细胞工程复习课件

1、 细细 胞胞 工工 程程 应用的原理应用的原理 和方法和方法 细胞生物学和细胞生物学和 分子生物学分子生物学 细细胞水平或胞水平或细细胞器胞器 水平水平 按照人们的意愿来改按照人们的意愿来改 变细胞内的遗传物质变细胞内的遗传物质 或获得细胞产品或获得细胞产品 概念概念 分类分类 植物细胞工程植物细胞工程 研究的目的研究的目的 研究的水平研究的水平 动物细胞工程动物细胞工程 主主 要要 技技 术术 植物组织培养植物组织培养 植物体细胞杂交植物体细胞杂交 动物细胞培养动物细胞培养 动物细胞融合动物细胞融合 单克隆抗体技术单克隆抗体技术 核移植核移植 植物植物 细胞细胞 工程工程 技术技术 动物动物

2、 细胞细胞 工程工程 技术技术 前者前者是是细细胞水平或胞水平或细细胞器水平上生物技胞器水平上生物技术术, , 后者后者是分子水平上的生物技是分子水平上的生物技术术。 。 克隆多莉羊技术是克隆多莉羊技术是 水平上的技术，水平上的技术， 培育抗虫棉是培育抗虫棉是 水平上的技术。水平上的技术。 细胞工程与基因工程相比：细胞工程与基因工程相比： 细胞细胞 分子分子 思考思考: : 所采用技术 的理论基础 植 物 细 胞 工 程 通常采用的 技 术 手 段 植物组织培养植物组织培养 植物体细胞杂交植物体细胞杂交 植物细胞的全能性植物细胞的全能性 科学研究表明，处于离体状态的植物活科学研究表明，处于离体

3、状态的植物活 细胞，在一定的营养物质、激素和其他外界条细胞，在一定的营养物质、激素和其他外界条 件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完 整的植株。人工条件下实现的这一过程，就是整的植株。人工条件下实现的这一过程，就是 植物组织培养。植物组织培养。 19581958年年StewardSteward和和ReinertReinert用胡萝卜根的用胡萝卜根的 愈伤组织诱导成了体细胞胚，并进而获得了愈伤组织诱导成了体细胞胚，并进而获得了 完整植株。完整植株。 植物组织培养的发展简史 细胞的全能性细胞的全能性 (1)概念概念 1）受精卵）受精卵 生殖细胞生殖细胞体

4、细胞体细胞 ：生物体的：生物体的细细胞具有形成完整胞具有形成完整个个体的体的 潜能的特性，叫做潜能的特性，叫做细细胞的全能性。胞的全能性。 (2)原因原因 (3)全能性的比较全能性的比较 ：从理：从理论论上上讲讲，每个有核活，每个有核活细细胞都包含胞都包含 该该物种的全部物种的全部遗传遗传信息（全套信息（全套遗传遗传物物 质质），所以每个活），所以每个活细细胞都胞都应应具有全能具有全能 性性 。 。 2）植物细胞全能性一般比动物细胞强）植物细胞全能性一般比动物细胞强 (3)植物植物细胞表现出全能性的条件细胞表现出全能性的条件 离体状态离体状态 有一定营养物质、植物激素和其他外界有一定营养物质、

5、植物激素和其他外界 条件条件 思考讨论：为什么体内细胞没有表现出思考讨论：为什么体内细胞没有表现出 全能性，而是分化成为不同的组织、器官？全能性，而是分化成为不同的组织、器官？ 基因在特定空间和时间条件下选择性表达基因在特定空间和时间条件下选择性表达 的结果。在个体发育的不同时期，生物体不同的结果。在个体发育的不同时期，生物体不同 部位的细胞表达的基因是不同的，合成的蛋白部位的细胞表达的基因是不同的，合成的蛋白 质也不一样，从而形成了不同的组织和器官。质也不一样，从而形成了不同的组织和器官。 试 管 苗 大 规 模 培 养 （ 组 织 培 养 技 术 ） 外植体外植体 愈伤组织愈伤组织 根、芽

