第十一讲 蛋白质的测定

1、6. 蛋白质和氨基酸的测定 6.1 概述 6.2 凯氏定氮法 6.3氨基酸氮的测定 教学内容 n了解蛋白质和蛋白质系数、氨基酸和氨基了解蛋白质和蛋白质系数、氨基酸和氨基 酸态氮的概念，凯氏定氮法原理和方法，酸态氮的概念，凯氏定氮法原理和方法， 氨基酸和氨基酸态氮的测定原理；氨基酸和氨基酸态氮的测定原理； n掌握凯氏定氮法和双指示剂甲醛滴定法、掌握凯氏定氮法和双指示剂甲醛滴定法、 电位滴定法。电位滴定法。 自学引导题自学引导题 1、蛋白质系数是如何计算出来的？、蛋白质系数是如何计算出来的？ 2、蛋白质的测定方法有哪些？国家标准是哪、蛋白质的测定方法有哪些？国家标准是哪 一种方法？一种方法？ 6.

2、1 概述概述 (1)蛋白质的生理功能蛋白质的生理功能 (2)蛋白质含量的测定意义蛋白质含量的测定意义 (3)蛋白质的组成及性质蛋白质的组成及性质 (4)蛋白质的测定方法蛋白质的测定方法 (5)蛋白质系数蛋白质系数 l2004/4安徽阜安徽阜 阳劣质奶粉致阳劣质奶粉致 大头娃娃 171,13人死人死 l头脸胖大， 四肢细短，体 重比出生时还 轻 l205个奶粉品 46个不合格生 产厂家的55种 奶粉。分布8 个省，其中蛋 白质含量低于 5%的有31种 ，最少的仅为 0.37%， 蛋白质是生命的物质基础蛋白质是生命的物质基础 维持人体的酸碱平衡、水平衡维持人体的酸碱平衡、水平衡 遗传信息的传递遗传

3、信息的传递 物质的代谢及运转都与蛋白质有关。物质的代谢及运转都与蛋白质有关。 6.1 概述概述 (2)蛋白质含量的测定意义蛋白质含量的测定意义 人体重要的营养物质人体重要的营养物质, ,食品的营养指标。食品的营养指标。 合理开发利用食品资源合理开发利用食品资源、优化食品配方优化食品配方、指指 导经济核算及生产过程控制导经济核算及生产过程控制 、提高提高和监督和监督产产 品质量品质量。 蛋白质是复杂的含氮有机蛋白质是复杂的含氮有机化合化合物，分子量很大物，分子量很大。 组成：组成：2020种氨基酸通过酰胺键以一定的方式结合种氨基酸通过酰胺键以一定的方式结合 起来起来 化学元素：化学元素：C C、

4、H H、O O 、N N（P P、S S、CuCu、FeFe、I I）；）； 官能基团：肽键、氨基酸残基、酸碱基因、芳香官能基团：肽键、氨基酸残基、酸碱基因、芳香 基团基团 结论：结论：含氮则是蛋白质区别其他有机化合物的主含氮则是蛋白质区别其他有机化合物的主 要标志要标志。 (3)(3)蛋白质的组成及性质蛋白质的组成及性质 可分为两大类：可分为两大类： 一类是利用蛋白质的共性，如含氮、肽键、折射率一类是利用蛋白质的共性，如含氮、肽键、折射率 等等 ； 另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸性或碱另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸性或碱 性基团以及芳香基团等测定蛋白质含量。性基团以及芳香基团

