227.54.22.20.4195.931.6模型对照组1246.83.0*3.10.6*101.725.1*87.5mg/kg1231.65.22.50.5124.919.4175.0mg/kg1229.24.72.60.4155.323.8525.0mg/kg1228.54.42.30.7160.921.5*与空白对照组比

9、较，p0.01；与模型对照组比较，p0.05，与模型对照组比较，p0.013.3 对小鼠肝组织病理学检查及评分的影响 与空白对照组比较，模型对照组小鼠的肝脏重量、肝脏系数、肝脏病理学平均积分均有显著性差异（p0.05，p0.01），表明模型成立。各剂量组与模型对照组比较，小鼠肝脏重量、肝脏系数和肝脏病理学平均积分无明显差异（p0.05）。表3. 对小鼠病理学指标评分的影响组别动物，只肝脏重量，g肝脏系数，%平均积分空白对照组121.450.094.130.311.330.89模型对照组121.690.20*4.850.34*2.750.87*87.5mg/kg121.620.194.770.6

10、02.580.90175.0mg/kg121.700.184.800.622.420.86525.0mg/kg121.660.214.750.592.260.89*与空白对照组比较，p0.05，*与空白对照组比较，p0.014 讨论肝脏为人体消化系统中最大、最重要的消化腺体具有重要的消化功能。肝也是胎儿的主要造血器官和人体的主要代谢器官和防御器官。它对人体外来的和代谢产生的许多有害因素实施其强大的防御解毒功能一般情况下, 肝脏对外来化学毒物有很强的生物转化、解毒功能。乙醛、有机磷、丙烯晴、铅等等很多化学物质也包括酒精及某些药物会引起的肝损伤, 而且酒精肝损伤也目前最常见的。这些毒物在人群中普遍

11、易感,潜伏期短,病变的过程与感染的剂量直接相关,可引起肝脏不同程度的肝细胞坏死、脂肪变形、肝硬化、胆汁淤积、肝纤维化、甚至肝癌，对人体危害非常大。本实验结果显示与空白对照组比较，模型对照组小鼠肝脏匀浆液的丙二醛（mda）、甘油三酯（tg）及肝脏病理评分显著升高（p0.01），谷胱甘肽（gsh）显著降低（p0.01），表明模型成立。与乙醇模型组比较，各实验剂量组肝匀浆中 mda和tg水平均显著降低（p0.05，p0.01），中、高剂量组小鼠gsh显著升高（p0.05，p0.01）。表明姜黄双蓟胶囊对酒精导致急性肝损伤小鼠具有保护作用。参考文献1 舒志成，徐容容.天然化合物姜黄素的生物学作用综述j.饮料工业，2017，20（4）：55-58.2 肖志勇.姜黄提取物对小鼠肝纤维化的影响.生物技术通讯.2018年7月,29（4）：516-5203马星海.水飞蓟化学成分和药理作用研究进展.亚太传统医药.2015年10月，11（19）：62-654 vargaz，ujhelyil，kissa，etalffect of silybinon phorbol myristate actetate-induced protein kinase c translo-cation，nadph oxi