6、根、芽 植物体植物体 脱分化脱分化 再分化再分化 一、植物组织培养的过程一、植物组织培养的过程 （分化）（分化） （未分化）（未分化） （分化）（分化） 幼芽或幼根？幼芽或幼根？ 条条 件？件？ 优优 点？点？ 特点？特点？ 繁殖速度快繁殖速度快 不受季节限制不受季节限制 工厂化生产工厂化生产 幼苗无毒幼苗无毒 保持优良性状保持优良性状 适宜温度、适宜温度、 pH和和 无菌环境。无菌环境。 无机物、有机物无机物、有机物 和植物激素（和植物激素（生长生长 素，细胞分裂素素，细胞分裂素） 无定形状态无定形状态 薄壁细胞薄壁细胞 高度液泡化高度液泡化 排列疏松、无规则排列疏松、无规则 分化程度低分化

7、程度低 去分化较易去分化较易 植物组织培养的培养基植物组织培养的培养基 无机营养成分：水及矿质元素（无机盐）无机营养成分：水及矿质元素（无机盐） 有机营养成分有机营养成分 含含N N物质：包括维生素和氨基酸物质：包括维生素和氨基酸 碳源：碳源：2%2%5%5%的蔗糖的蔗糖 琼脂：起支持作用琼脂：起支持作用 相关激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素相关激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素 PHPH值：值：5.05.06.06.0 光照：前期不要，后期必要，有助细胞生长分化光照：前期不要，后期必要，有助细胞生长分化 植物组织培养 培养容器的培养基要高压蒸汽灭菌培养容器的培养基要高压蒸汽灭菌 外植体消毒接种

8、（根尖、茎、芽、嫩叶、种外植体消毒接种（根尖、茎、芽、嫩叶、种 子、花粉等）子、花粉等） 整个试验在超净工作台上进行，保持无菌！整个试验在超净工作台上进行，保持无菌！ 【实验实验 胡萝卜的组织培养讨论胡萝卜的组织培养讨论】 1.在组织培养实验中，为什么要强调所用器械的灭在组织培养实验中，为什么要强调所用器械的灭 菌和实验人员的无菌操作？菌和实验人员的无菌操作？ 提示：植物组织培养中用到的提示：植物组织培养中用到的培养基含有丰富培养基含有丰富 的营养成分，有利于外植体的生长，然而各种杂菌的营养成分，有利于外植体的生长，然而各种杂菌 同样也可以在上面迅速生长，同样也可以在上面迅速生长，所以植物组织

9、培养过所以植物组织培养过 程中污染现象经常发生。培养基一旦被污染，迅速程中污染现象经常发生。培养基一旦被污染，迅速 生长的生长的各种杂菌不但会和培养物争夺营养，而且这各种杂菌不但会和培养物争夺营养，而且这 些杂菌生长的过程中会生成大量对培养物有害的物些杂菌生长的过程中会生成大量对培养物有害的物 质，导致培养物迅速死亡。质，导致培养物迅速死亡。 造成培养基污染的因素有很多，一般包括：造成培养基污染的因素有很多，一般包括：外外 植体带菌、培养瓶和各种器械灭菌不彻底、操作人植体带菌、培养瓶和各种器械灭菌不彻底、操作人 员操作不规范等员操作不规范等。所以在组织培养实验中用到的植。所以在组织培养实验中用

10、到的植 物材料和各种器械都要进行彻底地灭菌，实验人员物材料和各种器械都要进行彻底地灭菌，实验人员 操作一定要规范，避免带入杂菌。操作一定要规范，避免带入杂菌。 2.在本实验中，切取胡萝卜块根时强调要切取含有在本实验中，切取胡萝卜块根时强调要切取含有 形成层部分，原因是这部分容易诱导形成愈伤组织。形成层部分，原因是这部分容易诱导形成愈伤组织。 请思考一下，胡萝卜的其他部分（如茎、叶），是请思考一下，胡萝卜的其他部分（如茎、叶），是 否也能培养成小植株，你能用实验的方法进行验证否也能培养成小植株，你能用实验的方法进行验证 吗？吗？ 提示：胡萝卜的其他部分（如茎、叶、花）也提示：胡萝卜的其他部分（如

11、茎、叶、花）也 能培养再生形成小植株，只是分化较大，诱导愈伤能培养再生形成小植株，只是分化较大，诱导愈伤 组织比较困难。组织比较困难。 （1）外植体：用于离体培养的植物器官或组织片）外植体：用于离体培养的植物器官或组织片 段。段。 （2）愈伤组织：细胞排列疏松而无规则，是一种）愈伤组织：细胞排列疏松而无规则，是一种 高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。 （3）胚状体：由愈伤组织分化出的与种子胚类似）胚状体：由愈伤组织分化出的与种子胚类似 的结构。的结构。 （4）脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细）脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细 胞产生愈伤组织的过

