高中生物 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养试题 新人教版选修1(2021年最新整理)_第1页
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文档简介

1、2016-2017学年高中生物 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养试题 新人教版选修12016-2017学年高中生物 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养试题 新人教版选修1 编辑整理:尊敬的读者朋友们:这里是精品文档编辑中心,本文档内容是由我和我的同事精心编辑整理后发布的,发布之前我们对文中内容进行仔细校对,但是难免会有疏漏的地方,但是任然希望(2016-2017学年高中生物 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养试题 新人教版选修1)的内容能够给您的工作和学习带来便利。同时也真诚的希望收到您的建议和反馈,这将是我们进步的源泉,前进的动力

2、。本文可编辑可修改,如果觉得对您有帮助请收藏以便随时查阅,最后祝您生活愉快 业绩进步,以下为2016-2017学年高中生物 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养试题 新人教版选修1的全部内容。21专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养1培养基(1)概念:人们按照微生物对_的不同需求,配制出供其_的营养基质.(2)培养基的种类(3)成分:a主要成分:水、_、氮源、_.b其他成分:还需要满足微生物对_、特殊营养物质以及_的要求。c请连线表示牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成:牛肉膏a碳源、氮源和维生素蛋白胨b碳源、氮源、磷酸盐和维生素naclc氢元素和氧元素h2od无机盐

3、d请连线完成其他培养基的特殊要求:培养乳酸杆菌a将ph调至酸性培养霉菌bph调至中性或微碱性培养细菌c培养基中添加维生素培养厌氧微生物d需提供无氧条件2无菌技术(1)目的:获得_培养物。(2)关键:防止_的入侵。(3)两种无菌技术的比较:比较项目消毒灭菌作用强度_的理化因素_的理化因素作用程度杀死物体表面或内部的_微生物杀死物体表面或内部的_微生物芽孢和孢子一般不能杀灭能杀灭适用对象操作空间、活体生物材料、操作者衣着和双手操作工具、玻璃器皿、培养基等常用方法_消毒法、_消毒法、_消毒法、_消毒法_法、_灭菌法、_灭菌法3制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算:根据培养基_的比例,计算培养基中各成分的用

4、量称量:牛肉膏比较_,可放在_上称取.易吸潮,称取时动作要迅速,称后要及时盖上瓶盖溶化:牛肉膏和称量纸+水取出称量纸加蛋白胨和氯化钠加_(注意:要不断用玻棒搅拌,防止琼脂糊底而导致烧杯破裂)补加蒸馏水至100 ml灭菌:对培养基进行_灭菌倒平板:待培养基冷却至50c左右时,在_附近倒平板4平板划线法纯化大肠杆菌:(1)原理:通过_在琼脂固体培养基表面连续_的操作,将聚集的菌种逐步稀释_到培养基的表面。(2)操作步骤:5稀释涂布平板法纯化大肠杆菌:(1)原理:将菌液进行一系列的_,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。(2)涂布平板操作步骤:涂布器消毒:将涂布器浸在盛有

5、_的烧杯中消毒取菌液:取少量菌液(不超过0 1ml),滴加到_表面涂布器灭菌:将沾有少量酒精的涂布器_,待酒精燃尽后,冷却810 s涂布平板:用涂布器将菌液均匀地_在培养基表面。涂布时可转动培养皿,使菌液分布均匀6菌种保藏比较项目临时保藏甘油管藏适用范围_的菌种_的菌种培养基_培养基_培养基保藏温度4c-20c具体方法接种到固体斜面培养基上适宜温度下培养4c冰箱中保藏甘油瓶中装入甘油后灭菌将菌液转移至甘油瓶中混匀后冷冻箱中保存【课前小测】1判断正误:培养基分装到培养皿后进行灭菌.2判断正误:从有机废水中分离分解有机物的微生物时,接种后的培养皿需要放在光照培养箱中培养。3判断正误:培养基中只要含

