溶出度试验相关理论(剖析)

1、溶出度试验相关理论(剖析)1 溶出度试验的相关理论 l一、溶出度概念与适用范围 l二、溶出度试验的重要性 l三、溶出曲线的测定 l四、溶出度方法的建立 l五、溶出度方法的验证 l六、影响溶出度测定的因素 溶出度试验相关理论(剖析)2 一、概念与适用范围 1、概念 溶出度：药物从制剂中溶出的速率与程度（评价药品有效性） 包括溶出度与释放度。 溶出度试验是评价口服固体制剂内在质量的一种重要手段， 旨在保证不同生产企业生产的同一药品的口服固体制剂具有 相同的品质和疗效。 2、适用范围 2.1 水中难溶药物的制剂 2.2 水中虽易溶，但处方与工艺造成阻溶的制剂 2.3 治疗剂量与中毒剂量接近的制剂 2

2、.4 缓释制剂、控释制剂、肠溶制剂、透皮贴剂等 2.5 易溶的药物，也应考察溶出度 溶出度试验相关理论(剖析)3 二、溶出度试验的意义 l固体制剂口服给药后，药物的吸收取决于药物由制剂中的释 放、生理条件下药物的溶出度或溶解作用及药物在为胃肠道 的生物膜通透性。而药物制剂中的释放、生理条件下药物的 溶出度具有决定性作用，因此药物的体外溶出度有可能预测 体内行为。 l1、评价制剂批间的质量的一致性； l2、指导新制剂的开发； l3、产品发生某些变更后，如处方、生产工艺、生产场所的 变更和生产工艺的放大后，确保药品质量和疗效的一致性。 溶出度试验相关理论(剖析)4 如何将原料制成（固体）制剂如何将

3、原料制成（固体）制剂 即如何科学、有效地进行即如何科学、有效地进行 制剂工艺制剂工艺/处方处方/辅料的筛选辅料的筛选 主要评价：溶出度试验主要评价：溶出度试验 溶出度试验相关理论(剖析)5 从专业角度看：疗效的优劣，即药物在体内吸收的多寡，是 与生物利用度紧密相关的。 一个优质药品，在采用一定的装置与转速条件下（通常认为桨 板法/50转最接近中老人人群），在pH值的宽范围内（即多种 溶出介质中）可能均有一定溶出与释放，这样就可保证该药品 用于人体时，可在各种体内环境下，对任何体质患者均有一定 疗效！ 劣质药品，可能只在一种体内环境下（如青壮年、胃酸正常 者）才有一定的溶出和吸收，而在其他体内环

4、境下可能崩解、 溶出就会很差，生物利用度也就很低。 如果某制剂，仅在pH 1.2条件下体外溶出较好，在pH 6.8条 件下体外溶出较差，结果也许只能保证对于胃酸正常的患者吸 收良好，而对胃酸缺乏的患者可能就会很差了。 溶出度试验相关理论(剖析)6 疗疗 效效 的的 优优 劣劣 体内生物利用度的差异体内生物利用度的差异 体外溶出曲线的不同体外溶出曲线的不同 制制 剂剂 的的 优优 劣劣 关键、核心关键、核心 溶出度试验相关理论(剖析)7 生物利用度生物利用度 体外多条溶出曲线体外多条溶出曲线 处方处方/辅料辅料/制剂工艺制剂工艺 原研药原研药 生物利用度生物利用度 体外多条溶出曲线体外多条溶出曲

5、线 处方处方/辅料辅料/制剂工艺制剂工艺 仿制药仿制药 相同相同 相同相同 不同不同 90% 企业界的使命企业界的使命 仿制药研发思路仿制药研发思路 “殊途同归殊途同归” 溶出度试验相关理论(剖析)8 均能够具有相似均能够具有相似 的溶出曲线的溶出曲线 生物等效生物等效 大多数药物大多数药物 极少数药物极少数药物 生物不等效生物不等效 体外溶出度试验，在各种溶体外溶出度试验，在各种溶 出介质中，在严格的溶出度出介质中，在严格的溶出度 条件下（低转速）条件下（低转速） 生物等效性试验生物等效性试验 这样就大大提高了生物等效性这样就大大提高了生物等效性(BE)试验的试验的 成功率！但并不能替代成功

