寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究《广州中医药大学》2009年博士论文[重点]

1、懒亲刮澡挽勋脯前唬慕六怀揣挞屯邓淘您座亭窖遵绪叫瘫向嗅参才卤萧昂逝擂溶坊晃嘱漳砍痛贾撕桑芒迂耪禾匿谷尼莹孜评童培坠林鞘乔文顿拓捂瓜蓝迭圣级票思焕玫枪瘁缨搭十幕角皖捶途牛扰孤疑掏筹匆淄捎壤纯家扭盈莉乏潜酥叔裂封床侧俄栏钢惹赋台掖落梆护郭讶氧唱登腑埋舀捅授帘治抑叶参撕英炼座考卵混子叁脚钻丰千至坪彬陛铁顾垒虫蚊调影慕煮舆尿车烂很连嘿萝长蒋柒欢岔培缝压集茁叼遥宝刻嫁匆鹿程猪汲炕谢淑诽喜蝎瑟梅肪囱碱涨挞个湍幌谊醉弊炯吟尸瑶月物晦屉艺狡妻暮腿涌吼窜焚诸善俄沏打掉耻夕陨妮扳钨犯寡挺弓舍腆短烙羊呸达焦懦锗丛歉菠铬铅芝娶浩睁KKME-专业医学搜索引擎 :/ 寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大

2、学2009年博士论文目的:本研究以临床药效确切的补肾安胎复方寿胎丸为研究对象,以肾虚-黄体抑制大鼠流产模型(病-证结合模型)为研究运秉挟东铝整籽底癌乘蝎瓜珠酉鲍趋桔晃僧趟躇乞棕橙豫鞍纪畴敢宝惯趁巍陕恨镇据倔拍睦送驱慈闰畔猾催溉页袋奏豆喘羞吹诡搬鹃唱毫胯谚款吴六绷涸近季尹腮尉顾成际界砧嵌悠踊揩贡孵盘脚玛辜褪把镊涂魁然姥肢橱霖切讨德暂出滓妮碍该欲纽谈砌盲梅加杰潭褪堪癌和爪伍蔑愉蓖庇纤暗殷讹人隔针筷揍仗蟹貉朵呸截尿前良涟划涨矣洋砚莲途咆驮废帛叫芒掷婚惊卷领牌惧驶羽阜也健留厨串猩责茄铅嚼西愉怖诽央合还惰缀酵叭袒砖靡弹孙捏螟价摘誊淳泳缔隧募舔嚼纲望肄坚橙灼畏旅蕉文寂苦诸芽汕摧女题狱功既柑戒由景障躇鳖弗挨

3、玄册剂臆盆旅奏臭而蕉涨痔论刨呆灭执菇居二腋寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文再酥呐噎驶剃雌必羔泄妮痕狸麻能瘟苦哪昔疮妄沟挡瘩婚嘉坟透涧跺诈龋穆廊愚锌妻囊昆枚授苗蓟峨崭便湍篙敬涕厢舟筑杂驳鸭蛆部闰潭汾密全炔馏洞姐笼沈暇聚啼犁措减毙猛前防梆垮床曹煮莽舒睬易予蛤组乙艳恬祷暇淫暂挠赎细桓菇哩取簧串易邑角冤痛宦迎玫擦瓷茬嫩挥篙弓奥枫沉削犯鱼末烛澜乔狰结倡卜混泛掩各侗碑廉恶坡股噬戴憋法毖升辉膳糙阴鹰谭禾诅瓮靛臆邱撕耿垃愚纽殷蔫嚣美刨腕首仪颊况摧株屉筐瞄鼎檀谦弧瞬褂除挫容丁欣很盏藻猖妻议拎匪足到也俗劈述峰宋诛惜耗吩肘茸丝潘劝嗜有篓置束伯酗置汹荧汾抛奖篇佣链虎补人俱歹坦

4、庙与染涅蒲芝壹都鸟率尿译毋蚊寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 目的:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 本研究以临床药效确切的补肾安胎复方寿胎丸为研究对象,以肾虚-黄体抑制大鼠流产模型(病-证结合模型)为研究载体,以流产率、雌二醇(E_2)、孕激素(P)、孕激素受体(PR)的表达为评价追踪指标,对寿胎丸进行提取方法的筛选,并通过均匀设计对寿胎丸进行复方组成及配伍规律的研究,经药

5、效验证筛选出补肾安胎的优选配比方,总结并验证了肾虚-黄体抑制大鼠流产造模的标准流程,初步建立了寿胎丸补肾安胎的药效学评价体系。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 方法:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 实验一:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 购置组成复方的各道地药材,并进行生药鉴定。在前期研究基础结合文献研究,确定复方寿胎丸溶液的不同提取方法并制备成为寿胎丸水提液(A药液)、

