03第三章 药物的杂质检查

1、第三章 药物的杂质检查 Test for purity 第三章 药物的杂质检查 Test for purity 概 述 一般杂质检查 特殊杂质检查 有效性有效性针对某些药效进行检查的项目 如Al(OH)3的制酸力，反映主要质量； 明胶的凝冻度，控制物理性能； 利福平的结晶度，影响生物利用度 均一性均一性含量均一性 如“含量均匀度”试验 一、 概 述 安全性安全性 进行异常毒性、热原、降压物质 和无菌等项目 纯度要求纯度要求 对杂质限量进行检查 化学试剂与药物制剂纯度的区别？ 一、 概 述 OCH3HCl N CH3 O O N CH3 OCH3HCl OCH3HCl O N C2H5 例：纯度

2、要求例：纯度要求 Pethidine Hydrochloride 盐酸哌替啶盐酸哌替啶 无效异构体I 无效异构体 II 二、杂质来源与种类二、杂质来源与种类 source and sorts of impurities (C6H10O5)x +H 2O H+ (C6H10O5)y C12H22O11 2C6H12O6 H2O, H+ 淀粉糊精麦芽糖 葡萄糖 1. 制备过程中产生制备过程中产生 酸度：水解试剂带入 乙醇中不溶物：水解中间体(糊精) SO32-：产品用H2SO3漂白 可溶性淀粉：水解不完全 2.2.贮藏过程中产生贮藏过程中产生 外界条件影响：日光、空气、温度、湿度、外界条件影响：日

3、光、空气、温度、湿度、 微生物等引起药物产生微生物等引起药物产生 例如：例如： 麻醉乙醚麻醉乙醚 醛及有毒的醛及有毒的 过氧化物过氧化物 O (1)一般杂质： 在多种药物中普遍存在的杂质。 (Cl- SO42- Pb As Fe) 有害杂质 ( Pb As ) 信号杂质 （Cl- SO42-）：考察生产工艺， 反映药物的纯度水平 (2)特殊杂质： 个别药物的生产及贮藏中引入的杂质。 杂质的种类 杂质的限量：药物中所含杂质的最大允许量。 限量表示(g/g) ：百分之几（%） 百万分之几（10-6） 限量检查： 检查所含杂质是否超过杂质限量的规定， 通常不要求测定其准确含量。 3 3、杂质的限量检

4、查、杂质的限量检查（limit test） 杂质限量检查方法杂质限量检查方法 取取一定量一定量 (CV) 与被检杂质相同的纯品或对照品与被检杂质相同的纯品或对照品 配成对照品溶液，与配成对照品溶液，与一定量一定量(S)药物供试溶液在相同条药物供试溶液在相同条 件下处理后，比较反应结果，以确定杂质含量是否超件下处理后，比较反应结果，以确定杂质含量是否超 过规定。过规定。 NaCl对照液对照液葡萄糖葡萄糖 稀硝酸稀硝酸10ml 硝酸银硝酸银1ml 稀硝酸稀硝酸10ml 硝酸银硝酸银1ml 对照液浊度对照液浊度 供试液浊度供试液浊度 杂质限量的计算：杂质限量的计算： 式中：式中： L 杂质的限度（杂

5、质的限度（%） C 对照液浓度对照液浓度 （ g/ml） V 对照液的加入体积（对照液的加入体积（ml) S 供试品的量供试品的量(g) 注意注意: 单位统一单位统一 = 杂质最大允许量 杂质限量 供试品量 杂质对照液浓度 其体积 供试品量 100% C V L S 例例 1 ： 对乙酰氨基酚中氯化物的检查： 样 2.0g 溶于100ml水中，取25ml检查Cl-，与标准 NaCl溶液(10g/ml) 5ml对照液相比，不得更深。 C= 10g/ml V=5.0ml S= 25 2.0 100=0.5g 6 10 5.0 10 100%0.01% 0.5 L 第二节第二节 一般杂质检查方法一般

6、杂质检查方法 条件：硝酸酸性条件（稀硝酸10ml） 反应试剂：硝酸银试液 1.0ml 杂质对照：NaCl (10g/ml) 灵敏度范围： 5080 g / 50ml 讨论：选择稀硝酸反应条件的意义。 白色浑浊药物：AgClAgNOCl 3 HNO 3 一一 、氯化物（、氯化物（Chloride ）检查）检查 原理：原理： 白色浑浊）（对照：AgClAgNO,NaCl 3 HNO 3 Vc 比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。 平行操作原则。 3. 若供试品有色，需经处理后方可检查。 注注 意：意： ）干扰及排除 （1）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查， 可先加乙醇适量，使其还原褪色后再