6、有水、碳源、氮源和无机盐四种成分就能满足各种微生物的需要。4判断正误:无菌技术只是为了防止杂菌感染培养物。5判断正误:平板划线操作中,接种结束后灼烧接种环的目的是杀死接种环上原有的微生物。1(1)营养物质 生长繁殖(2)液体 凝固剂 固体(3)a碳源 无机盐 bph 氧气 cb -a -d cd-c a b -d2(1)纯净 (2)外来杂菌 (3)温和 强烈 部分 所有 煮沸 巴氏 化学药剂 紫外线 灼烧灭菌 干热 高压蒸汽3配方 黏稠 称量纸 琼脂 高压蒸汽 酒精灯火焰4(1)接种环 划线 分散(2)火焰旁 棉塞 火焰 冷却 通过火焰 三至五 不要划破培养基 划线的末端 第一区划线 倒置5(

7、1)梯度稀释(2) 酒精 培养基 在火焰上引燃 涂布6频繁使用 长期保存 固体斜面 液体【课前小测】1 2 3 4 5一、培养基的配制原则(1)目的要明确:配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。(2)营养要协调:注意各种营养物质的浓度和比例。(3)ph要适宜:细菌为6575,放线菌为7585,真菌为5060,培养不同微生物所需ph不同。二、微生物对主要营养物质的需求特点不同种类的微生物代谢特点不同,因此对培养基中营养物质的需求也不同。(1)自养型微生物所需的主要营养物质是无机盐,碳源可来自大气中的co2,氮源可由含氮无机盐提供。(2)异养型微生物所需的营养物质主要是有机物,

8、即碳源必须由含碳有机物提供,氮源也主要是由有机物提供,部分异养型微生物也可以利用无机氮源。1下表为某培养基的配方,下列叙述正确的是成分蛋白胨葡萄糖k2hpo4伊红美蓝蒸馏水含量10 g10 g2 g04 g0065 g1 000 mla从物理性质看该培养基属于液体培养基,从用途看该培养基属于选择培养基b该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖,属于氮源的物质是蛋白胨c该培养基缺少提供生长因子的物质d该培养基调节合适的ph后就可以接种使用【参考答案】b【试题解析】分析表中成分可知,该培养基中没有凝固剂,为液体培养基,该培养基的营养成分齐全,但存在伊红、美蓝等鉴别物质,属于鉴别培养基,a项错误;该培养

9、基中的蛋白胨既是唯一的氮源,也是碳源,而葡萄糖是绝大多数生物最常利用的碳源,b项正确;该培养基中存在的无机盐和蛋白胨中的某些物质可以看作是生长因子,c项错误;培养基调节完ph还要进行灭菌等操作后,才能使用,d项错误。2下列有关培养基的叙述中,正确的是a培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质b培养基只有两类:液体培养基和固体培养基c除水以外的无机物只能提供无机盐d无机氮源不可能提供能量【参考答案】a【试题解析】本题主要考查了微生物培养中培养基的含义、类型、营养等方面的知识.根据培养基的物理性质,可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基,在液体培养基中加入不同量的凝固剂如琼脂可形成半固体或固体

10、培养基;除水以外的无机物如nh4hco3,既可以是碳源,也可以是氮源,不仅仅提供无机盐;无机氮源有时也能提供能量,如nh3可以为硝化细菌提供能量。三、无菌技术不同对象的无菌操作方法(连线)3微生物培养过程中,要十分重视无菌操作。现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作,防止杂菌污染。请分析下列操作中错误的是煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢接种操作要在酒精灯火焰附近进行无菌繁殖脱毒苗时,植物的外植体要进行消毒家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌培养基要进行高压蒸汽灭菌加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌a b c d【参考答案】d【试题解析】无菌操作包括消毒和灭菌。需进行消毒处理的

11、有植物的外植体及操作人员的双手等,需进行灭菌的有器皿、培养基、添加剂(指示剂或染色剂)等。煮沸可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢,属于消毒;为防止空气中杂菌污染,接种时要在酒精灯火焰附近进行;家庭制作葡萄酒时所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌,故不能灭菌;培养基常进行高压蒸汽灭菌。故操作错误。4细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌a接种环、手、培养基 b高压锅、手、接种环c培养基、手、接种环 d接种环、手、高压锅【参考答案】c【试题解析】灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力,对于培养基、操作器皿和接种环等都需要灭菌。消

12、毒仅指杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害,如操作者的手和衣着需要消毒处理。高压蒸汽通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种环.四、两种纯化细菌方法的比较项目优点缺点适用范围平板划线法可以观察菌落特征,对混合菌进行分离不能计数适用于好氧菌稀释涂布平板法可以计数,可以观察菌落特征吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延适用于厌氧菌和兼性厌氧菌5下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法,请回答相关问题。(1)图甲是利用_法进行微生物接种,图乙是利用_法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分