12、程。胞产生愈伤组织的过程。 （5）再分化：脱分化产生的愈伤组织重新分化成）再分化：脱分化产生的愈伤组织重新分化成 根或芽等器官的过程。根或芽等器官的过程。 植物体细胞杂交技术植物体细胞杂交技术 19721972年卡尔森等通过两个烟草品种之间年卡尔森等通过两个烟草品种之间 原生质体的融合，获得了第一个体细胞杂种。原生质体的融合，获得了第一个体细胞杂种。 19781978年梅尔彻斯年梅尔彻斯(Melchers)(Melchers)等首次获得等首次获得 了番茄和马铃薯的属间体细胞杂种了番茄和马铃薯的属间体细胞杂种 “PotamatoPotamato”。 目前，已得到栽培烟草与野生烟草、栽培目前，已得

13、到栽培烟草与野生烟草、栽培 大豆与野生大豆、籼稻与野生稻、籼稻与粳稻、大豆与野生大豆、籼稻与野生稻、籼稻与粳稻、 小麦与鹅冠草等细胞杂种及其后代，获得了有小麦与鹅冠草等细胞杂种及其后代，获得了有 价值的新品系或育种上有用的新材料。价值的新品系或育种上有用的新材料。 去壁去壁 去壁去壁 纤维素酶纤维素酶 果胶酶果胶酶 原原 生生 质质 体体 植物细胞植物细胞 原生质体融合原生质体融合 离心、离心、 振动、振动、 电刺激、电刺激、 聚乙二聚乙二 醇醇 再生细胞壁再生细胞壁 杂种细胞杂种细胞 去去 分分 化化 愈伤组织愈伤组织 杂种植株杂种植株 激素激素 筛选筛选 等量等量 激素激素 再分再分 化化

14、 植物体细胞杂交植物体细胞杂交 纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，形成原生纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，形成原生 质体。质体。 原理：酶的专一性、高效性原理：酶的专一性、高效性 （1）原生质体制备原生质体制备 （2）诱导原生质体融合）诱导原生质体融合 是关键环节是关键环节 根据的原理是根据的原理是:细胞膜的流动性细胞膜的流动性 方法方法:物理物理 离心、振动、电激离心、振动、电激 化学化学 聚乙二醇聚乙二醇(PEG)作诱导剂作诱导剂 成功标志是成功标志是: 杂种细胞产生了新的细胞杂种细胞产生了新的细胞 壁壁 （3）组织培养）组织培养 根据的原理是根据的原理是:细胞膜全能性细胞膜全能性 过程过程:脱分化

15、脱分化 再分化再分化 植物体细胞杂交技术流程重点理解以下内容植物体细胞杂交技术流程重点理解以下内容： 流程图中为了简化，仅画了一个马铃薯流程图中为了简化，仅画了一个马铃薯 的原生质体与一个番茄的原生质体之间的的原生质体与一个番茄的原生质体之间的 融合，可真正在实际操作过程中，是把许融合，可真正在实际操作过程中，是把许 多马铃薯的原生质体和许多番茄的原生质多马铃薯的原生质体和许多番茄的原生质 体放在一起，让它们自由融合体放在一起，让它们自由融合出现多种融出现多种融 合，必须从中筛选合，必须从中筛选出所需的杂种细胞。出所需的杂种细胞。 由于不同种的细胞其细胞膜的特点不一由于不同种的细胞其细胞膜的特

16、点不一 样，如不作任何处理，把它们放在一起，样，如不作任何处理，把它们放在一起， 让它们自然融合是不可能的，所以原生质让它们自然融合是不可能的，所以原生质 体间的融合必须要人工诱导。体间的融合必须要人工诱导。 （3）组织培养得到杂种植物）组织培养得到杂种植物 克服远源杂交克服远源杂交不亲和不亲和的障碍，培育出自的障碍，培育出自 然界中没有的、具有优良品质的新品种。然界中没有的、具有优良品质的新品种。 成果成果 1、植物体细胞融合完成的标志是（、植物体细胞融合完成的标志是（ ） A、产生新的细胞壁、产生新的细胞壁 B、细胞膜发生融合、细胞膜发生融合 C、细胞质发生融合、细胞质发生融合 D、细胞核