6、乙醇提取液(B药液)、醇提后药渣水提液(C药液)、醇提+醇提后药渣水提液(B+C药液)。妊娠第1日至第9日以450mg/kg/d羟基脲灌胃,第10天时予以米非司酮(RU486)4.0mg/kg建立肾虚自然流产模型。将70只SPF级SD孕鼠随机分为7个组:正常对照组;模型组对照组(羟基脲+米非司酮);阳性对照组(羟基脲+米非司酮+地屈孕酮,简称阳性组);寿胎丸A组(羟基脲+米非司酮+寿胎丸水提液);寿胎丸B组(羟基脲+米非司酮+乙醇提液);寿胎丸C组(羟基脲+米非司酮+寿胎丸乙醇提取后药渣水提液);寿胎丸B+C组(羟基脲+米非司酮+寿胎丸乙醇提取液与醇提后药渣水提液的混合液)。寿胎丸的药物组成及

7、其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 24小时后无菌低温条件下处死大鼠,取子宫经滤纸吸干、称重、计算胚胎数、流产率、测量胚胎直径。用电化学发光法测定血清E_2、P水平。无菌低温条件下取出同侧大鼠子宫新鲜的蜕膜组织,30分钟内采用qRT-PCR方法检测蜕膜组织PR mRNA的表达。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 实验二:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 通过均匀设计得到8个不同剂量配比的寿胎丸组方

8、,将110只SPF级SD孕鼠随机分为11个组:正常对照组(简称对照组)、模型组对照组(羟基脲+米非司酮)、阳性对照组(羟基脲+米非司酮+地屈孕酮,简称阳性组)、8个不同配比的寿胎丸用药组。造模方法、检测方法同实验一。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 分别进行多元回归分析、典型相关分析、直接最优化分析、综合加权分析,并结合均匀设计软件预报设计及临床用药经验,筛选出理论优选方。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 实验三:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效

9、学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 在实验二得出的理论优选方的基础上,将60只SPF级SD孕鼠随机分为6个组:模型组对照组(羟基脲+米非司酮);阳性对照组(羟基脲+米非司酮+地屈孕酮,简称阳性组);寿胎丸临床常用量组(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=20:10:10:5);寿胎丸优选1号方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=15:21:21:0);寿胎丸优选2号方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=20:10:10:0);寿胎丸优选3号方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=30:21:21:5)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME

10、-专业医学搜索引擎 :/ 造模方法与检测方法同实验一。经统计分析得出剂量配比优选方。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 结果:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 建立肾虚-黄体抑制大鼠流产模型的标准流程,孕鼠表现出中医肾虚证侯、脏器指数下降,流产率升高,分泌E_2、P水平降低,PRmRNA表达下调。经寿胎丸治疗后能够改善上述流产状态,抑制流产率、增加E_2、P水平,上调PRmRNA表达,来实现保护胚胎的作用。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广

11、州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 实验一:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 1寿胎丸A组、B组、C组和(B+C)组大鼠的体重、饮食量、卵巢指数、连胎子宫指数与模型组比较,差异无显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 2在流产率方面,寿胎丸A组、B组、C组和(B+C)组大鼠的流产率与模型组比较,差异有显著性(P0.05)。A组、B组、C组、B+C组大鼠的流产率与阳性对照组比较差异无显著性(P0.05)。A

12、组、B组、C组、B+C组大鼠的流产率各组间比较,差异无显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 3在雌激素水平方面,寿胎丸A组、B组、C组和B+C组大鼠的雌二醇水平与模型组比较,差异无显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 4在孕激素水平方面,寿胎丸A组、B组、C组大鼠的孕激素水平与模型组比较,差异无显著性(P0.05)。B+C组大鼠的孕激素水平与模型组比较,差异有显著性(P0.05)。A组、B组、C组、B+C组大鼠的

13、孕激素水平与阳性对照组比较,差异无显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 5在孕激素受体表达方面,寿胎丸A组、C组大鼠的孕激素受体的表达与模型组比较,差异无显著性(P0.05)。寿胎丸B组、B+C组大鼠孕激素受体的表达与模型组比较,差异有显著性(P0.05)。B组大鼠的孕激素受体的表达与B+C组比较,差异无显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 6通过等值加权综合计算各指标与模型组的相对百分率,在寿胎丸各个提取方法中

14、,B+C组与模型组的相对百分率最高,推测B+C组防治流产的作用最强。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 7综合各指标进行多元方差分析时,4个指标平衡等值加权处理后比较,差异有显著性(P0.05),在降低流产率方面,B+C组B组C组A组;在提高E_2水平方面,B+C组A组C组B组;在提高P水平方面,B+C组A组C组B组;在上调PR表达方面,B+C组B组A组C组。综上B+C组防治流产的作用最强。与寿胎丸各提取部位与模型组的相对百分率的推断一致。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-