13、别是_和_;对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是_和酒精消毒.(2)接种操作为什么一定要在火焰附近进行?_.(3)接种后,在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养?_.(4)如图是采用上述接种方法接种后培养的效果图解,其接种方法是_(填“图甲或“图乙”)。【参考答案】 (1)平板划线稀释涂布平板接种环涂布器灼烧灭菌(2)火焰附近存在着无菌区域(3)避免培养过程产生的水分影响微生物的生长(4)图乙【试题解析】图甲和图乙分别是平板划线法和稀释涂布平板法,这两种方法所用的接种工具分别是接种环和涂布器。由于在酒精灯火焰附近存在着无菌区域,因此接种常在火焰附近进行。在微生物培养过程中会产生水,对

14、微生物的生长造成影响,故需要倒置培养。1下列有关稀释涂布平板法的叙述中,错误的是a首先将菌液进行一系列的梯度稀释b然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面c其核心是防止杂菌污染,保证培养液的纯度d结果都可在培养基表面形成单个的菌落2关于消毒和灭菌的不正确理解是a灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子b消毒和灭菌实质上是相同的c常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌d常用消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外线法、化学药物法3有关倒平板的操作错误的是a将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 b使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰c将培养皿打开,培养皿盖倒放在桌子上 d等待平板冷却

15、凝固后需要倒过来放置4牛奶、吸管、接种环、培养基、空气灭菌的方式依次是灼烧灭菌 巴氏消毒 干热灭菌 紫外线消毒 高压蒸汽灭菌a b c d5关于配制培养基的叙述中,正确的是a制作固体培养基必须加入琼脂 b培养基溶化后,要先调节ph再灭菌 c氮源主要是为微生物提供能量 d牛肉膏主要为微生物提供氮元素6在接种的过程中,下列操作不正确的是a将接种环灼烧灭菌b接种时,取下试管的棉塞后要将试管口灼烧灭菌c将接种环伸入菌种管内,先接触长菌多的部位d要将刚接完种的试管的管口灼烧灭菌后加塞7多环芳烃菲在染料、杀虫剂等生产过程中被广泛使用,是土壤、河水中常见的污染物之一.如图表示科研人员从被石油污染的土壤中分离

16、获得能降解多环芳烃菲的菌株q的主要步骤。请回答:(1)步骤的培养过程中,需将锥形瓶放在摇床上振荡,一方面使菌株与培养液充分接触,提高营养物质的利用率;另一方面能。(2)步骤用平板划线法纯化菌株q过程中,在做第二次以及其后的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线,原因是.采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是 。(3)接种环通过灼烧来灭菌,完成步骤中划线操作,共需灼烧接种环次。(4)为了获得分解多环芳烃菲能力更强的菌株,研究人员又对菌种q进行了诱变处理,得到突变株k。为了进一步鉴定菌株k并比较两种菌株降解多环芳烃菲的能力,设计了下列实验,请补全实验步骤:取9只锥形瓶均分成三组,编号a、b、

17、c.向a、b、c三组锥形瓶中加入的培养液.向a、b、c三组培养液中分别加入 。28 恒温培养3天后,测定 。8下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤,下列说法错误的是a步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行b步骤中待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖c步骤中,每次划线前后都需对接种环进行灼烧处理d划线接种结束后,将图平板倒置后放入培养箱中培养9下列关于微生物培养的操作中,正确的是a将接种环放在火焰上灼烧灭菌,不要把接种环烧红b稀释菌液时,必须将菌液与水充分混匀c将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃后,在酒精没有燃尽前就要进行冷却d取土样用的小铁铲和盛土样用的信封在使用前,不需要灭菌10制备

18、牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是a计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 b计算、称量、溶化、倒平板、灭菌c计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 d计算、称量、灭菌、溶化、倒平板11有关纯化大肠杆菌实验操作的叙述,不正确的是a在第二区域内划线时,接种环上的菌种直接来源于菌液b第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物c每次划线前,灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种d划线结束后,灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者12用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时都需要用固体培养基都需要使用接种针进行接种都需要在火焰旁进行接种都可以用菌落数来计数活菌a