5、等测定蛋白质含量。 目前目前蛋白质测定最常用的方法是凯氏定氮法蛋白质测定最常用的方法是凯氏定氮法，通过，通过 测总氮量来确定蛋白质含量。测总氮量来确定蛋白质含量。 (4)蛋白质的测定方法蛋白质的测定方法 蛋白质系数：每份氮素相当于的蛋白质的份蛋白质系数：每份氮素相当于的蛋白质的份 数。一般蛋白质含氮为数。一般蛋白质含氮为16%16%，所以，所以1 1份氮素相份氮素相 当于当于6.256.25份蛋白质。份蛋白质。此数值（此数值（6.256.25）称为蛋白）称为蛋白 质系数质系数，用，用F F表示。表示。 不同的蛋白质由于氨基酸的构成比例及方式不同的蛋白质由于氨基酸的构成比例及方式 不同，含氮量不

6、同。不同，含氮量不同。 不同种类不同种类的的食品的蛋白质系数有所不同食品的蛋白质系数有所不同。 (5)蛋白质系数蛋白质系数 n不同产品的蛋白质系数不同产品的蛋白质系数(F) 玉米、鸡蛋、青豆等：玉米、鸡蛋、青豆等：6.25 花生：花生：5.46 大米：大米：5.95 大豆及制品：大豆及制品：5.71 小麦：小麦：5.70 牛乳及制品：牛乳及制品：6.38 (1) 原理原理 样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白 质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出，质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出， 而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。而样品中

7、的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。 然后加碱蒸馏，使氨蒸出，用硼酸吸收后再以标然后加碱蒸馏，使氨蒸出，用硼酸吸收后再以标 准盐酸或硫酸溶液滴定。从消耗的标准酸计算出准盐酸或硫酸溶液滴定。从消耗的标准酸计算出 总氮量，再折算为粗蛋白含量。总氮量，再折算为粗蛋白含量。 1、通过学习觊氏定氮法的原理，我们可知道、通过学习觊氏定氮法的原理，我们可知道 操作分为哪几个大的步骤？操作分为哪几个大的步骤？ 2、加入、加入硫酸钾硫酸钾、硫酸铜的作用是什么？、硫酸铜的作用是什么？ 自学引导 1、消化消化 反应方程式如下：反应方程式如下： 使有机物脱水后被炭化为碳、使有机物脱水后被炭化为碳、 氢、氮。氢、氮。

8、将有机物炭化后的碳氧化将有机物炭化后的碳氧化 为二氧化碳，硫酸则被还原成二氧化硫：为二氧化碳，硫酸则被还原成二氧化硫： 2H2H2 2SOSO4 4 C C 2SO2SO2 2 2H2H2 2O O COCO2 2 在消化完全的样品溶液中加入浓氢氧在消化完全的样品溶液中加入浓氢氧 化钠使呈碱性，加热蒸馏，即可释放出氨化钠使呈碱性，加热蒸馏，即可释放出氨 气，反应方程式如下：气，反应方程式如下： 3、吸收、吸收 加热蒸馏所放出的氨，可用硼酸溶液进行吸收：加热蒸馏所放出的氨，可用硼酸溶液进行吸收： 2NH3 + 4H3BO3 (NH4)2 B4O7 + 5H2O 4、滴定、滴定 待吸收完全后，再用

9、盐酸标准溶液滴定：待吸收完全后，再用盐酸标准溶液滴定： (NH4)2 B4O7 + 2HCl + 5H2O 2NH4Cl + 4H3BO3 准确称取均匀的固体样品准确称取均匀的固体样品0.53g,或半固或半固 体样品体样品25g,或吸取溶液样品或吸取溶液样品1525ml。 小心移入干燥的凯氏烧瓶中小心移入干燥的凯氏烧瓶中(勿粘附在瓶壁勿粘附在瓶壁 上上)。加入。加入0.51g硫酸铜硫酸铜、10g硫酸钾及硫酸钾及 25ml浓硫酸，小心摇匀后，于瓶口置一小浓硫酸，小心摇匀后，于瓶口置一小 漏斗，瓶颈漏斗，瓶颈45角倾斜置电炉上，在通风角倾斜置电炉上，在通风 橱内加热消化橱内加热消化。 n若无通风橱