17、发生融合、细胞核发生融合 2、下列植物细胞的全能性在提供了适宜条件的情况下，最、下列植物细胞的全能性在提供了适宜条件的情况下，最 易表达的是（易表达的是（ ） A、枝条上的一个芽、枝条上的一个芽 B、柱头上的花粉、柱头上的花粉 C、胚珠中的珠被细胞、胚珠中的珠被细胞 D、根尖分生区细胞、根尖分生区细胞 A D 3、下面关于植物细胞工程的叙述，正确的是、下面关于植物细胞工程的叙述，正确的是( ) A. 叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞 B叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织 C. 融合植物叶肉细胞时，应先去掉细胞

18、膜融合植物叶肉细胞时，应先去掉细胞膜 D叶肉细胞离体培养时，可以表现出全能性叶肉细胞离体培养时，可以表现出全能性 AD 练习 5、以下不能说明细胞全能性的实验是（、以下不能说明细胞全能性的实验是（ ） A.胡萝卜韧皮部细胞培育出植株胡萝卜韧皮部细胞培育出植株 B.紫色糯性玉米种子培育出植株紫色糯性玉米种子培育出植株 C.转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株 D.番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株 B 4、将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的、将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的 是（是（ ） A、具有完整

19、细胞核的细胞、具有完整细胞核的细胞 B、一定的营养物质和植物激素、一定的营养物质和植物激素 C、离体状态、离体状态 D、导入指定基因导入指定基因 D 1.微型繁殖 (1)微型繁殖技术:快速繁殖优良品种的植物 组织培养技术. (2)特点: 保持优良品种的遗传特性; 高效快速地实现种苗的大量繁殖. 2.作物脱毒 (1)材料:无病毒的茎尖 (2)脱毒苗:切取茎尖进行组织培养获得 生姜是药食两用的经济作物，具生姜是药食两用的经济作物，具 有栽培容易、产量高、价格高等特点，有栽培容易、产量高、价格高等特点， 近年在各地发展很快。但是生姜在生近年在各地发展很快。但是生姜在生 产上长期采用无性繁殖，容易感染

20、多产上长期采用无性繁殖，容易感染多 种病毒病，使生姜品质变差，叶子皱种病毒病，使生姜品质变差，叶子皱 缩，生长缓慢，一般减产缩，生长缓慢，一般减产30%30%50%50%。 设计设计无毒生姜幼苗的培育方案。无毒生姜幼苗的培育方案。 请你设请你设 计计 3.神奇的人工种子 (1)特点: 后代无性状分离 不受气候,季节和地域限制 (2)技术:植物组织培养. (3)结构:人工薄膜胚状体或不定芽或顶芽或 腋芽. 1.单倍体育种 (1)方法:花药的离体培养 (2)优点: 后代稳定遗传,都是纯合体; 明显缩短育种年限. 2.突变体的利用突变体的利用 (1)产生产生:植物组织培养诱变，更易发生基因突变植物组

21、织培养诱变，更易发生基因突变 (2)利用利用:筛选对人们有利突变体筛选对人们有利突变体,进而培育新品种进而培育新品种 1.种类种类:蛋白质蛋白质,脂肪脂肪,糖类糖类,药物药物,香料香料,生物碱等生物碱等. 2.技术技术:植物的组织培养植物的组织培养. 动物细胞工程 一、动物细胞培养一、动物细胞培养 1 1、发展历史：、发展历史： 2020世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质 向外突出形成的，还是由神经细胞与周围的其他细胞融合而向外突出形成的，还是由神经细胞与周围的其他细胞融合而 成的。生物学家们就这个问题展开了激烈的争论。成的。生物学家们

22、就这个问题展开了激烈的争论。 19071907年，美国生物学家哈里森年，美国生物学家哈里森(Harrison)(Harrison)从蝌蚪的脊索从蝌蚪的脊索 中分离出中分离出神经组织神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。 蝌蚪的神经组织存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神蝌蚪的神经组织存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神 经纤维。哈里森的实验不仅解决了神经纤维的起源问题，而经纤维。哈里森的实验不仅解决了神经纤维的起源问题，而 且开创了动物组织培养的先河。此后，在许多科学家的不懈且开创了动物组织培养的先河。此后，在许多科学家的不懈 努力下，动物组织培养