6、率！但并不能替代BE试验！试验！ 溶出度试验相关理论(剖析)9 pH 7 溶出度溶出度 pH 1 0 20 40 60 80 100 0204060 . . 0 20 40 60 80 100 0204060 Time (min) 0 2 4 6 0510152025 Time (h) 0 2 4 6 0510152025 胃酸正常患者胃酸正常患者 预测体内血药浓度预测体内血药浓度实测体内血药浓度实测体内血药浓度 胃酸缺乏患者胃酸缺乏患者 A药厂产品药厂产品 B药厂产品药厂产品 0 1 2 3 4 5 6 7 010203040 Time (h) 0 1 2 3 4 5 6 7 0102030

7、40 Time (h) 年年 轻轻 人人 老老 年年 人人 溶出度试验相关理论(剖析)10 三、溶出度曲线的测定 l日本仿制药申报要求，体外至少四条溶出曲线与原研制剂 一致，方可申报。 世界卫生组织、美国与欧盟要求皆雷 同日本。 l 我国新药审评中心2010年9月发布了“关于仿制药通用技 术文件（简称:CTD）申报资料提交要求征求意见的通 知”，其中明确规定“需进行多溶出介质中的比对研究”！ l说明自研产品与对照药品在不同溶出条件下的溶出曲线比 较研究结果（采用f2相似因子的比较方式）。 溶出度试验相关理论(剖析)11 溶出度曲线的具体操作 v1、溶出介质选择（不少于四种）： v【普通制剂】

8、v(1)酸性药物 pH值分别为1.2、5.5-6.5、6.8-7.5和水； v(2)中/碱性药物和包衣制剂 v pH值分别为1.2、3.05.0、6.8和水； v(3)难溶性药物制剂 pH值分别为1.2、4.0-4.5、6.8和水； v(4)肠溶制剂 pH值分别为1.2、6.0、6.8和水； v【缓/控释制剂】 v pH值分别为1.2、3.05.0、6.87.5和水。 l与美国作法有所不同：美国统一采用1.0、4.5、6.8和水。 l无论何种制剂都不建议采用pH7.6以上的介质进行； 溶出度试验相关理论(剖析)12 v v 从市场上购买来不同时间点的不同批号，分别测定，观 测溶出曲线波动情况。

9、酌情审定 v v 生产规模10万单位或今后最大生产规模的1/10。 v 含量与参比制剂的差值应在5%以内。 v 选用的样品应在重量/装量差异所规定范围的1/2内。 v v 理论上个测定12个单位，现实情况测定6个单位即可， 溶出度试验相关理论(剖析)13 v2、测定时间点的确定 v普通制剂与肠溶制剂可为5、10、15、20、30、45、60、90、 120分钟，此后每隔1小时直至6小时止；缓控释制剂可为15、 30、45、60、90、120分钟，3、4、5、6、8、10、12、24小 时。当连续两点溶出率均达90%（缓控释制剂为85%）以上、 且差值在5%以内时，试验则可提前结束。 v v 在

10、酸性介质中最长测定时间为2小时，在其他各pH值介 质中普通制剂为6小时，缓控释制剂为24小时。 v 溶出度试验相关理论(剖析)14 l3、累积释放度校正计算公式 l3.1 补液时 l各时间点校正后的累积溶出量（%） l其中Cn为各时间点取出后的样品浓度； lL为制剂标示量（单位需与Cn一致） lV1为各时间点固定取样体积 lV2 为溶出介质体积 溶出度试验相关理论(剖析)15 3.2 不补液时： 各时间点校正后的累积溶出量（%） 其中Cn为各时间点取出后的样品浓度 L为制剂标示量（单位需与Cn一致） V1为各时间点固定取样体积 V2 为溶出介质体积 溶出度试验相关理论(剖析)16 l4、曲线比

11、较法 l美国和日本等国家的官方机构采用相似因子的模型非依赖 方法，采用“相似因子”和“差异因子”比较溶出度曲线。 通过计算差异因子（f1)和相似因子（f2）比较溶出行为的 相似性， l4.1 相似因子（f2)的计算 l其中Rt和Tt分别表示两制剂在第n个取样点时的平均累积 溶出率 溶出度试验相关理论(剖析)17 l4.2 差异因子（f1)的计算 l其中n为时间点个数，Rt为参照批次（改变前）药品在时间t 的溶出度值，Tt为试验批次（改变后）药品在时间t的溶出度 值 溶出度试验相关理论(剖析)18 l5、计算时间点的确定： l计算时所选取的时间点相隔无需相等，但两制剂所取时间点 必须一致；且计算