19、 b c d13在生物技术上常利用大肠杆菌制成“工程菌。某生物小组的同学,利用实验室提供的大肠杆菌品系及其他必要材料,对该品系大肠杆菌进行了培养。请分析回答:(1)微生物在生长过程中对各种成分的需求量不同,故制备培养基时各成分要有合适的。培养基中含有的蛋白胨、淀粉可分别为微生物提供 .(2)配制培养基时,各种成分在溶化后分装前必须调节,接种前要进行处理。(3)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是 。(4)在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时,平板冷凝后,应将平板放置,这样做的目的是防止皿盖上的水珠落入而造成污染。(5)甲同学采用平板划线法接种,获得单个菌落后继续筛选,在每次划线之前都要灼烧

20、 ,他这样做的目的是.在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?,为什么? 。(6)实验结束时,使用过的培养基应进行灭菌处理后才能倒掉,这样做的目的是。14某学习小组同学为调查湖水中细菌的污染情况进行了相关的实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、观察统计菌落数。(1)制备培养基时,在进行称量、溶化、定容后,灭菌之前还需进行的操作是_;对培养基进行灭菌,一般采用的方法是_,采用此方法灭菌的原因是_。(2)整个微生物的分离和培养过程,一定要注意在_条件下进行。(3)图甲和图乙是采用两种接种方法接种培养后得到的菌落分布图,图甲对应的接种方法是_,图乙对应的接种方法是_。(4)为使该实验所得结果可

21、靠,还应该实施的操作是_.(5)获取目的菌后如要临时保存,可将其接种在_上,等长出菌落后放在_的冰箱中保存。15(2016江苏卷)漆酶属于木质素降解酶类,在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。如图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程,相关叙述正确的是a生活污水中含有大量微生物,是分离产漆酶菌株的首选样品b筛选培养基中需要加入漆酶的底物,通过菌落特征挑出产漆酶的菌落c在涂布平板上长出的菌落,再通过划线进一步纯化d斜面培养基中含有大量营养物,可在常温下长期保存菌株16(2016四川理综)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程,图乙是脲酶基因转录的mrna部分序列.(1)图中选择培养基应以为唯一氮源;鉴别

22、培养基还需添加作指示剂,产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后,其菌落周围的指示剂将变成色。(2)在5个细菌培养基平板上,均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液01 ml,培养一段时间后,平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。该过程采取的接种方法是,每克土壤样品中的细菌数量为108个;与血细胞计数板计数法相比,此计数方法测得的细菌数较.(3)现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活,突变后基因转录的mrna在图乙箭头所示位置增加了70个核苷酸,使图乙序列中出现终止密码(终止密码有uag、uga和uaa)。突变基因转录的mrna中,终止密码为,突变基因表达的蛋白含个氨基酸.1【

23、答案】d【解析】首先将菌液进行一系列的梯度稀释,a正确;然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,b正确;其核心是防止杂菌污染,保证培养液的纯度,c正确;用不同稀释度的菌液接种后,只有在一定的稀释度的菌液里,聚集在一起的微生物才能分散成单个细胞,从而能够在培养基表面形成单个菌落,如果稀释度过低,将不会形成单个菌落;如果稀释度过高,可能没有菌落生成,d错误。2【答案】b【解析】灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子,a正确;消毒的强度小,而灭菌则能消灭一切生命体,b错误;常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌,c正确;常用消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外线法、化学

24、药物法,d正确。3【答案】c【解析】倒平板应采用的培养皿是灭过菌的,应在火焰旁进行,故a正确。为了防止杂菌污染应将打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰,故b正确。倒平板时只需将培养皿打开一条缝隙即可,故c错误.倒平板后为了防止皿盖上的蒸馏水滴落下来污染培养基应倒置,故d正确。4【答案】a【解析】巴氏消毒法用于牛奶及其制品的消毒,不会破坏其营养成分;吸管能耐高温,需用干热灭菌;接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果;培养基用高压蒸汽灭菌;空气可用紫外线消毒。依据以上分析,正确,选a.5【答案】b【解析】制作固体培养基时必须加入凝固剂,琼脂是常用的凝固剂,但不是唯一的凝固剂;培养基溶化后,在灭菌之前要先