23、不断改进并逐渐发展成为动物细胞培努力下，动物组织培养不断改进并逐渐发展成为动物细胞培 养。养。 2 2、动物细胞培养的应用和概念：、动物细胞培养的应用和概念： 动物细胞培养动物细胞培养 就是从动物有机体就是从动物有机体 中取出相关的组织中取出相关的组织, , 将它分散成单个细将它分散成单个细 胞胞, ,然后然后, ,放在适宜放在适宜 的培养基中的培养基中, ,让这让这 些细胞生长和增殖些细胞生长和增殖. . 动物细胞的培养过程动物细胞的培养过程 幼龄动物幼龄动物 取动物器官取动物器官 和组织和组织 剪碎组织剪碎组织 胰蛋白酶处理胰蛋白酶处理 细胞培细胞培养养 单个细胞单个细胞 动物细胞培养技术

24、：动物细胞培养技术：是其他动物细胞工程技术的基础是其他动物细胞工程技术的基础 原理：原理：细胞增殖（有丝分裂）细胞增殖（有丝分裂） 3、动物细胞培养过程：、动物细胞培养过程： 动物胚胎或幼龄动动物胚胎或幼龄动 物的组织、器官物的组织、器官 细胞悬浮液细胞悬浮液 胰蛋白酶胰蛋白酶 10代细胞代细胞 原代培养原代培养 50代细胞代细胞传代培养传代培养 细胞株细胞株 无限传代无限传代 细胞系细胞系 单个细胞单个细胞 加培养液加培养液 遗传物质遗传物质 未改变未改变 遗传物质遗传物质 已改变已改变 动物组织细胞间隙中动物组织细胞间隙中 含有一定量的弹性纤含有一定量的弹性纤 维等蛋白质，将细胞维等蛋白质

25、，将细胞 网络起来形成具有一网络起来形成具有一 定弹性和韧性的组织定弹性和韧性的组织 和器官。和器官。 （分解细胞）（分解细胞） 注意：注意： 1、选材、选材 2、胰蛋白酶、胰蛋白酶 3、分散单个细胞、分散单个细胞 4、贴壁生长、贴壁生长 5、接触抑制、接触抑制 6、原代培养、传代培养、原代培养、传代培养 7、培养液成分、培养液成分 有关概念有关概念: 原代培养：原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为从机体取出后立即培养的细胞为 原代细胞。初次培养称为原代细胞培养。原代细胞。初次培养称为原代细胞培养。 传代培养：传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配将原代细胞从培养瓶中取出，配 制成细胞悬浮液

26、，分装到两个或两个以上的制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的 培养瓶中继续培养，称为传代培养。培养瓶中继续培养，称为传代培养。 细胞株：细胞株：原代细胞一般传至原代细胞一般传至1010代左右细胞代左右细胞 生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存 活到活到40504050代，这种代，这种10-5010-50代的传代细胞为细胞代的传代细胞为细胞 株。株。 细胞系：细胞系：细胞株传代至细胞株传代至5050代后又出现细胞代后又出现细胞 生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的 改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这改

27、变，使其在培养条件下可以无限制传代，这 种种5050代以上的传代细胞为细胞系。代以上的传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传细胞系的遗传 物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制， 容易传代培养。容易传代培养。 3.3.动物细胞培养的条件动物细胞培养的条件: : 1.1.无菌无毒的环境无菌无毒的环境 2.2.营养营养 3.3.温度和温度和pHpH（36.5 7.2-7.436.5 7.2-7.4） 4.4.气体环境（气体环境（95%95%空气空气+5%+5%二氧化碳）二氧化碳） 4.4.动物细胞培养技术的应用动物细

28、胞培养技术的应用: : 1.1.蛋白质生物制品的生产蛋白质生物制品的生产 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体 2.2.健康细胞培养健康细胞培养 培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植 3.3.细胞的生理、药理、病理研究细胞的生理、药理、病理研究 植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养和动物细胞培养的比较 比较项目比较项目植物组织培养植物组织培养动物细胞培养动物细胞培养 原理原理细胞的全能性细胞的全能性细胞增殖细胞增殖 培养基性质培养基性质固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基 培养基特有成分培养基特有成分蔗糖蔗糖 植物激素植物激素葡萄

