这些年 检验圈那点事儿

1、LOGO 这些年这些年 检验圈那点事儿检验圈那点事儿 医大总医院医大总医院 付付 红红 伟伟 2016-04-29 自己圈内的事您知多少？自己圈内的事您知多少？ v检验牛人知多少？检验牛人知多少？ 潘柏申、丛玉隆、尚红、王辉、王兰兰、崔巍、张婕 v检验组织检验组织/协会知多少？协会知多少？ 中华医学会检验分会 卫生部临检中心 CNAS v检验期刊检验期刊/网站网站/论坛知多少？论坛知多少？ Clinical chemistry, CCLM, 丁香园 v检验领域知名企业知多少？检验领域知名企业知多少？ Roche，Abott，Beckman，Hitachi v第三方实验室第三方实验室/医学实验室

2、托管医学实验室托管 金域，迪安，艾迪康 Company Logo 检验圈检验圈 “门事件门事件” v茶水门事件茶水门事件 v风扇门事件风扇门事件 v太阳门事件太阳门事件 v吃药门事件吃药门事件 Company Logo Company Logo 检验医学大事记检验医学大事记 v改革步伐风起云涌改革步伐风起云涌 医学检验- 检验医学检验医学 5年制？- 4年制？7年制？ 检验技师- 检验医师？ v技术创新此起彼伏技术创新此起彼伏 PCR- 芯片- 质谱- 高通量测序 v商业化浪潮推波助澜商业化浪潮推波助澜 罗氏 贝克曼 西门子雅培 手工 半自动 单机全自动- 全实验室自动化全实验室自动化 检验人

3、的地位检验人的地位 v 六档：我们不是辅助科室，我们只是不那么主流而已 病理：最喜欢宣称”你看看我们科在美国多NB“的科室没有之一 影像（无介入）及核医学：请不要叫我放射科，伦家是医学影像科 检验：领导们的低学历亲戚聚集地 超声：妹妹乖乖躺下不要怕，哥哥只是往这个粗粗的东西头上抹点润滑液而 已哦嘿嘿嘿嘿嘿嘿嘿 心电图：我那么认真出报告干嘛，反正这帮临床废柴肯定要请心内科会诊的 七档：不作死就不会死 急诊：今天又没被打我好开心 ICU（包括各个科室自己的ICU）：今天又没收烂病人我好开心 儿科：你们聊，我先走了。 八档：咦这些家伙是怎么混进这个排名的 所有行政科室 Company Logo v

4、一档：人生赢家 肿瘤：钱多事少医患和谐，上可申973发新英格兰下可各类小基金灌水文。 二档：我是高富帅，我不和你做朋友 心内（有介入）：我很忙，我吃射线很受伤，但老子钱多，你咬我啊哈哈哈 哈哈 骨科（除了手足外）：上至帝都积水潭下到街道黑诊所都无比滋润 消化（有腔镜）：老子见过的翔比你吃过的饭都多 三档：事多闲少死得早，你，值得拥有 泌尿：我好累。 普外：楼上，呵呵。 妇产：楼上，呵呵。 心胸：楼上，呵呵。（大医院） 神外：楼上，呵呵。（大医院） 四档：闷声发大财，低调作大死 整形：老子潜伏在医院就等着跳槽单干的那一刻 口腔：老子潜伏在医院就等着跳槽单干的那一刻+1 眼科：老子潜伏在医院就等着

5、跳槽单干的那一刻+2 皮肤：老子潜伏在医院就等着跳槽单干的那一刻+3 Company Logo Company Logop- 如何做个好实习生如何做个好实习生 实习中常见的几点误区实习中常见的几点误区1 2 3 实验室自动化背景下人的作用和意义实验室自动化背景下人的作用和意义 掌握自动化仪器核心原理和质量保障体系掌握自动化仪器核心原理和质量保障体系 交朋友学经验思前程 1. 实习中常见的几点误区实习中常见的几点误区 v感性认识感性认识 VS 理性认识理性认识 v以偏概全以偏概全 先入为主先入为主 v被动学习被动学习VS主动求知主动求知 v书本知识书本知识 VS 临床实践临床实践 Company