7、依法检查。 （2）内消色法：倍量法 供试品有色处理方法供试品有色处理方法 内消色法内消色法：中国药典附录规定方法。：中国药典附录规定方法。 供试品供试品 + AgNO3 放置放置10min 澄清溶液澄清溶液 +标准标准NaCl +水水 对照溶液对照溶液 供试品供试品 + AgNO3 +水水 供试品溶液供试品溶液 暗处放置暗处放置 5min后比后比 较较 二二 、重金属、重金属（Heavy Metals ）的检查的检查 1、第一法 硫代乙酰胺法 适用对象：溶于水、稀酸和乙醇的药物 原 理： Pb2+ + 醋酸盐缓冲液 + 硫代乙酰胺(CH3CSNH2) PbS (黄棕黑) 条件： 介质：醋酸盐缓

8、冲液 (pH 3.5) 2ml 试剂：硫代乙酰胺 (CH3CSNH2) 2ml 杂质对照液： PbNO3 (10g/ml) 灵敏度范围： 1020 g / 27ml 葡萄糖中重金属的检查：样4.0g溶于23ml水，加入2ml缓 冲盐，依法检查，其重金属不得超过 百万分之五，取标 准铅（ 10g/ml），v=? C= 10g/ml L= 5 10-6 S=4.0g 6 6 1010 510 4.0 V V = 2.0 ml 例例 2 2： 注意：供试品如有色，需经处理后方可检查。注意：供试品如有色，需经处理后方可检查。 1. 外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他 无干扰的有色溶液。 2. 内消

9、色法。 3. 改用第四法，微孔滤膜过滤法。 第二法：第二法：含芳环或杂环的有机药物 如苯佐卡因、甲硝唑 第三法第三法: 溶于碱的药物或在稀酸产生 沉淀的药物 如磺胺类、巴比妥类 第四法：第四法： 铅斑法 C 垫圈垫圈(外径外径10mm,内径内径6mm) D 滤膜滤膜(直径直径10mm,孔径孔径3.0m) E 辅助滤板辅助滤板 C D A B F E 滤器下部 滤器上盖 连接头 微孔滤膜过滤法检查重金属装置微孔滤膜过滤法检查重金属装置 三、砷三、砷 盐盐 (arsenic) 第一法 古蔡氏法 Gutzeit 第二法 Ag-DDC法 白田道夫法 Bettendorff 国内外常用方法： 古古 蔡蔡

10、 氏氏 法法 ： SbH3+HgBr2SbH2(HgBr)+HBr 锑斑 - - 3 4 32 3 3 3 AsO AsHHOAs As 砷斑 2 HgBr 棕黄 Ag 吡啶 DDCAg- 红色胶态 Zn+HCl 白田道夫法白田道夫法 AsAs 2 SnCl3 HCl 检检 查查 砷砷 盐盐 仪仪 器器 装装 置置 8cm 18cm 有孔玻璃旋塞有孔玻璃旋塞 导气管导气管 AsH3发生瓶发生瓶 二乙基二硫代氨基甲酸银法 Ag-diethyldithiocarbamate Ag-DDC法 C2H5 C2H5 NC S S Ag 四、干燥失重四、干燥失重 （ loss on drying） 恒温干

11、燥恒温干燥 干燥剂干燥干燥剂干燥 减压干燥减压干燥 热分析法热分析法 thermal analysis,TA 干燥失重物主要指水分干燥失重物主要指水分 (结晶水或吸附水结晶水或吸附水) 或挥发性物质或挥发性物质 在程序控制温度下,测量物质的质量 与温度关系的方法 热重分析法热重分析法 thermal gravimetric analysis,TGA : 差示热分析法差示热分析法 在程序控制温度下在程序控制温度下, ,测定供试品与测定供试品与 参比物质之间的温差参比物质之间的温差(T)(T)随温随温 度变化的函数关系度变化的函数关系 differential thermal analysis,D

12、TA: 草酸钙草酸钙(CaC(CaC2 2O O4 4HH2 2O)O)的热重曲线的热重曲线 G1 G2 G3 10008006004002000 W T1 T2 T3 398 838 635 478 134 226 T() 在温度在温度T1时时 CaC2O4H2O CaC2O4+H2O 在温度在温度T2时时 CaC2O4 CaCO3+CO 在温度在温度T3时时 CaCO3 CaO+CO2 样品样品 参比参比 加热炉加热炉 至信号至信号 放大器放大器 加热器加热器 导线导线 炉温炉温 控制器控制器 热差曲线的直线热差曲线的直线 吸热峰吸热峰 放热峰放热峰 T() T 热差曲线示意图热差曲线示意

13、图 差示热分析仪主要结构简图差示热分析仪主要结构简图 盐酸多巴酚丁胺的DTA-TGA曲线 100 90 80 70 60 DTA T(/min) 196 233 15/min Program 1、纯双氯青霉素转变成液态并降解、纯双氯青霉素转变成液态并降解 2、加入乳糖、加入乳糖 3、加入硬脂酸镁、加入硬脂酸镁 4、加入硬脂酸，主成分峰消失、加入硬脂酸，主成分峰消失 5、单加入硬脂酸，主峰亦消失、单加入硬脂酸，主峰亦消失 0100200 T 1 2 3 4 5 DTA扫描图扫描图 甲磺酸二氢麦角毒碱的DSC-TGA曲线 50100150200 DSC TGA t(min) T 不纯物质的DSC图