12、时间点应不少于3个 ，由于该计算结果有 赖于比较时间点个数的特性，故溶出率在85%以上的时间点 应不得多于一个。 l建议依据参比制剂溶出率的具体情况，选取溶出率间隔相近 的45个时间点进行计算，除0小时外，第一选取时间点溶出 结果的变异系数应不得过20%，自第二时间点至最后时间点 溶出结果的变异系数应不得过10%，如超过，应从仪器适用 性或样品的均一性角度考虑予以解决。 溶出度试验相关理论(剖析)19 l6、溶出曲线相似性的判定 l通常，根据每一时间间隔时两条曲线的平均溶出度值， 计算差异因子和相似因子，当f1值接近0，f2值接近100 时，认为两曲线相似。一般情况， f1值达15（0- 15

13、）;f2高于50（50-100），则两条曲线可确认为相同 性或等价性。 l后来普遍采用f2比较法，当f2数值介于50-100认为两条 溶出曲线是相似的，该数值限定是基于两条比较曲线上 任一比较时间点溶出量平均差异限度不大于10%的考虑， 溶出度平均差异与相应f2因子临界值的关系： l由于曲线形式多样，根据曲线的不同形态，分别拟定了 限度值 比较时间点溶出量平均差异2%5%10%15%20% F2因子临界值8365504136 溶出度试验相关理论(剖析)20 l6.1 普通与肠溶制剂 l【用于仿制药时） l（1）参比制剂在15分钟内平均溶出率达85%以上，仿制制 剂在15分钟内平均溶出率也达85

14、%以上；或15分钟时，仿 制制剂与参比制剂平均溶出率的差在15以内。 l（2）参比制剂在1530分钟平均溶出率达85%以上时，f2 因子大于42. l(3)参比制剂在30分钟内平均溶出率未达85%，但只要满足 一下任何一个条件仍可判定为相似。 la.参比制剂平均溶出率在结束时间内达85%以上时，f2因 子大于42. lB.参比制剂平均溶出率在结束时间内达50%以上但未达85% 时，f2因子大于46. lC.参比制剂平均溶出率在结束时间内未达50%时，f2因子 大于53. 溶出度试验相关理论(剖析)21 【用于其他各事项时】： （1）原制剂在15分钟内平均溶出率达85%以上，变更后制剂在 15分

15、钟以内平均溶出率也达85%以上；或15分钟时两者的 平均溶出率差在10%以内。 （2）原制剂在1530分钟平均溶出率达85%以上时，f2因子大 于50. （3）原制剂在30分钟内平均溶出率未达85%，但只要满足一下 任何一个条件仍可判定为相似。 原制剂平均溶出率在结束时间内达85%以上时，f2因子大于50 原制剂平均溶出率在结束时间内达50%以上但未达85%时，f2 因子大于55 原制剂平均溶出率在结束时间内未达50%，f2因子大于61。 溶出度试验相关理论(剖析)22 6.2 调释制剂： 中国药典所定义的缓释制剂、控释制剂以及迟释制剂均属于 调释制剂的范畴。 l【用于仿制药研发时】 l（1）

16、参比制剂在结束时间内平均溶出率达80%以上，f2因子 大于50 l （2）参比制剂在结束时间内平均溶出率达50%以上但未达 80%时，f2因子大于55 l （3）参比制剂在结束时间内平均溶出率达未50%，f2因子 大于61 溶出度试验相关理论(剖析)23 对于仿制药、为提高生物等效性对于仿制药、为提高生物等效性 试验成功率、如何确定体外溶出度试验成功率、如何确定体外溶出度 试验条件与参数？试验条件与参数？ 至关重要至关重要 溶出度试验相关理论(剖析)24 四、溶出度方法的建立 l1 中、美、英、日四国药典收录情况 l中 国 转篮法、桨法、小杯法（2010版） l美 国 转篮法、桨法、流池法、往

17、复筒法、圆筒法、 l 桨碟法、往复架法 l英国 转篮法、桨法、桨碟法、流池法 l日 本 转篮法、桨法、流池法 溶出度试验相关理论(剖析)25 l2、使用范围 l2.1 转篮法 l适用于：胶囊、丸剂、片剂、漂浮的制剂 l不适用于：崩解型片崩解后颗粒下沉的片剂，或粘性易堵塞 筛网的制剂 l2.2 浆法 l片剂、胶囊、丸剂崩解型片崩解后颗粒下沉的片剂，底部易 形成“锥形堆积”应使用桨法 l2.3 小杯法 l小剂量的片剂、胶囊、丸剂 l一般仅供UVVIS测定 l如用HPLC测定，一般应采用篮法或桨法 溶出度试验相关理论(剖析)26 l3.ChP2010溶出度的变化 l3.1.扩大了篮、轴和桨的材料范围