6、 Logo 国内检验科发展状况国内检验科发展状况 Company Logo Company Logo 国内检验人的生存状况国内检验人的生存状况 Company Logo 总医院检验人的一天总医院检验人的一天 自动化给检验科带来的改变自动化给检验科带来的改变 v传统分工协作模式的改变传统分工协作模式的改变 v质量和效率的提高质量和效率的提高 v对管理模式提出了新的要求和挑战对管理模式提出了新的要求和挑战 v人被解放出来，对知识结构提出新的要求人被解放出来，对知识结构提出新的要求 Company Logo Company Logo 临床生化自动化发展历程临床生化自动化发展历程 手工手工半自动半自动

7、 单机自单机自 动化动化 模块组模块组 合自动合自动 化化 全实验室全实验室 自动化自动化 Company Logo 手工定性检测时代手工定性检测时代 潘氏试验潘氏试验 磺基水杨酸酸法测定尿蛋白磺基水杨酸酸法测定尿蛋白 Company Logo 手工定量检测时代手工定量检测时代 v 1958年年581光电比色计问世光电比色计问世 v 1960年年62型分光光度计问世型分光光度计问世 突破：定量检测突破：定量检测 朗伯比尔定律朗伯比尔定律 v分别在1729年和1760年阐明了物质对光的吸收 程度和吸收介质厚度之间的关系； v1852年奥古斯特比尔，提出光的吸收程度和吸 光物质浓度也具有类似关系。

8、 Company Logo 17 光路和检测系统光路和检测系统 自动生化分析仪以自动生化分析仪以紫外可见分光光度紫外可见分光光度 法法为其中心和主要的检测手段，与一般分为其中心和主要的检测手段，与一般分 光光度计一样，其光路和检测系统由光光度计一样，其光路和检测系统由光源光源、 单色器单色器和和检测器检测器组成。组成。 18 单色器（单色器（monochromato） 干涉滤光片干涉滤光片（interference filterinterference filter）分光系分光系 统：常带有统：常带有340340、380380、405405、500500、550550、600600、 6606

9、60nmnm等几种滤光片。等几种滤光片。 光栅光栅（rasterraster）分光系统：常在分光系统：常在340340（或（或 293293）800800nmnm范围内选择范围内选择10101313种固定的单色光。种固定的单色光。 19 前分光和后分光方式前分光和后分光方式 光栅分光有前分光和后分光两种方式，光栅分光有前分光和后分光两种方式， 光源首先经过单色器分光，然后透射到比光源首先经过单色器分光，然后透射到比 色溶液的方式为色溶液的方式为前分光前分光。 目前以后分光方式为多见，其优点是目前以后分光方式为多见，其优点是 单色器中没有转动部分，双波长在同一时单色器中没有转动部分，双波长在同一

10、时 刻检测，因而提高了检测的精度和速度。刻检测，因而提高了检测的精度和速度。 20 后分光方式后分光方式 Company Logo 半自动检测时代半自动检测时代 v 加样、加试剂、保温反应、自动监测、报告打印、清洗加样、加试剂、保温反应、自动监测、报告打印、清洗 v 流动式流动式 VS 分离式分离式 突破：简单程序突破：简单程序 控制控制 Company Logo 单机全自动生化分析仪单机全自动生化分析仪 Company Logo 连续加样连续加样 软件操作系统软件操作系统 智能预警系统智能预警系统 开放式开放式 VS 封闭式封闭式 全自动生化分析仪组成全自动生化分析仪组成 v加样系统加样系统

11、 v检测分析系统检测分析系统 v清洗保养系统清洗保养系统 v数据处理及传输系统数据处理及传输系统 v监控错误及报警系统监控错误及报警系统 24 25 （1 1）取样和加试剂装置）取样和加试剂装置 1 1取样装置取样装置（sampling sampling assemblyassembly）：）： 由取样针、取样臂、取样管路、取样注射由取样针、取样臂、取样管路、取样注射 器和阀门组成，能定量吸取样品并加入到反器和阀门组成，能定量吸取样品并加入到反 应杯。应杯。 26 27 28 取样针防交叉污染措施取样针防交叉污染措施 绝大多数采用绝大多数采用水洗方式水洗方式（又有瀑布式和（又有瀑布式和 涌泉式

