化验室色谱系统数据积分处理管理规程剖析

1、目的：制定化验室气相色谱、高效液相色谱及质谱软件正确的积分方法，确保检测数据 的准确性、完整性和可追溯性。范围：适用于化验室气相色谱、高效液相色谱及质谱的所有积分。责任人：QC、QA内容：1.0化验室色谱系统数据处理积分的定义及分类1.1定义积分是指色谱软件定量测定峰面积或峰高的过程。1.2分类1.2.1自动积分自动积分是指采用色谱软件内置的积分事件设置积分参数进行积分。1.2.2手动积分手动积分是指采用手动积分工具进行积分。2.0色谱系统数据处理积分的基本概念和术语2.1色谱图(chromatogram)样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号-时间曲线，又称色谱流出曲线(elutionprof

2、ile)。2.2基线(baseline经流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流 出曲线。一般应平行于时间轴。2.3噪音(noise)基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、 流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。2.4漂移(drift)基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及 流量的不稳定所引起，柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。2.5色谱峰(peak)组分流经检测器时响应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起 部分。正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线(高斯Gauss曲线)。不对称色谱峰有两种：2.6 前延峰(leadingp

3、eak和拖尾峰(tailingpeak)。前者少见。2.7峰底一基线上峰的起点至终点的距离。2.8峰高(peakheight, h)峰的最高点至峰底的距离。2.9峰宽(peakwidth, W)峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。W=4r2.10半峰宽(peakwidthathalf-height, Wh/2)峰高一半处的峰宽。2.11峰面积(peakarea A)峰与峰底所包围的面积。2.12保留时间(retentiontime, tR)从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值的时 间。2.13理论塔板数(theoreticalplatenumbe，N)用于定量表示色谱柱的分离

4、效率(简称柱效)。2.14分离度(resolution, R)相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率，表示相邻两峰的分离程度。R 1.5称为完全分离。2.15拖尾因子(tailingfactor, T)T=，用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子(symmetryfactor)或不对称因子(asymmetryfactor)。2.16斜率(slope)又叫峰检测灵敏度、阈值，它是用来认识峰的参数。3.0色谱系统积分管理3.1色谱系统图谱积分原则：3.1.1原则1:色谱数据采集色谱图谱的积分首要原则为使用积分事件完成数据处理。3.1.2原则2:采用内标与外标计算时，对照与供试品的阈值(

5、斜率)与峰宽必须保持一 致。3.1.3原则3:同一序列或同时(非同一序列连续进样)采集的色谱图谱属于同一检测项 目的使用相同的积分事件进行处理；同一序列或同时(非同一序列连续进样)采集的色谱图 属于不同检测项目的可以按照项目使用相同积分事件进行处理，如结合雌激素含量与游离甾 体。3.1.4原则4:色谱系统软件采用既定的积分事件积分不正确时，需要采用手动积分工具 方式处理色谱图谱，即手动积分，或个别图谱增加使用了积分事件部分功能，需申请手动 积分申请表(SMP-QMP-298现行版-PF01)及填写手动积分台帐(SMP-QMP-298现行版 -PF02),经批准后由具有手动积分权限人员执行。4.

6、0色谱系统手动积分管理4.1手动积分原因分类4.1.1低分离度或低响应。4.1.2流动相不稳定，基线紊乱，保留时间变化小。4.1.3色谱柱性能：运行过程中，出现异常峰。4.1.4软件积分的局限性，如由于软件参数阈值的设置导致峰未积分，峰起点和终点间出 现肩峰和异常的基线漂移，软件错误（峰未积分和错误识别峰）。4.1.5由于样品母体的干扰导致的复杂色谱图：裂峰、目标杂质的同时洗脱/肩峰、基线噪音、负峰、基线上升或下降（由于某些梯度程序）、峰的严重拖尾或峰前延等导致自动积分 不正确。4.2手动积分举例4.2.1分裂峰，如图4-1;自动积分手动积分图4-1AuEDinaKiL! IfibeiZira

7、liQn自动积分r4.2.2主峰与肩峰重复积分，如图4-2；手动积分图4-24.2.3基线紊乱，如图4-3;自动积分手动积分图4-3Automatic Integration4.2.4负峰，如图4-4;自动积分_JVManual Integration手动积分图4-44.2.5峰上升或下降，如图4-5;lrr-|a71Kjn自动积分手动积分图4-54.2.6峰拖尾严重，如图4-6;Aulomitic inT*girtioriMnnLinl Initc-gr-nli口n自动积分手动积分图4-64.3手动积分流程及操作：检验员在处理某产品检验批次数据时，需要进行手动积分时，先报告仪器组组长，经组长

8、核对后再决定是否需要进行手动积分。如果不需要手动积分，就照自动积分方法进行数据 处理；如果需要手动积分，检验人员填写手动积分申请表（SMP-QMP-298现行版-PF01）及检验人员填写手动积分登记表（SMP-QMP-298现行版-PF02）及，经QC主管审核批准 后，由仪器组长完成手动积分操作，再提交与 QC主管进行审核，最后由现场 QA进行审核。QC分析员报告QC组长复核自动积分手动积分申请QC主管批准QC组长积分现场QA确认queen归档4.4手动积分方法：4.4.1放大图谱，辨别是否是基线噪音。4.4.2检验员必须以正确的方式进行手动积分。将峰的面积去掉峰消除”添加 峰扩大和改变峰高的手动积分都不符合标准。4.5手动积分的注意事项4.5.1手动积分后不能试图通过以下动作来使数据符合标准要求：减少峰（减少峰面积）；增加峰（增加峰面积）；改变峰高。如图4-7自动积分手