10、可于瓶口倒插入一口径适宜的若无通风橱可于瓶口倒插入一口径适宜的 干燥管，用胶管与水力真空管相连接，利干燥管，用胶管与水力真空管相连接，利 用水力抽除消化过程所产生的烟气。用水力抽除消化过程所产生的烟气。 n先以小火缓慢加热，待内容物完全炭化、先以小火缓慢加热，待内容物完全炭化、 泡沫消失后，加大火力消化至溶液呈蓝绿泡沫消失后，加大火力消化至溶液呈蓝绿 色。取下漏斗，继续加热色。取下漏斗，继续加热0.5h，冷却至室，冷却至室 温。温。 注意问题：注意问题： n加入样品不要沾附在凯氏烧瓶瓶颈；加入样品不要沾附在凯氏烧瓶瓶颈； n消化开始时不要用强火，要控制好热源，消化开始时不要用强火，要控制好热源

11、， 并注意不时转动凯氏烧瓶，以便利用冷凝并注意不时转动凯氏烧瓶，以便利用冷凝 酸液将附在瓶壁上的固体残渣洗下并促进酸液将附在瓶壁上的固体残渣洗下并促进 其消化完全；其消化完全； n样品中若含脂肪或糖较多，在消化前应样品中若含脂肪或糖较多，在消化前应 加入少量辛醇或液体石蜡或硅油作消泡剂，加入少量辛醇或液体石蜡或硅油作消泡剂， 以防消化过程中产生大量泡沫；以防消化过程中产生大量泡沫； n消化完全后要冷至室温才能稀释或定容。消化完全后要冷至室温才能稀释或定容。 所用试剂溶液应用无氨蒸馏水配制。所用试剂溶液应用无氨蒸馏水配制。 蒸馏蒸馏、吸收吸收 n按图装好蒸馏装置，按图装好蒸馏装置，冷凝管下端浸入

12、冷凝管下端浸入 接受瓶液面之下接受瓶液面之下（瓶内预先装有（瓶内预先装有50ml 40gL硼酸溶液及混合指示剂硼酸溶液及混合指示剂56滴）。滴）。 注意问题：注意问题： n安装的装置应整齐美观、协调，仪器各部安装的装置应整齐美观、协调，仪器各部 件应在同一平面内平行或垂直。件应在同一平面内平行或垂直。 n不能漏气。不能漏气。 n要注意控制热源要注意控制热源使蒸汽产生稳定使蒸汽产生稳定，不能时，不能时 猛时弱，以免吸收液倒吸；蒸馏前加碱量猛时弱，以免吸收液倒吸；蒸馏前加碱量 应使消化液呈深蓝色或产生黑色沉淀。应使消化液呈深蓝色或产生黑色沉淀。 n冷凝管下端先插入硼酸吸收液液面以下才冷凝管下端先插

13、入硼酸吸收液液面以下才 能蒸馏。能蒸馏。 3、滴定、滴定 n将接受瓶内的硼酸液用将接受瓶内的硼酸液用0.1mol/L盐酸盐酸 标准溶液滴定至终点。同时做一试剂标准溶液滴定至终点。同时做一试剂 空白（除不加样品，从消化开始操作空白（除不加样品，从消化开始操作 完全相同）。完全相同）。 注意问题：注意问题： n所用试剂溶液应用无氨蒸馏水配制。所用试剂溶液应用无氨蒸馏水配制。 （3）试剂 消化用：消化用： n浓硫酸浓硫酸 n硫酸钾硫酸钾 n硫酸铜硫酸铜 蒸馏用：蒸馏用： n40%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液 吸收用：吸收用： n4%硼酸硼酸 滴定用：滴定用： n0.1000mol/L HCl标准溶液标准