12、之分），在吸取另一个样品前对接触涌泉式之分），在吸取另一个样品前对接触 样品的样品针内外壁进行冲洗；样品的样品针内外壁进行冲洗； 也有采用也有采用化学惰性液化学惰性液（chemical chemical inertiainertiafluidfluid）膜的方式来隔绝样品与取膜的方式来隔绝样品与取 样针内外壁之间的接触。样针内外壁之间的接触。 29 混匀与混匀与搅拌装置搅拌装置 工作方式大多为工作方式大多为旋转式搅拌旋转式搅拌，也有，也有震动式搅拌震动式搅拌方方 式。也设置了防止搅拌棒在不同反应液之间携带式。也设置了防止搅拌棒在不同反应液之间携带 交叉污染的清洗措施。交叉污染的清洗措施。 30

13、 温控系统温控系统 温控系统温控系统使反应杯浸浴在恒温环境：使反应杯浸浴在恒温环境： 恒温恒温循环水浴方式循环水浴方式：温度传递速度快，保：温度传递速度快，保 养要求较高。养要求较高。 恒温恒温空气浴方式空气浴方式：温度传递速度不如恒温：温度传递速度不如恒温 水浴循环方式，保养简单。水浴循环方式，保养简单。 Company Logo 干化学全自动生化分析仪干化学全自动生化分析仪 发展历史发展历史 Company Logo 1970 1970 年：化学干片技术起源于年：化学干片技术起源于1970年的伊斯特年的伊斯特 曼曼-柯达公司柯达公司 1971 1971年年：借鉴普通临床生化反应序列借鉴普通

14、临床生化反应序列 生产出葡生产出葡 萄糖分析干片萄糖分析干片 19761976年：干片获得专利年：干片获得专利 1978 1978年：推出专利的干片生化技术年：推出专利的干片生化技术 19801980年：年：FDAFDA批准五个分析产品可以进入市场批准五个分析产品可以进入市场 1995 1995年：推出一些免疫产品年：推出一些免疫产品 LOGO LOGO 均匀分布标本均匀分布标本 过滤大分子过滤大分子 标本预处理标本预处理 提供反射测定的背景提供反射测定的背景 试剂层试剂层试剂层试剂层 包含干性试剂包含干性试剂 多层试剂，控制反应顺序多层试剂，控制反应顺序 指示剂层指示剂层指示剂层指示剂层 包

15、含染料以产生显色复合物包含染料以产生显色复合物 驱使反应完成驱使反应完成 支持层支持层 提供反应支持基垫提供反应支持基垫 允许光路自由通过允许光路自由通过 均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本 均匀分布标本均匀分布标本 标本进入扩散层标本进入扩散层 均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本 标本迅速向四周扩散标本迅速向四周扩散 均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本 标本均匀向下层渗透标本均匀向下层渗透 均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本 标本与试剂反应标本与试剂反应 均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本 反应物在指示剂层被固定反应物在指

16、示剂层被固定 反射光的测定反射光的测定反射光的测定反射光的测定 干扰物质干扰物质 反光背景反光背景 指示剂层指示剂层 生成纯净的反射光生成纯净的反射光 光源光源 滤光片滤光片 接收器接收器 低浓度低浓度高浓度高浓度 湿化学湿化学 ： n 采用透射光度法采用透射光度法 n 遵循朗勃比尔定律遵循朗勃比尔定律 干化学干化学 ： n 采用反射光度法采用反射光度法 n 遵循遵循Williams Clapper定律定律 吸光度吸光度 浓度浓度 反射光反射光 浓度浓度 LOGO 透射与反射透射与反射透射与反射透射与反射 检测检测 检测检测 光线经过干扰物质光线经过干扰物质 受影响受影响 光线不经过干扰物质光

17、线不经过干扰物质 不受影响不受影响 模块化全自动生化分析系统模块化全自动生化分析系统 v生化生化+免疫免疫 Company Logo 全实验室自动化全实验室自动化 Company Logo 控制中心控制中心 进样工作站进样工作站 条码阅读器条码阅读器 自动化离心机自动化离心机 开盖器开盖器 分杯器分杯器 生化分析仪生化分析仪 免疫分析仪免疫分析仪 储存器储存器 输出工作站输出工作站 2 自动化设备的掌握要点自动化设备的掌握要点 v血球分析仪血球分析仪/凝血分析仪凝血分析仪 v全自动生化分析仪（干化学全自动生化分析仪（干化学/湿化学）湿化学） v全自动免疫分析仪全自动免疫分析仪 v全自动微生物鉴