29、糖葡萄糖 动物血清动物血清 培养结果培养结果植物体植物体细胞株、细胞系细胞株、细胞系 培养目的培养目的快速繁殖、培育快速繁殖、培育 无病毒植株无病毒植株 获得细胞或细胞获得细胞或细胞 分泌蛋白分泌蛋白 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞动物核移植是将动物的一个细胞的细胞 核核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中. 使其重组并发育成一个新的胚胎使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的这个新的 胚胎最终发育为动物个体胚胎最终发育为动物个体. 核移植技术核移植技术 1.克隆羊培育过程克隆羊培育过程

30、黑面绵羊去黑面绵羊去 核卵细胞核卵细胞 白面绵羊乳白面绵羊乳 腺细胞核腺细胞核 核移植核移植 重组细胞重组细胞 电脉冲刺激电脉冲刺激 早期胚胎早期胚胎 胚胎移植胚胎移植 另一头绵羊的子宫另一头绵羊的子宫 妊娠、出生妊娠、出生 克隆羊多利克隆羊多利 注意：注意：卵母细胞培养至卵母细胞培养至M，才能用于去核构建，才能用于去核构建 重组细胞。重组细胞。 胚胎移植的受体牛要进行同期发情，使生理状况相同。胚胎移植的受体牛要进行同期发情，使生理状况相同。 2.体细胞核移植技术的应用前景体细胞核移植技术的应用前景 一、动物细胞融合一、动物细胞融合 细胞融合是正常的生命活动细胞融合是正常的生命活动 两个细胞正

31、在融合两个细胞正在融合 受精作用受精作用 动物动物 细胞细胞 融合融合 细胞细胞A细胞细胞B 杂种细胞杂种细胞 灭活的病毒灭活的病毒 物理法：电刺激物理法：电刺激 化学法：化学法：PEG 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核细胞核 病毒颗粒病毒颗粒 细胞核细胞核 因为灭活的病毒能结合细胞膜上，并使蛋白质分因为灭活的病毒能结合细胞膜上，并使蛋白质分 子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合， 不灭活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。不灭活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。 细胞融合技术应用于哪些方面？细

32、胞融合技术应用于哪些方面？ 细胞学、遗传学、免疫学及制备单克隆抗体。细胞学、遗传学、免疫学及制备单克隆抗体。 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合 原原理理细胞细胞膜的流动性膜的流动性、植、植 物细胞的全能性物细胞的全能性 细胞膜的流动性细胞膜的流动性 细胞融合的方细胞融合的方 法法 去除细胞壁后诱导原去除细胞壁后诱导原 生质体融合生质体融合 使细胞分散后诱使细胞分散后诱 导细胞融合导细胞融合 诱导方法诱导方法物理（离心、振荡、物理（离心、振荡、 电刺激）电刺激） 化学（聚乙二醇）化学（聚乙二

33、醇） 物理、化学方法物理、化学方法 （同左）（同左） 灭活的病毒灭活的病毒 用途用途获得杂种植株获得杂种植株制备单克隆抗体制备单克隆抗体 二、单克隆抗体二、单克隆抗体 什么是抗体？什么是抗体？ 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能 与该抗原发生特异性结合的具有免疫功与该抗原发生特异性结合的具有免疫功 能的球蛋白。能的球蛋白。 浆细胞产生抗体。浆细胞产生抗体。 B B淋巴细胞与抗体的关系：淋巴细胞与抗体的关系： B B淋巴细胞受抗原刺激后增殖分化淋巴细胞受抗原刺激后增殖分化 成浆细胞，可以产生相应的抗体。成浆细胞，可以产生相应的抗体。 动物体内的动物体内的B B淋巴细胞可以产生百淋巴细胞可以产生百 万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原 具有特异性免疫作用。具有特异性免疫作用。 每一个淋巴细胞只能产生一种抗每一个淋巴细胞只能产生一种抗 体，产生什么抗体要看遇到什么抗原。体，产生什么抗体要看遇到什么抗原。 传统的抗体的生产方法及缺陷是什么？传统的抗体的生产方法及缺陷是什么？ 怎样解决这个问题？怎样解决这个问题？ 单克隆抗体单克隆抗体 由接触过抗原的单个由接触过抗原的单个B B淋巴细胞经过淋巴细胞经过 无性繁殖（克隆），形成基因型相同的无性