14、溶液 n0.1%甲基红乙醇溶液与甲基红乙醇溶液与0.1%溴甲酚绿乙溴甲酚绿乙 醇溶液混合指示剂醇溶液混合指示剂 硫酸钾硫酸钾的作用的作用 加入硫酸钾可以加入硫酸钾可以提高溶液的沸点提高溶液的沸点而加而加快快有有 机物的分解，它与硫酸作用生成硫酸氢钾可提机物的分解，它与硫酸作用生成硫酸氢钾可提 高反应温度其反应式如下：高反应温度其反应式如下： K2SO4+H2SO4=2KHSO4 2KHSO4=K2SO4+H2O+SO3 但硫酸钾加入量不能太大，否则消化体系但硫酸钾加入量不能太大，否则消化体系 温度过高，又会引起已生成的铵盐发生热分解温度过高，又会引起已生成的铵盐发生热分解 而造成损失：而造成损

15、失： （NH4）2SO4=NH3+(NH4)HSO4 2(NH4)HSO4=2NH3+2SO3+2H2O 硫酸铜的作用 催化作用、指示作用催化作用、指示作用（消化完全指示：蓝（消化完全指示：蓝 绿色；蒸馏时碱性反应完全指示：变深蓝绿色；蒸馏时碱性反应完全指示：变深蓝 色或产生黑色沉淀）色或产生黑色沉淀） 说明事项：说明事项： 蒸馏过程应注意接头处无蒸馏过程应注意接头处无松漏松漏现象，蒸现象，蒸 馏完毕，先将蒸馏出口离开液面，继续馏完毕，先将蒸馏出口离开液面，继续 蒸馏蒸馏1 1minmin，将附着在尖端的吸收液完全将附着在尖端的吸收液完全 洗入吸收瓶内，再将吸收瓶移开，最后洗入吸收瓶内，再将吸

16、收瓶移开，最后 关闭电源，关闭电源，绝绝不能先关闭电源，否则吸不能先关闭电源，否则吸 收液将发生倒吸。收液将发生倒吸。 微量凯氏定氮法微量凯氏定氮法 n微量凯氏定氮法的原理与操作方法，与常微量凯氏定氮法的原理与操作方法，与常 量法基本相同，所不同的是样品质量及试量法基本相同，所不同的是样品质量及试 剂用量较少，且有一套适于微量测定的定剂用量较少，且有一套适于微量测定的定 型仪器型仪器微量凯氏定氮器。微量凯氏定氮器。 6.3 氨基酸态氮的测定氨基酸态氮的测定 n为提高蛋白质的生理效价而进行食品氨基酸为提高蛋白质的生理效价而进行食品氨基酸 互补和强化的理论，对食品加工工艺的改革，互补和强化的理论，

17、对食品加工工艺的改革， 对保健食品的开发及合理配膳等工作都具有对保健食品的开发及合理配膳等工作都具有 积极的指导作用。因此，食品及其原料中氨积极的指导作用。因此，食品及其原料中氨 基酸的分离、鉴定和定量也就具有极其重要基酸的分离、鉴定和定量也就具有极其重要 的意义。的意义。 n 氨基酸的含量一直是某些发酵产品如氨基酸的含量一直是某些发酵产品如 调味品的质量指标，也是目前许多保健调味品的质量指标，也是目前许多保健 食品的质量指标之一，其中的含氮量可食品的质量指标之一，其中的含氮量可 直接测定，不同于蛋白质的氮，故称为直接测定，不同于蛋白质的氮，故称为 氨基酸态氮。氨基酸态氮。 n 氨基酸态氮反映

18、的是样品中游离氨基氨基酸态氮反映的是样品中游离氨基 酸的总量。酸的总量。 氨基酸态氮氨基酸态氮 的测定的测定 双指示剂甲醛滴定法双指示剂甲醛滴定法 电位电位滴定法滴定法 6.4.1 双指示剂甲醛滴定法双指示剂甲醛滴定法 (1) 原理原理 氨基酸具有酸性的氨基酸具有酸性的-COOH基和碱性的基和碱性的-NH2 基。它们相互作用而使氨基酸成为中性的基。它们相互作用而使氨基酸成为中性的 内盐。当加入甲醛溶液时，内盐。当加入甲醛溶液时，-NH2基与甲醛基与甲醛 结合，从而破坏内盐。这样就可以用强碱结合，从而破坏内盐。这样就可以用强碱 标准溶液来滴定标准溶液来滴定-COOH基，并用间接的方基，并用间接的