18、 l不锈钢 不锈钢或其他惰性材料 l3.2.溶出杯：高：1688mm 18525mm l3.3.篮的尺寸 l篮网丝径： 0.25mm 0.280.03mm l网孔： 0.4mm 0.40.04mm l篮内径：20.2mm 20.21mm 靠拢 l通气孔：2.0mm 2.00.5mm l2.4.篮法：先开启转动，再降入杯中 先降入杯中，再 开启转动 l2.5.桨法：先开启转动，再投药 先投药，再开启转动 l2.6 取样点：篮(桨)上部至液面中间距杯壁10mm处 不 小于10mm处 溶出度试验相关理论(剖析)27 l4. 溶出度方法选择的一般原则： l4.1 对于非崩解型药物，宜采用转篮法 l4.

19、2 对于崩解型药物，在进行转篮法的整个试验过程中，确 保转篮的通透性尤为重要，对于处方中主药或辅料（如胶性 物质），影响转篮通透性的固体制剂，一般用浆法 l4.3 制剂中含有难以溶解，扩散的成分，一般应用浆法 l4.4 对于漂浮的制剂，一般应用转篮法，如辅料堵塞网孔， 则应选用浆法，将供试品放入沉降篮中，并在正文中加以规 定，采用小杯法时不能用沉降篮。 l4.5 小杯法主要用浆法条件下，溶出液的浓度过稀，即使采 用灵敏度低的方法也难以进行定量测定的品种 溶出度试验相关理论(剖析)28 l5、转数的选择： l在研究基础上，尽量选择低转速。转篮法以100转/分为主; 桨法以50转/分为主。小杯法适

20、用于小剂量片剂、胶囊， 推荐35转/分， 一般使用3550转/分。 。 l流体力学效应认为： l转篮法100转/分 桨法50转/分 小杯法35转/分 l注：机械参数的选择一定要具有区分力。如设定得宽松（如 桨板法/100转、加高浓度表面活性剂、甚至有机溶剂），则 于体内的评价可能就会失去意义，建立不起体内外相关性， 也无法评价生物等效性了 溶出度试验相关理论(剖析)29 溶出度试验中的溶出度试验中的“转速转速”与生物利用度的相关性与生物利用度的相关性 桨板法桨板法 100转转 桨板法桨板法 50转转 0 500 1000 1500 0246810 Time (h) Conc (ng/ml) 0

21、 20 40 60 80 100 024681012 Time (h) % dissolved A药厂产品药厂产品B药厂产品药厂产品 0 20 40 60 80 100 024681012 Time (h) % dissolved 身体机能良好者体内身体机能良好者体内 0 200 400 600 800 0246810 Time (h) Conc. (ng/ml) 身体机能虚弱者体内身体机能虚弱者体内 相相 关关 不相关不相关 相相 关关 溶出度试验相关理论(剖析)30 l6、介质体积选择： l溶出介质的体积一般应符合漏槽条件，漏槽条件是指药物在 溶出或释放介质中的浓度远小于其饱和浓度，一般溶

22、出（释 放）的介质体积为药物饱和溶液所需介质体积的310倍。一 般一个剂量单位以溶剂900ml或1000ml为最普遍，规格较小 时也可使用常用体积的 1/23/4。后来增加了小杯法（即 溶出度测定法第三法），小杯法常用体积为100250ml。 l每个溶出杯中只允许放一片（粒）制剂 溶出度试验相关理论(剖析)31 l7、溶出介质选择 l应根据制剂的特性选择用水、0.010.1mol/L的盐酸溶液或 适宜的缓冲液（pH一般不超过7.6）。应临用新配经脱气处 理，对于极难溶出的品种，可适量加入表面活性剂（如0.5% 以下的十二烷基硫酸钠），如确需使用有机溶剂，可适量加 入，如异丙醇、乙醇等（浓度通常

23、5%以下），但应有依据 并尽可能选用低浓度。必要时应做生物利用度考察。 l通过测定药物在不同介质中的溶出曲线（通常应测定至 药物 全部溶出）来选择适宜的溶出介质。 l7.1 原则：所选介质应能灵敏地反映制剂生产工艺的变化， 不推荐严格模拟体内胃肠道环境 l7.2 介质种类 l7.2.1 水最常用，良好脱气水的pH值为5.07.0适用于 溶解度对pH值不敏感的药物 l水的表面张力大，对某些药物可能不适用 溶出度试验相关理论(剖析)32 l7.2.2 酸溶液模拟酸性胃液的介质 l适用于酸中稳定的药物 l浓度一般为0.10.01mol/L，pH值一般为1.02.2 l7.2.3 醋酸盐缓冲液模拟中等