14、 不同纯度苯甲酸的DSC曲线 温度温度 97.2% 98.6% 标准品标准品 温度温度() 50 80 110 140 170 200 230 260 290 15.00 0.00 7.50 盐酸舍曲林晶型盐酸舍曲林晶型的的DSCDSC曲线曲线 mcal/sec 温度温度() 50 80 110 140 170 200 230 260 290 5.00 0.00 2.50 mcal/sec 盐酸舍曲林晶型盐酸舍曲林晶型的的DSCDSC曲线曲线 有机溶剂残留量有机溶剂残留量测定法测定法 有机溶剂 限度,% 限度,% 苯苯 0.01 0.0002 氯仿氯仿 0.005 0.006 二氧六环二氧六环

15、 0.01 0.038 二氯甲烷二氯甲烷 0.01 0.06 吡啶吡啶 0.01 0.02 甲苯甲苯 0.01 0.089 环氧乙烷环氧乙烷 0.001 0.001 Ch.P(95) Ch.P(2000) 六、有机溶剂残留量测定 色谱系统与系统适用性试验色谱系统与系统适用性试验 System Suitability Tests; SSTs 以直径为以直径为0.250.18mm的二乙烯苯的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高乙基乙烯苯型高 分子多孔小球作为固定相，柱温为分子多孔小球作为固定相，柱温为80170；并；并符符 合下列条件合下列条件： 用待测物的色谱峰计算的用待测物的色谱峰计算的N应大于应大于10

16、00； 内标物与待测物的两个色谱峰的内标物与待测物的两个色谱峰的R1.5； 每个标准溶液进样每个标准溶液进样5次，所得待测物与内标物峰次，所得待测物与内标物峰 面积之比的面积之比的RSD5%； 若以若以外标法外标法测定，所得待测物峰面积的测定，所得待测物峰面积的RSD10% 嗅味及挥发性的差异 颜色的差异 溶解行为的差异 旋光性质的差异 吸附或分配性质的差异 对光选择吸收性质的差异 第三节 特殊杂质检查 物理性质上差异：物理性质上差异： 酸、碱性质的差异 氧化还原性的差异 杂质与一定试剂产生沉淀 杂质与一定试剂产生颜色反应 杂质与一定试剂反应产生气体 化学性质上差异：化学性质上差异： 旋光性质

17、旋光性质的差异的差异 Ch.P规定黄体酮在乙醇中的比旋度为：186198 黄体酮及其中间体的比旋度（溶剂：乙醇） 化合物化合物 浓度浓度% 温度温度 D 黄体酮 11.4 2025 +1934 醋酸双烯醇酮 0.9 20 -312 醋酸妊娠烯醇酮 1 常温 +202 220 260 300 nm 肾上腺酮及肾上腺素的紫外吸收曲线 HO HO O CCH2NHCH3 HO HO OH CHCH2NHCH3 max310nm 吸附或分配性质的差异吸附或分配性质的差异 薄层色谱法薄层色谱法 TLCTLC 一般要求：一般要求： 颗粒直径颗粒直径1040m 薄层涂布：无粘合剂薄层涂布：无粘合剂 含粘合剂

18、：常加入含粘合剂：常加入 1015% 煅石膏煅石膏 (CaSO42H2O,180烘烘4h) 或或0.50.7%羧甲基纤维素钠水溶液羧甲基纤维素钠水溶液 原点至溶剂前沿的距离 原点至斑点中心的距离 f R 比移值比移值 常常 用用 方方 法：法： 杂质对照品法杂质对照品法 供试品自身对照法供试品自身对照法 对照药物法对照药物法 供试品供试品10l N-甲基哌嗪甲基哌嗪10l 50mg/ml 50g/ml 枸橼酸乙胺嗪枸橼酸乙胺嗪 I2蒸气显色蒸气显色 N N CH3 CON C2H5 C2H5 规定规定： 如显杂质斑点，不如显杂质斑点，不 得多于得多于2个，其颜色个，其颜色 与对照品主斑点相与对照品主斑点相 比较，不得更深。比较，不得更深。 地塞米松磷酸钠地塞米松磷酸钠 地塞米松地塞米松 20mg/ml 0.20mg/ml 如有如有12个杂质点超过个杂质点超过 时，应不得深于时，应不得深于0.01% 对照液的主斑点。对照液的主斑点。 其中有其中有1个杂质点应不个杂质点应不 深于深于0.002%供试品的供试品的 主斑点。主斑点。 氨苯砜中检查氨苯砜中检查“有关有关 物质物质”规定规定： 0.01%供试品供试品 100g/ml 1%供试品供试品 10mg/ml 0.002%供