19、方 法测定氨基酸的总量。法测定氨基酸的总量。 （2）操作：）操作： n用中性红作指示剂，先测定其它游离用中性红作指示剂，先测定其它游离 酸的含量酸的含量 n再用百里酚酞作指示剂测定氨基酸和再用百里酚酞作指示剂测定氨基酸和 游离酸的总含量。游离酸的总含量。 （3）方法适用范围）方法适用范围 n浅色样品浅色样品 (4) 操作方法操作方法 移取含氨基酸约移取含氨基酸约2030mg的样品溶液的样品溶液2份，份， 分别置于分别置于250ml锥形瓶中，各加锥形瓶中，各加50ml 蒸馏水，其蒸馏水，其 中中1份加入份加入3滴中性红指示剂，用滴中性红指示剂，用0.1mol/L氢氧化氢氧化 钠标准溶液滴定至由红

20、色变为琥珀钠标准溶液滴定至由红色变为琥珀 色为终点；另色为终点；另1 份加入份加入3滴百里酚酞指示剂及中性甲醛滴百里酚酞指示剂及中性甲醛20ml，摇匀，摇匀， 静置静置1分钟，用分钟，用0.1ml/L氢氧化钠标准溶液滴定至氢氧化钠标准溶液滴定至 淡蓝色为终点。分别纪录两次所消耗的碱液淡蓝色为终点。分别纪录两次所消耗的碱液ml数。数。 式中式中 c 氢氧化钠标准溶液的浓度，氢氧化钠标准溶液的浓度，mol/L; V1用中性红作指示剂滴定时消耗氢氧化钠标用中性红作指示剂滴定时消耗氢氧化钠标 准溶液的体积，准溶液的体积，mL; V2用百里酚酞作指示剂滴定时消耗氢氧化钠用百里酚酞作指示剂滴定时消耗氢氧化

21、钠 标准溶液的体积，标准溶液的体积，mL; m测定用样品溶液相当于样品的质量，测定用样品溶液相当于样品的质量，g 0.014氮的毫摩尔质量，氮的毫摩尔质量，g/m mol (5) 结果计算结果计算 100 014. 0)( 12 m cVV 氨基酸态氮 （%） 6.4.2 电位滴定法电位滴定法 (1) 原理原理 根据氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基根据氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基 的碱性，使羧基显示出酸性，将酸度计的电极的碱性，使羧基显示出酸性，将酸度计的电极 插入被测液中，用氢氧化钠标准溶液滴定，依插入被测液中，用氢氧化钠标准溶液滴定，依 据酸度计指示的据酸度计指示的pH值判断和

22、控制滴定终点。值判断和控制滴定终点。 (2) 仪器仪器 酸度计（附磁力搅拦器）；酸度计（附磁力搅拦器）； (3) 试验步骤试验步骤 样品处理样品处理 n吸取样品液于吸取样品液于100mL容量瓶中容量瓶中,加水定容。加水定容。 吸取定容液吸取定容液20.00mL于于250mL烧杯中烧杯中,加加 水水60mL，放入磁力转子，开动磁力搅，放入磁力转子，开动磁力搅 拌器使转速适当。用标准缓冲液校正好拌器使转速适当。用标准缓冲液校正好 酸度计，然后将电极清洗干净，再插入酸度计，然后将电极清洗干净，再插入 到上述样品液中，用到上述样品液中，用NaOH标准溶液滴标准溶液滴 定至酸度计指示定至酸度计指示pH8