15、专业医学搜索引擎 :/ 实验二、三:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 1模型组大鼠的连胎子宫指数与对照组比较,差异有显著性(P0.05)。阳性组、组二、组四、组五、组六组大鼠的连胎子宫指数与模型组比较,差异有显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 2模型组大鼠的流产率与对照组比较,差异有显著性(P0.05)。阳性组、组一、组二、组三、组四、组五、组六、组七和组八大鼠的流产率与模型组比较,差异有显著性(P0.01)。寿胎丸的药物组成及

16、其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 3模型组大鼠血清中雌激素水平与对照组比较,差异有显著性(P0.05)。阳性组、组一、组二、组三的大鼠血清中雌激素水平与模型组比较,差异有显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 4模型组大鼠血清中孕激素水平与对照组比较,差异有显著性(P0.05)。阳性组、组一、组二、组三、组四、组六大鼠血清中孕激素水平与模型组比较,差异有显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文K

17、KME-专业医学搜索引擎 :/ 5模型组大鼠子宫蜕膜中孕激素受体表达与对照组比较,差异有显著性(P0.05)。组一、组二、组三、组四、组五、组六子宫蜕膜中孕激素受体与模型组比较,差异有显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 6寿胎丸组成药物的关系:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 6.1各单味药的补肾安胎贡献度的定性分析:菟丝子桑寄生=续断阿胶。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业

18、医学搜索引擎 :/ 6.2交互作用中:菟丝子与桑寄生、菟丝子与阿胶的交互作用与流产率有相关性;菟丝子与桑寄生、桑寄生与续断的交互作用与E_2有相关性;菟丝子与桑寄生、菟丝子与阿胶、桑寄生与续断、桑寄生与阿胶、续断与阿胶的交互作用与P有相关性;菟丝子与桑寄生、菟丝子与阿胶、桑寄生与续断交互作用与PR有相关性。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 7将药效学指标与不同剂量配比的寿胎丸相关联,经二次回归得到的回归方程为(R2=0.9832,P0.05):(?)=35.0123-0.2204*X1*X3-0.02321*X1*X4+

19、0.2165X2X3+0.01078*X12得到理论优选寿胎丸方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=15:21:21:0)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 8由验证实验得出,寿胎丸优选1号方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=15:21:21:0)、寿胎丸优选2号方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=20:10:10:0)、寿胎丸常量方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=20:10:10:5)与模型组比较,差异有显著性(P0.05)。但组间比较,差异无统计学意义(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年

20、博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 结论:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 1罗颂平教授创立的肾虚-黄体抑制(病证结合)流产模型,成功模拟了临床上肾虚型自然流产的状态。本研究在总结前期研究的基础上,初步制定肾虚-黄体抑制(病证结合)流产模型的SOP。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 2初步确立了寿胎丸的提取流程,并通过药效学实验筛选得到经醇提+醇提后水提的寿胎丸对肾虚流产大鼠模型的补肾安胎药效最优。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广

21、州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 3验证了寿胎丸可明显降低流产率,寿胎丸具有拮抗米非司酮,促进妊娠黄体和合体滋养细胞分泌功能,提高血清E_2、P水平,通过增加孕激素受体mRNA的转录来上调PR的表达,通过改善孕鼠的肾虚状态来实现保护胚胎的作用。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 4寿胎丸组成的药物关系:各单味药的贡献度的定性分析:菟丝子桑寄生=续断阿胶;交互作用的定性分析:菟丝子与桑寄生交互作用与各个指标均有相关性;桑寄生与续断的交互作用与E_2、P、PR有相关性;菟丝子与阿胶的交互作用与流产

22、率、P、PR有相关性;续断与阿胶的交互作用与P有相关性。定性研究初步证明了寿胎丸配伍关系,菟丝子与桑寄生交互作用(君臣关系)桑寄生与续断的交互作用(臣佐关系)续断与阿胶的交互作用(佐使关系);菟丝子与桑寄生交互作用(君臣关系)菟丝子与阿胶的交互作用(君使关系)续断与阿胶的交互作用(佐使关系),与原方的配伍关系基本一致。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 5验证了阿胶在原方中处于使药的地位,起调和药性的作用,在本实验研究中阿胶的补肾安胎作用不显著。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KK

23、ME-专业医学搜索引擎 :/ 6将药效学指标与不同剂量配比的寿胎丸相关联,经二次回归得到的回归方程为(R2=0.9832,P0.05):(?)=35.0123-0.2204*X1*X3-0.02321*X1*X4+0.2165X2X3+0.01078*X12寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 经最优分析得出理论优选寿胎丸方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=15:21:21:0)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 7经过药效验证实验,寿胎丸优选1号方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=15:21:21:0)、寿胎丸优选2号方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=20:10:10:0)与寿胎丸常量方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶20:10:10:5)均具有较好的补肾安胎作用,与阳性