24、酸性胃液的介质 l浓度一般为0.05mol/L，pH值一般为3.46.0 l醋酸易挥发，导致pH值变化，溶出速率变化 l测定时间长的药物不宜采用醋酸盐缓冲液作介质 l7.2.4 磷酸盐缓冲液(PBS)模拟中等酸性至弱碱 性胃液或肠液的介质 l浓度一般为0.05mol/L，pH值一般为4.57.6 溶出度试验相关理论(剖析)33 l7.3 介质的pH值 l溶解度对pH值不敏感的药物，一般首选水 l溶解度对pH值敏感的药物 l适合胃内溶出的药物,应考虑不同人群胃酸分泌量的差异，确 保各类人群用药有效，一般应选择溶解度较小的pH值介质 l对于弱酸性药物，一般选择酸性介质 l对于弱碱性药物，一般选择近

25、中性或弱碱性介质 l考虑药物的稳定性，选择药物较稳定的pH值介质 l介质pH值应准确至规定值的0.05，介质的pH值一般不超 过7.6。如需使用更高pH值的介质，则应有充分的理由并进 行验证 l肠溶制剂：建议先用酸性介质，然后添加适宜温度的缓冲溶 液，再用酸或碱调节至所需的pH值 溶出度试验相关理论(剖析)34 l8、介质的温度： l口服制剂：37 0.5 l直肠用制剂：38 0.5 l经皮给药制剂：32 0.5 溶出度试验相关理论(剖析)35 l9、取样时间及限度的确定 l 应考虑临床用药需求及制剂的特点，考察溶出曲线，确定取 样时间,一般取样品时间为45分钟。 l复方制剂在溶出度测定时重点

26、针对难溶性或治疗窗窄的成分 进行。 l限度限度:对于普通制剂，建议以第一次出现溶出量均在85%以 上的两时间点，且该两时间点溶出量差值在5%以内时，取 前一时间点作为质量标准中的取样时间点，并将该点得溶出 量减去15%作为溶出限度，如第一时间点为20，由于其不为 刻钟的整数倍，一般同法顺延至30分钟。 l对于调释制剂，溶出度应至少设定三个取样时间点；第一点 是为避免“突释”故应设定为试验12小时后或溶出量相当 于标示量20%30%时间点；第二点是为考察药品溶出度特 性，该限度应设定在溶出量约50%时间点；最后一点是为确 保药物（几乎）定量释放，通常为药物溶出量超过70%时间 点，任何一点的拟定

27、范围建议勿超过标示含量的20%，且各 点溶出限度交叉范围的建议勿超过20%。 溶出度试验相关理论(剖析)36 五、溶出度方法的验证 l溶出度方法验证与含量测定基本相同： l包括：专属性、线性、耐用性、精密度、回收率、溶液稳定 性等 l值得注意的是： l1、含量测定回收率一般选用测试浓度的80120，高、中、 低浓度规定为80%、100%、120%；对于溶出度范围则规定为 限度的20%，高、中、低三浓度设为：50%、限度规定、100%。 l2、干扰试验：测定干扰性试验在2%以下可忽略不计，2-5% 之间可适当将限度提高，超过5%则测定方法不可取，如果是 空胶囊产生的应进行胶囊的消除试验（不大于标

28、示量2%可忽 略不计，大于标示量25%，试验无效）。空胶囊仅对UV测定 有吸收干扰，如用UV方法测定溶出度，每次均应进行空白胶 囊试验，因为胶囊壳的批次、来源不同，则UV吸收不同，会 给结果带来误差，当空胶囊干扰较大时，建议采用HPLC测定 溶出度试验相关理论(剖析)37 六、影响溶出度测定的因素 l1. 仪器的影响 l1.1. 仪器的工作环境 l应置无强光照射、气流稳定的位置、远离振动源、底脚加减 振海绵或橡胶（仪器振动位移为0.025毫米时，溶出增加5 10） l1. 2 仪器本身因素 l仪器的水平度、转杆的垂直度 l杯边高1mm，溶出量增加约3% l转杆倾斜 25，溶出量增大225% l转杆与杯板垂直度 l转杆与溶出杯中心度 l中心偏离1mm，溶出量约增加3% l偏离2mm，约增加8% 溶出度试验相关理论(剖析)38 l2.介质的影响 l2.1 介质的pH值 l影响药物的溶出