23、.2,记下消耗的记下消耗的 NaOH溶液体积。溶液体积。 氨基酸的滴定氨基酸的滴定 n在上述滴定至在上述滴定至pH8.2的溶液中加入的溶液中加入10.00mL 的中性甲醛溶液，再用的中性甲醛溶液，再用NaOH标准溶液滴定标准溶液滴定 至至pH9.2,记下消耗的记下消耗的NaOH溶液体积。溶液体积。 空白滴定空白滴定 n吸取吸取80mL蒸馏水于蒸馏水于250mL的烧杯中，用的烧杯中，用NaOH标标 准溶液滴定至准溶液滴定至pH8.2,然后加入然后加入10.00mL中性甲醛中性甲醛 溶液，再用溶液，再用NaOH标准溶液滴定至标准溶液滴定至pH9.2,记下加记下加 入甲醛后消耗的入甲醛后消耗的NaO

24、H溶液体积。溶液体积。 n操作说明：操作说明：第一次滴定是除去其它游离酸，所消第一次滴定是除去其它游离酸，所消 耗的耗的NaOH溶液体积不用于计算。溶液体积不用于计算。 第二步滴定才是测定氨基酸，用消耗第二步滴定才是测定氨基酸，用消耗 的的NaOH溶液体积进行计算。溶液体积进行计算。 （ V1 - V2 ） C 0.014 氨基酸态氮氨基酸态氮% = 100 m 20/100 V1 - 酱油稀释液在加入甲醛后滴定至酱油稀释液在加入甲醛后滴定至pH9.2所用所用NaOH标准溶液的体积标准溶液的体积 mL V2 - 空白滴定在加入甲醛后滴定至空白滴定在加入甲醛后滴定至pH9.2所用所用NaOH标准

25、溶液的体积标准溶液的体积 mL C - NaOH标准溶液的浓度标准溶液的浓度mol/L m - 吸取的酱油的质量吸取的酱油的质量g 0.014 - 氮的毫摩尔质量氮的毫摩尔质量g/m mol （4）结果计算 作业作业 n现抽取南宁酱油厂生产的塑料袋装铁鸟牌酱油现抽取南宁酱油厂生产的塑料袋装铁鸟牌酱油 1袋（规格袋（规格500mL）（生产日期）（生产日期20050520），要），要 求测定氨基酸态氮含量。求测定氨基酸态氮含量。 n某检验员按密度瓶法测定了该酱油的相对密某检验员按密度瓶法测定了该酱油的相对密 度为度为1.128，然后吸取酱油，然后吸取酱油5.00mL于于100mL容量容量 瓶中瓶中

26、,加水定容。加水定容。 n吸取定容液吸取定容液20.00mL于于250mL烧杯中烧杯中,加水加水 60mL，放入磁力转子，开动磁力搅拌器使转速，放入磁力转子，开动磁力搅拌器使转速 适当。用适当。用pH6.18的标准缓冲液校正好酸度计，然的标准缓冲液校正好酸度计，然 后将电极清洗干净，再插入到上述酱油液中，用后将电极清洗干净，再插入到上述酱油液中，用 0.0498 mol/L NaOH标准溶液滴定至酸度计指标准溶液滴定至酸度计指 示示pH8.2,消耗的消耗的NaOH溶液体积为溶液体积为2.21mL。 n在上述滴定至在上述滴定至pH8.2的溶液中加入的溶液中加入10.00mL 的中性甲醛溶液，再用