25、调节ph,这样做既能使培养基ph均匀,又能避免培养基被污染(和灭菌后调节ph相比);氮源主要是作为微生物蛋白质和核酸的原料;牛肉膏主要为微生物提供碳源、磷酸盐和维生素。6【答案】c【解析】将灼烧过的接种环伸入菌种管内,要先在试管内壁或未长菌落的培养基上接触一下,让其充分冷却,然后轻轻刮取少许菌落,再从菌种管内抽出接种环。7【答案】(1)增加培养液中的溶氧量(或增加培养液中的含氧量)(2)线条末端细菌的数目比线条起始处要少(或能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终得到由单个细菌繁殖的菌落)防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基 (3)6(4)等量的以多环芳烃菲为唯一碳源 等量的无

26、菌水、菌株q菌液和突变株k菌液 锥形瓶中多环芳烃菲的降解率【解析】(1)步骤的振荡培养可使菌株与培养液充分接触,提高营养物质的利用率;同时增加培养液中的溶氧量,有利于菌株的代谢。(2)步骤用平板划线法纯化菌株q,总是从上一次划线的末端开始划线,由于线条末端细菌的数目比线条起始端要少,可最终得到由单个细菌繁殖的菌落,从而达到纯化的目的。固体平板培养细菌时要倒置的目的是防止冷凝水滴在培养基上污染培养基.(3)完成步骤中5次划线操作,共需灼烧接种环6次。(4)鉴定菌株k并比较菌株k、菌株q降解多环芳烃菲的能力,需用等量多环芳烃菲为唯一碳源,设置对照、菌株k和菌株q共三组,分别用等量的无菌水、菌株q菌

27、液和突变株k菌液接种,在相同且适宜的条件下培养,最后测定多环芳烃菲的降解率。8【答案】b【解析】a项正确:培养与纯化大肠杆菌的过程中需要在酒精灯的火焰旁进行;b项错误:步骤中倒入培养基后应立即盖上培养皿的皿盖;c项正确:步骤接种时,每次划线前后都要对接种环进行灼烧处理;d项正确:划线接种结束后,将平板倒置后放入培养箱培养,防止冷凝水污染培养基。9【答案】b【解析】选项a,将接种环放在火焰上灼烧灭菌,必须把接种环烧红,说法错误;选项b,稀释菌液时,需要进行三次稀释,每次都要保证菌液与水充分混匀,说法正确;选项c,将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃后,必须待酒精燃尽后,再进行冷却,说法错误;选项d

28、,取土样用的小铁铲和盛土样用的信封在使用前,一定要进行灭菌,说法错误。10【答案】c【解析】制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,应先根据需要计算各成分用量,然后称量、溶化、灭菌、倒平板,故选c。11【答案】a【解析】在纯化大肠杆菌的实验操作中,从第二次划线开始,每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端而不是来源于菌液。接种环取菌种前灼烧的目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物,以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线后残留的菌种,划线结束仍需灼烧接种环,避免细菌污染环境和感染操作者。12【答案】b【解析】正确,固体培养基上面可以获得大肠杆菌的单菌落;错误,分离纯化大肠杆菌可使用接种环或

29、涂布器进行划线法或涂布平板法接种;正确,在火焰旁会形成一个相对无菌区来进行接种,可以避免杂菌污染;错误,平板划线法只能用来分离纯化获得单菌落,而不能用来计数。故答案选b.13【答案】(1)浓度和比例 氮源、碳源(2)ph 灭菌(3)高压蒸汽灭菌(4)倒过来 培养基(5)接种环 杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种 需要 防止接种环上残留的菌种对环境造成污染和感染操作者(6)防止污染环境【解析】(1)配制培养基的一条重要原则是营养要协调,要注意各种营养物质的浓度和比例。(2)各种微生物适宜生长的ph范围不同,配制培养基要注意调节ph。无菌技术是为了防止实验室的培养物被其他外来微生物污染,造成培养失败.因此,在接种前一定要对培养基进行灭菌。(4)平板冷凝后皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较大,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染.(5)每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,最终得到单个菌落.划线结束后仍要灼烧接种环,以免接种环上残留的菌种对环境造成污染和感染操作者。14【答案】(1)调节ph 高压蒸汽灭菌 只有在此温度以上

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