18、定及药敏分析系统全自动微生物鉴定及药敏分析系统 Company Logo 2-1血细胞分析仪血细胞分析仪 v国际血液学专家组推荐的国际血液学专家组推荐的41条复检规则条复检规则 v血细胞分析仪的各通道检测原理血细胞分析仪的各通道检测原理 v常见机器报警语言与对策常见机器报警语言与对策 v标本质量对检测结果的影响标本质量对检测结果的影响 Company Logo 52 XE系列 vs XN系列 XE 系列 DIFF WBC/ BASO NRBCIMI RET PLT-O RBC PLT Hgb 等 改变检测通道和试剂。染色液改变 XN 系列 WDF (DIFF) WNR (WBC/BASO/NR

19、BC) WPC RET PLT-O PLT-F RBC PLT Hgb 等 无改变无改变 NewNewNew FCMRF/DCDC,吸光度FCM 数据分析系统的改良 和溶血剂改变 New FCMDC,吸光度 1-1.1-1.规格规格：检测通道检测通道 1-2.1-2.基本原理基本原理：鞘流法鞘流法 RBC/PLT通道 鞘液 试剂喷头 小孔 回收管 计数粒子较多，重复性好 正确测定体积信息 电阻法的优点 血细胞通过电阻值发生变化脉冲被检测 当血细胞通过检测部小孔时，电阻信号 信号的大小与通过的细胞体积呈正比 电阻变化的次数细胞数 感应区域(感应电阻变化的区域） 时 间 电阻值 直流电 红细胞 血

20、小板 原理：电阻法 时 间 电阻值 1-2.1-2.基本原理基本原理： SLS-SLS-血红蛋白法血红蛋白法 HGB通道 血红蛋白（四聚体） 亲水基 疏水基 （月桂基硫酸钠） SLS的疏水基作用于 珠蛋白 （第2阶段） SLS的亲水基与Fe3+结合 （第4阶段） 珠蛋白 亚铁血红素 珠蛋白的 结构改变 （变性） 亚铁血红素的铁（Fe2+） 被氧化（Fe2+Fe3+） （第3阶段） 1-2.1-2.基本原理基本原理：流式细胞术流式细胞术 WNRWDFWPCRETPLT-F通道 激光 分色镜 侧向荧光 核酸和细胞器的种类和多少 侧向散射光 细胞内部信息 前向散射光 细胞的大小信息 XE系列 WBC

21、 / BASO NRBC FSC FSC SFL SSC XN系列 NRBC BASO SFL NRBC BASO WBC FSC WBC WBC FSC:前向散射光 SSC:侧向散射光 SFL:侧向荧光 1-3.原理：WNR通道 凝血分析仪凝血分析仪 v各主要指标的临床意义各主要指标的临床意义 阴性预测值 / 阳性预测值 v结果易受干扰的常见因素结果易受干扰的常见因素 抗凝药物的影响 v凝固曲线的解读凝固曲线的解读 Company Logo 全自动生化分析仪全自动生化分析仪 v质量控制体系（规范化流程控制）质量控制体系（规范化流程控制） v定标及质控策略定标及质控策略 v主要指标的临床意义主

22、要指标的临床意义 v机器报警信息与应对策略机器报警信息与应对策略 Company Logo 全自动免疫分析仪全自动免疫分析仪 v抗原抗体反应的基本特点抗原抗体反应的基本特点 特异性 可逆性 比例性（钩状效应） v免疫比浊免疫比浊/化学发光化学发光/电化学发光电化学发光/ELISA/放免放免 /胶体金胶体金/免疫组化免疫组化 等各自应用领域及主要优势等各自应用领域及主要优势 v标记免疫技术标记免疫技术/分离技术的发展进程分离技术的发展进程 同位素 荧光素 酶 化学发光素 金属微粒 磁珠法 微粒子法 量子点 等等分离技术的应用 v不同免疫检测系统可比吗？不同免疫检测系统可比吗？ Company Logo 全自动微生物鉴定及药敏分析系统全自动微生物鉴定及药敏分析系统 v细菌鉴定流程细菌鉴定流程 不同标本类型培养皿的选择 全自动血培养系统的原理及质量控制 药敏测定结果的解读 v生物安全理念及无菌操作意识生物安全理念及无菌操作意识