27、的中性甲醛溶液，再用NaOH标准溶液滴定至标准溶液滴定至 pH9.2,消耗的消耗的NaOH溶液体积为溶液体积为9.12mL。 n吸取吸取80mL蒸馏水于蒸馏水于250mL的烧杯中，用的烧杯中，用NaOH标标 准溶液滴定至准溶液滴定至pH8.2,然后加入然后加入10.00mL中性甲醛中性甲醛 溶液，再用溶液，再用NaOH标准溶液滴定至标准溶液滴定至pH9.2,加入甲加入甲 醛后消耗的醛后消耗的NaOH溶液体积为溶液体积为1.36mL。 n1、请问在测定过程中为什么要加入中性甲、请问在测定过程中为什么要加入中性甲 醛？醛？ n2、计算该次氨基酸态氮含量测定结果。、计算该次氨基酸态氮含量测定结果。

28、n3、该检验员按同样的方法另作了、该检验员按同样的方法另作了4次测定，次测定， 结果分别为结果分别为0.49%,0.36%,0.50%,0.52%，请你写，请你写 一份完整的检验评价报告。一份完整的检验评价报告。 n相关知识点回顾：相关知识点回顾： 一、可疑值的取舍一、可疑值的取舍 Q检验法：检验法： n 当测定次数较少时当测定次数较少时,Q检验法是一种常用检验法是一种常用 n 的简便方法。该法是将测定值按大小顺的简便方法。该法是将测定值按大小顺 n 序排列序排列,由可疑值与其相邻值之差的绝对由可疑值与其相邻值之差的绝对 n 值除以极差值除以极差,求得求得Q值。值。 最小最大 邻疑 XX XX

29、 Q n Q值愈大值愈大,表明可疑值离群愈远表明可疑值离群愈远,当当Q 值超过一定界限时应舍去可疑值。下值超过一定界限时应舍去可疑值。下 表为不同置信度时的表为不同置信度时的Q值。当计算值大值。当计算值大 于或等于表中值时于或等于表中值时,该可疑值应舍去该可疑值应舍去,否否 则应予保留。则应予保留。 n 例如例如,平行测定盐酸浓度平行测定盐酸浓度(mol/L),结果为结果为 0.1014, 0.1021, 0.1016, 0.1013。试问。试问 0.1021在置信度为在置信度为90%时是否应舍去。时是否应舍去。 63. 0 1013. 01021. 0 1016. 01021. 0 Q n

30、查表查表,当当n=4,Q0.90=0.76。因。因QQ0.90,故故 0.1021不能舍去。不能舍去。 n当测定次数在当测定次数在3-10次之间时，最好用次之间时，最好用Q检检 验法。验法。 n二、对方法相对标准偏差的要求，一般主要取二、对方法相对标准偏差的要求，一般主要取 决于被测对象的含量，含量越高要求相对标准决于被测对象的含量，含量越高要求相对标准 偏差越低，例如，大于偏差越低，例如，大于10%的含量相对标准偏的含量相对标准偏 差一般不大于差一般不大于1%，随着含量的降低，相对标，随着含量的降低，相对标 准偏差可逐步增加，准偏差可逐步增加，5%，10%，20%，30% 甚至甚至50%。生

31、产工艺有特殊要求的，由技术条。生产工艺有特殊要求的，由技术条 件决定。件决定。 n f d n d n xx S n i i n i i n i i 1 2 1 2 1 2 11 ）（ ）标准偏差（ % x S CV100）相对标准偏差（ 习题讲解：习题讲解： 解：解：1、加入中性甲醛是为了固定氨基酸中的、加入中性甲醛是为了固定氨基酸中的 氨基，使羧基显示出酸性，才能进行氨基氨基，使羧基显示出酸性，才能进行氨基 酸测定。酸测定。 2、依据题意，酱油的相对密度、依据题意，酱油的相对密度d420=1.128, 取样体积取样体积V5.00 mL 酱油的质量酱油的质量md420V1.1285.00 5.64g n酱油稀释液在加入甲醛后滴定至酱油稀释液在加入甲醛后滴定至pH9.2所用所用 NaOH标准溶液的体积标准溶液的体积V19.12mL n空白滴定在加入甲醛后滴定至空白滴定在加入甲醛后滴定至pH9.2所用所用 NaOH标准溶液的体